химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

Амос [196] удаляли гидрокортизон из преднизолона, используя способность гидрокортизона к взаимодействию с реактивом Жирара (реактив Т) с образованием водорастворимого производного.

240 Глава 3

Кортикостероиды 241

3.2.7. ВЫСОКОЭФФЕКТИВНАЯ ЖИДКОСТНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ

Среди стероидов первыми методом ВЭЖХ были проанализированы кортикостероиды [140, 269]. С тех пор ВЭЖХ стала одним из наиболее ценных методов разделения и определения кортикостероидов. Обзор литературы по этому вопросу недавно опубликован Фицпатриком [91].

Одной из возможных причин вытеснения газовой хроматографии методом ВЭЖХ в анализе кортикостероидов является, вероятно, чувствительность С-17 боковой цепи к нагреванию (см. предыдущий раздел). Кроме того, метод ВЭЖХ позволяет проводить определение всех кортикостероидов с довольно высокой чувствительностью по интенсивной полосе поглощения в УФ-области спектра (за исключением, конечно, 4,5-насыщенных метаболитов). Высокая чувствительность ВЭЖХ позволяет решать почти все задачи, которые могут

*8

L_J I I I L

0 2 4 6 8 га Время, мин

Рис. 3.5. Разделение методом ВЭЖХ ацетата галопре-дона (2-бром-66,9-дифтор-11В,17,21-триокси-1,4-прегна-диен-3,20-дион-17,21-диацетат) (пик/) и ба-фторэпимера (пик 2) на колонке размером 25 смх4 мм, заполненной лихросорбом SI-100 (5мк),при элюировании 0,22 %-ным метанолом в насыщенном водой дихлорметане со скоростью 4,5 мл/мин и детектированием на УФ-детекторе (254 нм) [294].

встать перед аналитиками в области фармацевтики и биомедицины, поэтому уже в первые несколько лет после введения этого метода был опубликован огромный материал о практическом применении его в обеих областях ([21, 22, 140, 175, 208, 224] и [172, 320] соответственно). В табл. 3.4 и 3.5 приведены сведения о применении ВЭЖХ для решения различных задач фармацевтического и биологического анализа.

Достоинство метода ВЭЖХ состоит в возможности разделения изомеров. Примерами могут служить разделение 68- и 6а-фторэпимеров ацетата галопредона, описанное Тоскано и сотр. [294] (рис. 3.5), и разделение 17- и 21-валератов бетамётазона, проведенное Бургесом [44] (рис. 3.6), с использованием адсорбционной и распределительной (с обращенной фазой) систем соответственно. Особый интерес представляет работа Уикби,

Рота и др. [252а, 312, 313], в которой обсуждаются практические и теоретические аспекты разделения эпимерных циклических ацеталей 16а, 17а-диоксикортикостероидов.

Что касается хроматографических систем для разделения,

то широкое применение нашли как адсорбционные хроматографические системы (в основном силикагелевые носители с малым размером т

5 70

Время, мин

Рис. 3.6. Разделение методом ВЭЖХ 17-валерата бетамётазона (/) и 21-вале-рата бетамётазона (2) на колонке размером 20 смХ Х4,6 мм, заполненной сфе-рисорбом ODS (10 мк), при элюировании 37,5 %-ным раствором этанола в воде при 60 "С со скоростью 2 мл/мин и детектировании на УФ-детекторе (240 нм) [44].

частиц), так и распределительные системы с обращенной фазой [в большинстве случаев силикагель с привитыми молекулами С^ (октадецилсуль-фат)]. Кавина и др. [57] и Тайме [298] опубликовали большое число характеристик удерживания на различных обращенных фазах и в разных адсорбционных системах соответственно. Рассмотрение этих и других литературных данных позволяет сделать вывод о том, что практически все кортикостероиды, присутствующие совместно в биологических объектах или лекарственных препаратах, можно разделить на адсорбционных или распределительных обращенно-фазных системах, если подобрать соответствующие носители и элюенты. Адсорбционная хроматография оказалась более популярной при анализе биологических образцов [304], а в фармацевтическом анализе кортикостероидов чаще используются системы с обращенными фазами.

Для анализа хроматограмм почти исключительно применяются УФ-детекторы. Как видно из табл. 3.4 и 3.5, во всех случаях можно измерять поглощение на спектрофотометрическом УФ-детекторе при 240 нм, но значения оптических плотностей при 240 и 254 нм достаточно близки, чтобы, не жертвуя чувствительностью, использовать детектор, настроенный на определенную длину волны; большинство исследователей пользуются этим приемом. Преимущество обнаружения и количественного определения по одной и той же хромофорной группе состоит в том, что чувствительность для разных кортикостероидов почти одинакова. Интервал определяемых концентраций по градуировочному графику составляет 10—100 нг в пробе, а предел обнаружения — примерно 1 нг.

16 Заказ Jft 182

250 Глава 3

Кортикостероиды 251

На практике в большинстве случаев такая чувствительность достаточно высока, чтобы обойтись без дериватизации.

0,0/ единицы оптической плотности

Стандарт

Проба 2 ,

Недавно Хорикава и сотр. [149] предложили проводить дериватизацию кортикостероидов после выхода с колонки с образованием комплексов алюминия с гидразоном 3-изоникоти-новой кислоты. Кортикостероиды детектируют по флуоресценции этих комплексов, что приводит к повышению изб

страница 88
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
Компания Ренессанс лестницы под ключ - качественно и быстро!
заводись блеать наклейка
спермограмма в москве цены
juytpflth;bdf.obq rkfgfy

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(27.07.2017)