химический каталог




Введение в микромасштабную высокоэффективную жидкостную хроматографию

Автор M.Гото, К.Джинно, Д.Исии, M.Сайто, M.Сенда и др.

ика исследуемого вещества. В системах, оснащенных полумикроколонками, при детектировании умеренно удерживающихся пиков (X - 3 - 6) кюветы объемом 3-6 мкл не дают сколько-нибудь заметного уширения пиков. В то же время чувствительность детектирования повышается благодаря высокой концентрации определяемого компонента в выходящем из колонки пике. Однако вследствие уменьшения облучаемого объема раствора применение меньших кювет (объемом порядка 1 мкл) ведет к потере этого выигрыша в чувствительности.

106

i. Детектируюише системы 109

На рис. 4-10 сравниваются хроматограммы, полученные с различными кюветами. Все хроматограммы соответствуют одному и тому же количеству детектируемого компонента. Хроматограммы а - в получены на одной и той же полумикроко-лонке, а приведенная для сравнения хроматограмма г - на обычной колонке. На хроматограммах а и б (кюветы объемом 1,5 и 3 мкл) пики хорошо, разделены и имеют удовлетворительную форму. Что касается хроматограммы в (объем кюветы 7 мкл), то здесь наблюдается заметное ухудшение разделения. Хотя уровень шума в этом случае несколько повысился вследствие увеличения облучаемого объема, но высота пиков тоже возросла и отношение сигнала к шуму увеличилось пропорционально увеличению объема кюветы. На хроматограмме г (обычная колонка, кювета объемом 7 мкл) высоты пиков и уровень шума такие же, как на хроматограмме а.

Рис. 4-11 иллюстрирует высокую селективность спектроф-луориметрического детектора. На всех хроматограммах детектировались одинаковые количества вещества. Длины волн возбуждающего и измеряемого излучений были выбраны оптимальными применительно к пику 6 (антрацену). На рис. 4-10 этот пик относительно мал, а на рис. 4-11 он намного больше, отношение сигнал/шум при этом также значительно выше. В то же время все остальные пики на рис. 4-11 едва заметны.

В табл. 4-2 указаны пределы обнаружения антрацена на четырех хроматограммах, изображенных на рис. 4-11. Как следует из таблицы, минимальные детектируемые концентрации пропорциональны облучаемому объему элюата. Пределы обнаружения (минимальные детектируемые количества вещества) также пропорциональны облучаемому объему в тех случаях, когда размывание пика незначительно. В результате применение кюветы объемом 7 мкл дает не столь большое повышение чувствительности, как можно было бы ожидать исходя из соотношения объемов. Предел обнаружения при применении обычной колонки и кюветы объемом 7 мкл превышает предел обнаружения для полумикроколонки с кюветой объемом 1,5 мкл, хотя первая кювета повышает чувствительность по концентрации в 4 раза. При использовании кюветы в 7 мкл в сочетании с полумикроколонкой удается детектировать до 0,14 вг антрацена; при замене же полумикроколонки в той же системе на обычную колонку чувствительность ухудшается в 5 Раз. Разумеется, необходимо отметить, что если детектируемый пик выходит очень быстро (т. е. если к' мало), то применение кюветы объемом 7 мкл влечет за собой заметное размывание пика. Однако при разделении методом обращенно-фазо-вой хроматографии соединений типа антрацена это маловероятно.

110

4. Детектирующие систем^Л

л. Детектирующие системы

111Таблица 4-2. Взаимосвязь между объемом кюветы и чувствитель-|

ностью при детектировании по флуоресценции3

Хроматограмма Колонка** Объем кюветы Минимальное Минимальное

(облучаемый детектируемое детектируемая

объем), мкл количество концентрация

0,50 0,25 0,14 0,65

ПМ

пм

ГШ

о

антрацена* антрацена

6.0 (1,5)

6,0 (3,0)

15,0 (7.0) 15,0 (7,0)

(S/N = 2). пг <Д/ЛГ = 2), 10-7%

0,02 0.01 0.005 0,005

I: Вычислено из хроматограмм, приведенных на рис. 4-11. " ПМ - полумикроколонка (250 мм х 1,5 мм (внутр. диам.), насадка - сили* кагель с частицами размером 10 мкм, модифицированный ОДС); О • обычн колонка (250 мм х 4,6 мм (внутр. диам.), насадка та же). в Введенное количество.

4.3.3. Постоянная времени

Проблемы, связанные с постоянной времени, для флуоресцентного детектора те же, что и для других детекторов. Однако следует отметить, что природа шума у флуоресцентного детектора очень близка к так называемому "белому шуму", в котором в равной пропорции содержатся все частоты - от самых низких до самых высоких. Для подавления шума такого типа весьма эффективен фильтр с малым пропусканием. Если постоянная времени слишком мала, то это только увеличивает шум и снижает чувствительность. Если, наоборот, постоянная времени чересчур велика, то наблюдается размывание пиков в искажение их формы, в результате чего ухудшается точность анализа. Из изложенного следует, что постоянную временя следует тщательно выбирать, учитывая протяженность во времени измеряемого пика.

На рис. 4-12 показаны хроматограммы, полученные на ОД' ном и том же флуоресцентном детекторе, но с различными постоянными времени. Хроматограмма б (постоянная временя 2 с) идентична хроматограмме а на рис. 4-10. ХроматограмШ а на рассматриваемом рисунке получена в тех же условия*; но с меньшей постоянной времени (0,2 с). При постоянно* вр

страница 30
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58

Скачать книгу "Введение в микромасштабную высокоэффективную жидкостную хроматографию" (2.4Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
наклейка honda
паховая грыжа у мужчин цена
мхт билеты на 9.12.17
заказ спринтеров москва

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(16.12.2017)