химический каталог




Введение в микромасштабную высокоэффективную жидкостную хроматографию

Автор M.Гото, К.Джинно, Д.Исии, M.Сайто, M.Сенда и др.

одимость градиентного элюирования при объемных скоростях меньше нескольких десятых микролитра в минуту оказалась неудовлетворительной. Наиболее эффективным в микро-ВЭЖХ оказался метод градиентного элюирования с использованием смесительной камеры малого объема. В этом методе градиентный профиль изменяется экспоненциально во времени (, в зависимости от объемной скорости F и объема смесительной камеры Vm [3] в соответствии с уравнением

х = а — (я — х,,)ехр

tf

Ю

где а - концентрация поступающего раствора; Хп - исходная концентрация раствора в смесительной камере. На рис. 3-2 показана система градиентного элюирования со смесительной камерой. Эта система обеспечивает градиентное элюирование при низких объемных скоростях (менее 10 мкл/мин).

3.3. ПРЕДВАРИТЕЛЬНОЕ КОНЦЕНТРИРОВАНИЕ ПРОБЫ НА ПРЕДКОЛОНКЕ

Повышенная чувствительность к массе обнаруживаемого компонента, связанная с миниатюризацией колонки, создает весьма благоприятные условия для анализа микроколичеств веществ, что очень важно при исследовании проб, представляюЩих особый интерес. Однако, если ввод такой пробы осуществляется краном-дозатором, большая ее часть разрушается, поэтому вводить такого рода пробу, например компоненты плазмы кРови, при помощи крана-дозатора нецелесообразно. Эта проблема удовлетворительно решается с помощью предварительного концентрирования пробы на дополнительной колонке, так называемой предколонке. С этой целью аликвотный объем растра пробы вначале пропускают через микропредколонку. По-"е чего проводят хроматографическое разделение веществ, сконцентрировавшихся в колонке [5]. Интересующие исследо-ателя компоненты можно сконцентрировать на предколонке Ри надлежащем выборе неподвижной фазы и элюента. Кро-того, данный метод позволяет повысить низкую концентрационную чувствительность микро-ВЭЖХ. Если концентрация

SSL

3. Микроколонки

i Микроколонки

51

раствора равна 10"7%, то после пропускания через предварительную колонку 1 мл пробы при хорошем выходе анализу подвергается уже 1 иг вещества.

Хроматографическую систему, в которой предколонка располагается непосредственно перед разделительной, можно собрать, пользуясь краном-переключателем N6W . На рис. 3-3 изображена такая система, состоящая из двух насосов, трех кранов-переключателей, двух предколонок, разделительной колонки и детектора. Если система содержит две предколонки, на одной из них можно осуществлять концентрирование, а на другой - непосредственно разделение. Чтобы уменьшить размывание полосы пробы на участке между предколонкой и разделительной колонками, для присоединения крана-переключателя следует применять трубки с каналом достаточно малого диаметра. Система с раздельным подключением предколонки и разделительной колонок также приемлема для микро-ВЭЖХ, хотя в этом случае процедура усложняется.

Микропредколонка имеет внутренний диаметр 0,2 0,5 мм, длина ее составляет 20 - 30 мм, т. е. она примерно в десять раз меньше разделительной колонки. Заполнять ее следует относительно крупными частицами {15 - 30 мкм), поскольку такая насадка отличается хорошей проницаемостью и позволяет проводить концентрирование при большой скорости потока. Так как система работает при высоком давлении, целесообразно использовать соединительные муфты из нержавеющей стали. Предколонки из ПТФЭ пригодны лишь при давлениях менее 70 бар.

3.4. ХАРАКТЕРИСТИКИ МИКРОКОЛОНОК

Заполнение колонок можно проводить теми же методами,

что и в обычной ВЭЖХ, если только входной фитинг колонки

способен выдержать достаточно высокое давление. Гидрофобные

колонки, например колонки с октадецилсиликагелем (ОДС),

можно заполнять вязкостным методом или суспензионным методом с неионным детергентом. -

3.4.1. Материал колонки

Колонками для микро-ВЭЖХ служат трубки из ПТФЭ, нержавеющей стали, стекла, кварцевого стекла или трубки из нержавеющей стали, покрытые изнутри стеклом. Наибольшую эффективность дают колонки из кварцевого и обычного стекла благодаря гладкости и химической инертности их внутренней поверхности. Трубки из кварцевого стекла достаточно гибки, что упрощает изготовление из них длинных колонок. Для герметизации трубок из кварцевого стекла выпускаются поли-имидные уплотнения, позволяющие работать при высоких давлениях. Если трубка из кварцевого стекла вклеена в трубку из нержавеющей стали, можно использовать фитинги с уплотнениями и соединительными муфтами из нержавеющей стали [6]. Выпускаются также трубки из нержавеющей стали, покрытые изнутри стеклом, внутренние каналы таких трубок могут иметь различные диаметры. Из таких трубок наружным диаметром 1/16 дюйма (1,6 мм) изготавливают колонки, пригодные для соединения со стандартными соединительными муфтами. Это позволяет без труда заполнить колонку и собрать хроматографическую систему, работающую при высоком давлении.

На рис. 3-4 показана хроматограмма, полученная при разделении многоядерных ароматических углеводородов на колонке размером 0,25 мм (внутр. диам.) х 100 мм, заполненной октадецилсиликагелем [7]. Эффективност

страница 14
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58

Скачать книгу "Введение в микромасштабную высокоэффективную жидкостную хроматографию" (2.4Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
цена земли новая рига
производство металлическая мебель
pwz 70-40 w2/4,2
этажерки для дома

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(24.09.2017)