химический каталог




Введение в микромасштабную высокоэффективную жидкостную хроматографию

Автор M.Гото, К.Джинно, Д.Исии, M.Сайто, M.Сенда и др.

матограмма стандартной смеси андросте-рона и дегндроэпиандросте-рона с послеколоночной де-риватизацией разделенных компонентов по ферментативной реакции с NAD. Колонка 250 мм х 1,5 мм (внутр. диам.); неподвижная фаза JASCO Fine SIL С,-5; температура колонки 25°С; подвижная фаза метанол/во-да (60/40); объемная скорость 0,1 мл/мин; колонка с иммобилизованным ферментам 30 мм х 1,5 мм (внутр. Диам.); с JlS-Enzymepak-HSD; реагент 0,3 ммоль/л NAD + 10 ммоль/л фосфат К + 1 ммоль/л ЭДТА + 0.05 % 2-меркаптоэтанола (рН 7,8); объемная скорость 0.1 мл/мин; температура ^5°С; детектирование флуоресцентное, длина волны в°збуждающего излучения 3*0 нм, измеряемого - 470 И|ч. Пикн: А - анд росте рои

го мин

10

<7.3 нг). ДНЕА - дегидро-""иандростерон (7,2 нг).

^пртюше производных после разделения . _&

ЛИТЕРАТУРА

1 Decider AS., Kroll M.G.F., Van den Berg J.H.M. J. Chromatogr. 1986, 125, 307.

2. Decider R.S., Kroll M.G.F., Beeren A.J.B., Van den Berg J.H.M. I. Chrome togr. 1978, 149, 669.

3. Decider R.S., Kuijpers A.T.J.M., Van den Berg J.H.M. J. Chromatogr. 1983, 255, 545.

4. Yoshloka M., Tamura Z.. Senda M., Mlyazakl T. J. Chromatogr. 1985, 344,' 345.

5. Takeuchi Т., Saito S., Ishii D. J. Chromatogr. 1983, 258, 125.

6. Okuyama S., Kokubun N.. Higashldate S., Vemura D, Hirata Y. Chem. Lett. 1979, 12, 1443.

сом. Подученная смесь поступает в колонку с ферментом, где дегидрогеназы За- и ЗуЗ-оксистероидов иммобилизуются. В этой колонке оксистероиды окисляются, a NAD восстанавливается до NADH. Это последнее соединение обладает интенсивной флуоресценцией (см. рис. 6-8). Для определения оксистероидов достаточно возбуждать NADH излучением с длиной волны 340 нм и измерять интенсивность флуоресценции при 470 нм. На рис. 6-9 приведена хроматограмма стандартной смеси андростерона (За-оксистероид) и дегидроэпиандростерона (3/3-оксистероид), а на рис. 6-10 - хроматограмма андростерона и дегидроэпиандростерона, выделенных из мочи человека.

7. ПРИМЕНЕНИЕ МИКРОМАСШТАБНОЙ ВЭЖХ

Д Исии, Т. Такеучи, К Хиби'

7.1. ВВЕДЕНИЕ

По сравнению с обычной ВЭЖХ, в которой применяются колонки диаметром 4-8 мм, микромасштабная ВЭЖХ обладает следующими преимуществами:

1. Невысокие эксплуатационные расходы благодаря малому потреблению растворителя.

2. Высокая чувствительность, обусловленная малой дисперсией хроматографической полосы в колонке.

3. Высокая эффективность длинных микроколонок.

4. Возможность использования ряда новых методов детектирования вследствие меньшей объемной скорости элюента.

Благодаря этим преимуществам микро-ВЭЖХ получила широкое распространение, и на ее основе разработано множество аналитических методик. В предыдущих главах рассмотрены некоторые из них. Еще несколько интересных примеров применения микро-, полумикро- я высокоскоростной ВЭЖХ описаны в настоящей главе.

7.2. ПРИМЕНЕНИЕ МИКРО-ВЭЖХ 7.2.1. Фундаментальные исследования

Одним из преимуществ микро-ВЭЖХ на колонках из политетрафторэтилена (ПТФЭ) является малое время их кондиционирования. Эта особенность таких колонок используется при исследовании свойств насадочных материалов и оптимизации условий анализа. Хара и сотр. [1 ] применили данный метод в исследованиях, посвященных оптимизации состава элюента при разделении индольных алкалоидов методом нормально-фазовой ВЭЖХ на силикагеле.

Изучая свойства полистирального геля с целью выбора наиболее приемлемого материала для разделения полимиксиноD Ishii, Т. Takeuchi, Department of Applied Chemistry, Faculty of Engineering. Nagoya University, Chikusa-ku, Nagoya 464, Japan. K. Hibi, Japan Spectroscopic Company, Ltd., Hachioji City, Tokyo 192, Japan.

Рис. 7-1. Блок-схема системы микро-ВЭЖХ, предназначенной для определения желчных кислот.

а - послеколоночная смесительная система; б - предварительная смесительная система. 1 - насос, 2 - устройство для создания градиента, 3 - миниатюрный кран-дозатор, 4 - предохранительная колонка, 5 - разделительная колонка, б - тройник, 7 - колонка с иммобилизованным ферментом, Я - флуо-риметр.

вых антибиотиков, Кимура и сотр. [2] также остановились на микро-ВЭЖХ. Мияки и сотр. [3] использовали фторопластовую микроколонку внутренним диаметром 0,5 мм для установления коэффициентов распределения ряда лекарственных средств между н-октанолом и водой. Неподвижной фазой служил силикагель, модифицированный октанолом. Это исследование должно было объяснить гидрофобность некоторых лекарственных средств.

7.2.2. Определение желчных кислот в сыворотке крови

Определение желчных кислот в сыворотке крови необходимо в диагностических целях, поскольку анормальное их содержание является признаком нарушения работы печени. Повышенная чувствительность метода микро-ВЭЖХ делает его особенно пригодным для анализа биологических объектов.

Применение методов ВЭЖХ для определения желчных кислот с использованием За-оксистероидной дегидрогеназы (3-HSD) для послеколоночной дериватизации разделенных компонентов описано в работах [4, 5]. Этот метод по разрешающей

Ш.

Применение ±ми

страница 43
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58

Скачать книгу "Введение в микромасштабную высокоэффективную жидкостную хроматографию" (2.4Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
сковороды монета италия официальный сайт
домашний кинотеатр комната
товары для настольного тенниса в новокузнецке
стул чарли клм

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(29.05.2017)