пиллярных колонок решение задачи существенно упрощается, поскольку благодаря значительному снижению объемной скорости часто достаточно лишь несколько модифицировать систему, чтобы обеспечить возможность ввода всего выходящего из колонки элюата непосредственно в масс-спектрометр.

Комбинированные системам

^ Комбинированные системы

133

Is §2

В настоящее время чаще всего используются два метода сопряжения ВЭЖХ с масс-спектрометром: метод механического переноса (посредством движущейся ленты!' и метод прямого ввода. Последний насчитывает много вариантов: ввод через диафрагму с малым отверстием, через длинный капилляр, распыление в вакууме с обогащением, термовпрыскивание и пр.

В данной главе рассматриваются основные принципы типичных методов сочетания ВЭЖХ-МС и примеры их применения. Основное внимание при этом уделено микро-ВЭЖХ.

Г9 а8

5 о 5 5 ,

а

с л о

1 sax.

.IS'

5.2.2. Метод механического переноса

На рис. 5-10 приведена схема типичной системы ВЭЖХ-МС с движущейся лентой, выпускаемой фирмой Finigan [19]. Элюат, выходящий из хроматографической колонки, непрерывно наносится на движущуюся полиимидную ленту (фирмы Kapt) шириной 3 мм. После испарения растворителя лента протягивается через вакуумноплотные сальники с постоянной скоростью (2 - 3 см/с) в ионизационную камеру, где исследуемые компоненты пробы, оставшиеся на ленте, быстро испаряются под воздействием электрического нагревателя. Остатки анализируемых веществ удаляются с ленты при помощи второго нагревателя. Ионизация анализируемых веществ осуществляется как методом электронного удара, так и химически. Однако в некоторых случаях возникают серьезные трудности вследствие термического разложения термолабильных веществ на ленте еще в процессе удаления растворителя. Емкость ленты по отношению к растворителю изменяется в зависимости от природы последнего. При больших объемных скоростях иногда удается добиться хороших результатов, прибегая к делению потока. При увеличении содержания воды в подвижной фазе емкость ленты уменьшается и может достигать всего 0,05 мл/мин. В таких случаях более эффективно нанесение пробы на ленту в виде аэрозоля [20].

На рис. 5-11 изображена типичная масс-хроматограмма, полученная на установке ВЭЖХ-МС с движущейся лентой. В данном случае в колонке проводилось обращенно-фазовое раз-Деление антибиотиков (спектиномицина и акти намина) с применением градиентного элюирования. Детектирование осуществлялось посредством масс-спектрометра с метановой химической ионизацией [19].

В статье Каргера и сотр. [21 ] описано применение системы ВЭЖХ-МС с механическим переносом пробы в сочетании с жидкостной экстракцией для анализа различных малолетучих соединений, в том числе жирных кислот, спиртов, аминов и пестицидов.

5. Комбинированные системы

Г1 / ф \ rjiJteiiimiilJi . ||

134

ИЛ | П |.гЧ

Рис. 5-10. Сопряжение жидкостного хроматографа с масс-спектрометром при помощи движущейся ленты (с разрешения Finigan Corporation).

а - ввод растворителя' для очистки ленты, б - удаление неорганического осадка, в - слив; I - источник ионов, 2 - испаритель, J - вакуумноплотные сальники, 4 - источник ИК-излучения, J - ввод элюата из хроматографиче-ской колонки, 6 - расщепление потока, 7 - приводные ролики, 8 - движущие ролики, 9 - слив, 10 - промывной растворитель, 11 - насосы, 12 - нагреватель очистительного устройства.

В последнее время в .ВЭЖХ-МС получила распространение также тенденция сочетать метод переноса на движущейся ленте с методами, включающими ионизацию на поверхности, например масс-спектрометрию вторичных ионов (МСВИ) [22, 23], бомбардировку быстрыми атомами (ББА) [24] и лазерную десорбцию [25]. При применении этих методов упомянутые выше ограничения метода движущейся леиты, связанные с возможностью термического разложения определяемых соединений в процессе удаления растворителя, могут быть почти полиостью устранены.

133

5.2.3. Ввод пробы в масс-спектрометр через диафрагму с малым отверстием или через длинный капилляр

Системы, в которых ввод пробы осуществляется через ди-1 афрагму с малым отверстием, первоначально предназначались | для соединения обычных колонок для ВЭЖХ с масс-спектрометром. Небольшая часть (около 1%) выходящего из колонки! элюата подавалась в ионный источник масс-спектрометра, где | пары растворителя выполняли роль газообразного реагента, обеспечивающего химическую ионизацию. В работах [26, 27] I

a s з I = 31 Л

"7 о ? о

ЯШ

Ь Г I s и

136

5. Комбинированные системы

« Комбинированные •

137

описаны системы (рис. 5-12), в которых весь элюат, выходящий из микроколонки для ВЭЖХ (10 - 60 мкл/мин), вводит ся в источник химической ионизации через диафрагму с отверстием диаметром 5 мкм. В такой системе летучие буферные смеси, содержащие гидроксид аммония, триметиламин, ацетат аммония и трифторуксусную кислоту, могут использоваться без каких-либо осложнений. С помощью этой системы был успешно проведен анализ различных стероидов.

f 2 3 v 5

Бруинс и со