химический каталог




Введение в микромасштабную высокоэффективную жидкостную хроматографию

Автор M.Гото, К.Джинно, Д.Исии, M.Сайто, M.Сенда и др.

(24). Как показано на рис. 6-2, взаимосвязь между продолжительностью реакции, длиной реактора и вкладом реактора в расширение пика имеет тот же характер, что и для безнасадочного Капиллярного реактора.

АР ??

31L

(20)

4F

где Ь, - константа проницаемости насадки реактора. Среднее время нахождения компонента в реакторе t

(21)

где dc - внутренний диаметр трубки реактора, Р - суммарная объемная скорость смеси реагента и подвижной фазы, е - коэффициент пористости насадки. Подставим в уравнения (19) -(21) типичные для полумикро-ВЭЖХ значения dc = 1,5 мм, F « 3,333-1 О*3 см3/с и примем, что е - 0,48, А - - 0,8, Dm - 10s см2/с, rj - Ю-2 г/см.с2 и kq - 210"3. Тогда

t - 2,543 L (22)

ст2 = (2,631 10 + + 168,3 aL1-33) L (23)

АР - 1,996 L /сРр (24)

Таблица 6-2. Максимальная продолжительность реакции и максимальная длина реактора для насадочных реакторов*

51 66 39 26 20

129 168 98 67 50

10 20 30 40 50

Размер частиц насадки, мкм ^max* с ^тах' см

аДопустимо уширение пика диам. реактора 1,5 мм.

10% и падение давления на 100 бар. ВнутрСтанРис. 6-2. Взаимосвязь иежду продолжительностью реакции t. Длиной реакционной колонки L и размыва-"ием пика. СТ,(оЬ) -^идартное отклонение чаблюдаемого пика, •"Раженное в едиии-4a* времени: О,, ""?ад колонки *Р1ное отклонение ^ика; d_ - диаметр ч"стиц насадки.

\0

•а «У

50

ли

100

t, в

ISO

200

6. Получение производных после разделят,^

^Ппжучение производных после разделения

Как уже указывалось выше, при применении полумикроколонок безнасадочные открытые капиллярные реакторы пригодны в тех случаях, если продолжительность реакции составляет от одной до десяти секунд; если же продолжительность реакции составляет от нескольких секунд до примерно одной сотой секунды, то целесообразнее использовать насадочные реакторы.

7^***^ Т] >^ + ВгСН2СНО

6.3. ПРИМЕНЕНИЕ

Йошиока и сотр. [4] разработали метод анализа аденино-вых нуклеотидов с применением системы микро-ВЭЖХ с по-слеколоночным реактором. На рис. 6-3 показана блок-схема такого анализатора. Реагент (бромацеталвдегид), необходимый для получения соответствующих производных нуклеотидов, вводится в элюент заранее. Поступающий из колонки элюат, содержащий разделенные адениновые нуклеотиды, вводится вместе с реагентом в спиральный реактор, нагретый до 100°С. В результате протекающей в нем реакции образуются интенсивно флуоресцирующие соединения - 1-М°-этаноадениновые (е -адениновые) нуклеотиды (рис. 6-4). Продукты реакции непрерывно детектируются флуориметрическим детектором. Флуо-| рнс. 6-4. Реакция бромацетальдегида с аденииовыми нуклеотидами.

ресцснцию возбуждаег излучение с длиной волны 253,7 нм, а измерение проводится при 400 нм. На рис. 6-5 показана хроматограмма стандартной смеси аденозина, аденозинмонофосфата (АМФ), аденозиндифосфата (АДФ) и аденозинтрифосфата (АТФ), а на рис. 6-6 - хроматограмма адениновых нуклеотидов, выделенных из мозга крысы.

Такеучи и сотр. [5] применили описанный метод для анализа желчных кислот. В качестве послеколоночного реактора использовалась колонка с иммобилизованным ферментом [6]. Этот же подход можно применять для определения методом

S s st

Насос Дозатор

1Термостат —I колонки

Колонка

Самописец

АД/Л.

Ю

20 мин

Термостат Двягехтор реактора

<раза

Рнс. б-З. Блок-схема анализатора адениновых нуклеотидов с применением слеколоночной дериватизации разделенных компонентов.

Рис. 6-5. Хроматограмма стандартной смеси аденозиновых и адениновых нуклеотидов. Детектировались продукты послекол он очной реакции разделенных компонентов с бромацетальдегидом. Колонка 35 мм х 4,6 мм (внутр. диам.); неподвижная фаза Hitachi gel 3012-N (сферические частицы анионообменного пористого полистирольного полимера диаметром 7 мкм); температура колонки 45°С; подвижная фаза раствор, содержащий 0,025 моль/л лимонной кислоты, 0,05 моль/л гидрофосфата натрия и 0,4 моль/л хлорида натрия (рН 5,0)/аце-тонитрил (4/П. содержащий 0,1 моль/л бромацетальдегида; объемная скорость 0,1 мл/мии; реакционная спиральная колонка 30 м х 0,1 мм (внутр. диам.); температура реакционной колонки 100°С; детектирование флуоресцентное, Длина волны возбуждающего излучения 253,7 им, измеряемого флуоресцентного излучения 400 им. AMP - аденозинмонофосфат, сАМР - циклический AMP, ADp - адеиозиндифосфат, АТФ - аденозинтрифосфат. Содержание каждого из компонентов в пробе 1 пмоль.

и±_

Гидроксистероиды

155

70

20 мин

Раствор NAD

) Насос

О

Насос для подачи реагента

Л Дозатор

Колонка

/Солонка с илглю5илизировссн-нбш <рерментом

Детектор

Рис. 6-7- Блок-схема аналитической установки для определения 3GC- и З/З-о*" с и стероидов с использованием после колон очном ферментативной дериватизации .. разделенных компонентов.

микро-ВЭЖХ За- и 3/3-оксистероидов. На рис. 6-7 показана схема соответствующей аналитической установки. Выходящий из колонки элюат, содержащий разделенные о к си стероиды, смешивается с раствором NAD, подаваемым специальным насоHi

Рис. 6-9. Хро

страница 42
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58

Скачать книгу "Введение в микромасштабную высокоэффективную жидкостную хроматографию" (2.4Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
адвокат по бракоразводным процессам москва
амт гастрогус
unv-002
паспорт на урну

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(19.01.2017)