химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

проводить и в видимой области спектра, если проявлять пятна соответствующим опрыскивающим реагентом. Таким реагентом может быть тетразолие-вый синий [134, 183а] или смесь серная кислота—этанол [212]. ? В последнем случае содержание преднизолона в плазме можно определить, нанося экстракт непосредственно на пластинку. Хаф и сотр. [151] разработали метод ТСХ с денситометриче-ским детектированием для определения ацетата гидрокортизона в мазях, используя для опрыскивания л-толуолсульфокис-лоту и сканируя хроматограммы при 404 нм. Функ и сотр. [93а] добились исключительно высоких чувствительности (до 2,5 пг) и селективности при определении гидрокортизона в сыворотке, используя предварительную дериватизацию дансилгид-разином и измеряя флуоресценцию (возбуждение при 365 нм, излучение при 460 нм).

3.1.6. ГАЗОВАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ

Термическая неустойчивость С-17-боковой цепи

Общие вопросы газохроматографического анализа стероидных гормонов обсуждались в разд. 2.2.11 (см. также приведенные в нем ссылки на работы, в которых содержатся важные сведения по применению этого метода для определения кортикостероидов). Однако следует подчеркнуть, что общие положения, обсуждавшиеся в разд. 2.2.11, только частично справедливы для обнаружения кортикостероидов. Причина здесь в том, что если большинство других стероидных гормонов можно хро-матографировать без дериватизации, а целью дериватизации является обычно улучшение селективности, повышение чувствительности и уменьшение потерь, то надежное газохроматогра-фическое определение кортикостероидов возможно только в виде производных. Из-за термической неустойчивости кортикостероидов [обусловленной наличием 17- и(или)21-оксигрупп в 20-кетопрегнановой боковой цепи, в целом устойчивой] дериватизация является главной проблемой газовой хроматографии кортикостероидов.

Основной путь разрушения стероидов с диоксиацетоновой боковой цепью состоит в раскрытии 17—20-связи и образовании 17-кетопроизводных [19, 20, 111], но следует принимать во внимание и другие реакции (например, образование D-гомопроиз-водных [251]).

Несмотря на то что эти проблемы решаются путем дериватизации (описанной в следующем разделе) и для газохроматографического анализа кортикостероидов разработаны довольно надежные методы, многие аналитики все же считают газохро-матографические методы громоздкими и недостаточно точными и отдают предпочтение высокоэффективной жидкостной хроматографии. О существовании такого предпочтения свидетельствуют следующие факты:

1. Газовая хроматография, по-видимому, не нашла применения в анализе лекарственных дозированных форм кортикостероидов, где требования к воспроизводимости и точности выше,

чем в биологическом анализе стероидов *.

2. После введения высокоэффективной жидкостной хромато234 Глава 3

график в анализ стероидов в отличие от ситуации, сложившейся в анализе других групп стероидных гормонов, число статей, посвященных газохроматографическому анализу кортикостероидов, значительно снизилось, в то же время огромное количество статей публикуется по ВЭЖХ в биохимическом анализе кортикостероидов.

Тем не менее газовая хроматография кортикостероидов все еще играет важную роль в анализе биологических объектов при установлении профиля концентрации стероидов (см. разд. 2.2.11) и при определении низких концентраций отдельных кортикостероидов, когда необходима (например, при определении альдостерона) более высокая чувствительность, которую обеспечивает газовая хроматография (особенно с детектором электронного захвата). Другая причина важности газохроматогра-фических исследований кортикостероидов состоит в возможности использования высокоизбирательного и чувствительного метода хромато-масс-спектрометрии.

Методы дериватизации

На схемах (3.7) — (3.12) представлена серия реакций, использованных Мейсоном и Фрезером [195] для дериватизации кортикостероидов плазмы.

Дезоксикортикостерон (ДОК) и кортизон, не содержащие 17-оксигрупп, становятся термически устойчивыми в результате превращения в 21-гептафторбутираты [реакции (3.7) и (3.8)]. В указанных условиях [реакция протекает за 30 мин при 60 °С в смеси гептафтормасляного ангидрида и бензола в соотношении 1 : 1 (по объему)] образуется также гептафтор-бутират енольной формы Д4-3-кетогруппы (см. разд. 2.2.11), что позволяет определять эти производные с высокой чувствительностью при помощи детектора электронного захвата (1,44 пг ДОК и 2,50 пг кортикостерона дают пик высотой 1 см при максимальной чувствительности детектора). 17-Дезоксипроизводные иногда анализируют газохроматографически в форме 21-ацета-тов [82, 267].

CHj -О—C-CjF,

(3.7)

о

CHi-OH

Кортикостероиды 237

использовать ДЭЗ. Окислительное отщепление боковой цепи обычно проводят с помощью висмутата натрия [19, 20, 305].

Как следует из схем (3.11) и (3.12), йодная кислота окисляет 18-оксидезоксикортикостерон и альдостерон до устойчивых лактона и гемикетальлактоиа соответственно *. Эта реакция лежит в основе многочисленных газохроматографических методов [195, 2

страница 86
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
купить деревянную горку для улицы
litined 50-30
штатные магнитолы для audi купить
вента увлажнитель воздуха-климатсервис

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(28.02.2017)