химический каталог




Введение в микромасштабную высокоэффективную жидкостную хроматографию

Автор M.Гото, К.Джинно, Д.Исии, M.Сайто, M.Сенда и др.

тоянная времени детектора является одним из важных факторов. На рис. 4-S изображены две хроматограммы, полученные в одинаковых условиях, ио с различной постоянной времени регистрирующей системы. Для хроматограммы а эта постоянная равна 0,05 с, поэтому форма пиков вполне приемлема, хотя всего за 60 с из колонки элюируется пять пиков. Однако о хроматограмме б, полученной при постоянной времени 1,0 с, этого сказать нельзя. Из-за большой постоянной времени пики на этой хроматограмме существенно искажены, что делает ее непригодной для количественного анализа. В обоих случаях анализ проводили на колонке размером 4,6 мм (внутр. диам.) х 50 мм, заполненной силикагелем, модифицированным ОДС (размер частиц 3 мкм), при объемной скорости 2,0 мл/мин.

4.3. ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЕ ДЕТЕКТОРЫ

Флуоресцентные детекторы чрезвычайно чувствительны. Оии используются для селективного детектирования веществ, способных флуоресцировать при возбуждении УФ-излучением. Чувствительность такова, что позволяет обнаруживать пикограммы (а в отдельных случаях даже фемтограммы) определенных веществ. Для флуоресцентного детектирования характерны высокая чувствительность и селективность.

В детекторах, основанных на поглощении излучения, измеряемый сигнал представляет собой небольшое изменение на интенсивном фоне. При флуоресцентном детектировании, наоборот, сигнал, хотя и слабый, измеряется на темном фоне. Это позволяет применять в системе регистрации сигнала устройства с большим коэффициентом усиления, например фотоумножители. Основными источниками шума во флуоресцентном детекторе являются темновой ток фотоумножителя, шум предварительного усилителя, фоновая флуоресценция растворителя и паразитное излучение, связанное с рассеянием возбуждающего излучения на измерительной кювете.

Флуоресцирующие соединения возбуждаются в результате поглощения УФ-излучения при определенной длине волны и затем испускают люминесцентное излучение с большей длиной волны (см. рис. 4-9). Чтобы получить спектр возбуждения, изрис. 4-9. Спектр возбужденна (Ех) и спектр испускания (Em) бензола. Проба - раствор бензола а метаноле <100.10"4%>; спект-рофлуориметр JASCO FP-550A. Длина волны возбуждающего излучения 220 - 300 нм, флуоресцентного излучения 280 нм; ширина щели возбуждающего моно-хроматора 3 нм, измерительного монохроматора 10 нм. Условия регистрации спектра испускания: длина волны возбуждающего излучения 250 нм, флуоресцентного излучения 250 - 300 нм, ширина щели возбуждающего монохроматора 5 нм, измерительного монохроматора 5 нм.

меряют интенсивность флуоресценции (обычно на максимальной длине волны испускания), одновременно изменяя длину волны возбуждающего излучения. Спектр возбуждения представляет собой зависимость интенсивности флуоресценции от Длины волны возбуждающего излучения; обычно он аналоги-чен спектру поглощения исследуемого вещества. Спектр испускания получают путем измерения интенсивности флуоресцентного излучения при различных длинах волн. При этом длину в°лны возбуждающего излучения обычно устанавливают соответствующей максимуму возбуждения или поглощения. КаждоЦТ

104 _ 4. Детектирующие системы Н

му соединению присущи специфические спектры поглощения и I испускания, которые определяются строением его молекулы, Щ Благодаря этому исследователь может определять интересующее его соединение, устанавливая длину волны возбуждения и измерения в соответствии с максимумами спектров возбуждения и испускания. Таким образом, помехи при определении искомого вещества на выходе из колонки отсекаются как бы двумя фильтрами. Благодаря этому селективность определения существенно возрастает. Высокая селективность флуоресцентного детектора позволяет выявлять требуемые соединения в сложных многокомпонентных смесях, в том числе в биологических жидкостях, пищевых продуктах, лекарственных препаратах и окружающей среде. Кроме того, вещества, не способные к флуоресценции, можно подвергнуть пред- или послеколоноч-ной дериватизации - обработке специальными реагентами, взаимодействующими только со специфичными группами искомого соединения и превращающими его' в флуоресцирующее вещество. Такой прием позволяет существенно повысить селективность определения. Мы вернемся к этому вопросу более подробно в гл. 6. Таким образом, применение флуоресцентного детектирования тесно связано с пред- или послеколоночной де-риватизацией. Авторы работы [10] описали миниатюрную по-слеколоночную систему для получения флуоресцирующих производных при определении аминов, а Такеучи и сотр. [11] -аналогичную систему для определения желчных кислот, в которой использовалась реакционная колонка с насадкой, содержащей иммобилизованный фермент.

4.3.1. Детектирующие системы

Детектирующие флуоресцентные системы существенно отличаются от систем, основанных на поглощении излучения. При флуоресцентном детектировании проточная ячейка облучается ультрафиолетовым излучением, которое возбуждает молекулы анализируемой пробы. Далее эти молекулы испускают во всех направлениях флуоресцентное излучение. В принци

страница 28
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58

Скачать книгу "Введение в микромасштабную высокоэффективную жидкостную хроматографию" (2.4Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
купить нумерацию помещений
гостиница азимут в кемерово
купить билеты на концерт янтар, анна
стулья в наличии купить

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(17.12.2017)