ия температуры [49].

Рис. 3-22 демонстрирует разделение нуклеозидов на катио-нообменной колонке. Как следует из приведенных хроматог-рамм, колонки с ароматической и алифатической ионообменной смолой имеют различную селективность [50].

3.5.6. Колонки с сшитой полимерной фазой

Полистирольные или полисилоксановые неподвижные фазы становятся неэкстрагируемыми после проведения сшивки их молекул. В ГХ на открытых капиллярных колонках используете* такая сшитая неподвижная фаза. Характеристики колонок со сшитой полистирольной и полисилоксановой неподвижными Ф3' зами описаны в работах [51] и [52]. Полисилоксановые кОРис. 3-20. Разделение

многоядерных ароматических углеводородов на открытой капиллярной колонке с

привитой неподвижной фазой в режиме

градиентного элюирования. Колонка 32

мкм (внутр. диам.) х

22 м; привитая неподвижная фаза октален, ил; изменение

состава подвижной

фазы (ацетонитрил/вода) а процессе

разделения показано

на рис.; объемная

скорость 0.52

мкл/мин; температура колонки 36°С; детектор УФ, длина волны 250 нм.

/ - бензол, 2 -нафталин, 3 - бифе-иил, 4 - флуорен, 5 - фенантрен, б -антрацен, 7 - флуорантен, 8 - пирен, 9 - п-терфенил; 10 -хризен, 11 - 9-фени-лантрацен, 12 - пе-рилен, 13 - бенз<а)-пирен, 14 - 1,3,5-трифенилбензол.

лонки в последнее время используются особенно успешно, поскольку они термостойки и не экстрагаруются растворителями.

На рис. 3-23 показано разделение фиатов на колонке со сшитым полисилоксаном SE-54 в режиме градиентного элюирования [52].

3-5.7. Колонки, модифицированные динамическим способом

Пропустив через колонку с силикагелем подвижную фазу, ^держащую катионный или неионогенный детергент, можно модифицировать силикагель этим детергентом in situ и в реУльтате получить гидрофобную неподвижную фазу. Колонки с ^«оксидом кремния, динамически модифицированные ионами

^раалкиламмония с длинными алкильными цепями, работают

72

3. Шкооколоц^.

i Микооколонки

73

Рис. 3-22. Разделение

нуклеозидов на открытых

капиллярных колонках с

привитыми катионообмениыми группами. Колонки: а - 44 мкм (внутр.диам.) х 5,2 м с -C6H4S03H; 6 - 52 мкм (внутр.диам.) х 5,3 м с -C,H4S03H; подвижная фаза - формиат аммония, а - 2' Ю'л моль/п, рН 2,2; 6 -110"* моль/л, рН 3,4. Объемная скорость 1,1 (а) и 1,7 мкл/мин (б); детектор УФ, длина волны 260 нм.

Пики: U - уридин (12 нг); G - гуанозин (12 нг); С - цитидин (13 нг); А - аденозин <11 нг).

нести диоксида кремния, можно использовать в этих целях градиентное элюирование.

На рис. 3-24 приведена хроматограмма многоядерных ароматических углеводородов, полученная при их разделении на колонке с динамически модифицированным силикагелем в режиме градиентного элюирования. В качестве детергента использовался бромид цетилтриметиламмония (цетримид). Характеристики колонок с силикагелем, динамически модифицированных цетримидом, аналогичны характеристикам колонок с химически привитым октадецилсиланом.

аналогично колонкам с химически привитым октадецилсила-ном. Преимущество динамического модифицирования колонок состоит в том, что, меняя модификатор, удается несколько изменять селективность. Этот способ модифицирования открытых капиллярных колонок для ЖХ описан в статье [53].

Капилляры из натриевого стекла обрабатывали 1 н. раствором гидроксида натрия и затем промывали подвижной фазой с гидрофобным пленкообразующим детергентом, например бромидом алкилтриметиламмония, до тех пор, пока врем* удерживания выбранного стандарта не становилось постоянным. Так как адсорбированные детергенты трудно смыть с поверх3.6. НАСАДОЧНЫЕ КАПИЛЛЯРНЫЕ КОЛОНКИ

3.6.1. Введение

Насадочные капиллярные колонки широко применяются в ГХ. Основная их характеристика - отношение диаметра колонки к диаметру частиц насадки. Проницаемость таких колонок выше, чем у плотноупакованных колонок, и ниже, чем у капиллярных.

'* 3. Микооколонкц

Цуда и Новотны [545 первыми применили в ЖХ насадоч- ; ные капиллярные колонки, диаметр которых был меньше: обычного примерно в 10 раз.

Вследствие хорошей проницаемости насадочных капиллярных колонок оии могут быть достаточно длинными, что позволяет достигать большой эффективности разделения. Согласно 1 сообщениям, получить длинные насадочные капиллярные колонки проще, чем плотиоупакованные колонки. Для этого насадку вначале вводят в обычную стеклянную трубку с широким каналом, которую затем вытягивают в капилляр.

1 1— 1 I .

о го to во

Время, мин

Рис. 3-23. Разделение фталатов на открытой капиллярной колонке со стен-камн. покрытыми сшитой неподвижной фазой, в режиме градиентного элюирования. Колонка 38 мм (внутр.диам.) х 5,3 м; неподвижная фаза сшитый силикон SE-54; подвижная фаза ацетонитрил вода (изменение состава фазы в процессе разделения похазано иа рисунке); объемная скорость 0,69 мкл/мин; детектор УФ, длина волны 235 нм.

Пики: / - диметилфталат; 2 - диэтилфталат; 3 - диизопропнлфталат; 4 -ди-к-пропилфталат; 5 - диизобутилфталат; 6 - ди-«-бутилфталат; 7 - дигеп-тилфтала