химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

смеси серной кислоты и органических растворителей в различных соотношениях. Связь между структурой и интенсивностью флуоресценции при действии наиболее часто применяемого ре-• агента [смеси серной кислоты и метанола в соотношении 3: 1 (по объему)] изучена Мондером и Кендэллом [209]. Некоторые результаты их исследований приведены в табл. 3.2, из которой следует, что этот реагент полезен при определении гидрокортизона и кортикостерона — двух основных кортикостероидов, содержащихся в плазме и моче. Кроме того, необходимо отметить, что помимо 4-ен-З-кетогруппы в появлении флуоресценции важную роль играет 11-оксигруппа, тогда как 17-оксигруппа таким свойством не обладает, а 21-оксигруппу можно заменить альдегидной или карбоксильной группой без существенного ослабления интенсивности флуоресценции. Наиболее интенсивная

100 37 53 169

0,23 411 10 26 0,21 0 0

11В,17а,21-Триокси-4-прегнен-3,20-дион (гидрокортизон)

11а,17а,21-Триокси-4-прегнен-3,20-дион

11 В, 17а,20а,21 -Тетраокси-4-прегнен-З-он

11 р,21 -Диокси-4-прегнен-3,20-дион (кортикостерон)

17а,21-Диокси-4-прегнен-3,20-дион (вещество S Рейхштейна)

П(5,17а-Диокси-3-кето-4-андростен-17-карбоновая кислота

Гидрат 11р\17а-диокси-3,20-дикето-4-прегнен-21-аля

11р\17а-Диокси-3,20-дикето-4-прегнен-21-карбоновая кислота

Пр\17а-Диокси-3,20-дикето-4-прегнен-18-аль (альдостерон)

11р\17я,21-Триокси-1,4-прегнадиен-3,20-дион (преднизолон)

17а,21-Диокси-5а-прегнан-3,11,20-трион

УЕЛОВАЯ: 1 мкг кортикостероида реагирует с 2 мл смеси серной кислоты и этанола в соотношении 3:1 (по объему) при комнатной температуре в течение 10 мин. Возбуждение при 470 нм, испускание при 520—530 нм [2091.

222 Глава 3

Кортикостероиды 223

гие (в основном хроматографические [146]) стадии очистки чаще всего исключены, но последние исследования (например, Бутте и сотр. [48, 49]) показали, что ускоренные методики дают существенно завышенные результаты. Особого внимания заслуживают систематические исследования Радо и сотрудников, показавших, что некоторые синтетические лекарственные препараты, например карбамазепин [235], бенциклан * [236], имипрамин * и тримипрамин [237], окспренолол и пропрано-лол * [238], интенсивно флуоресцируют и, следовательно, мешают флуориметрическому определению кортикостероидов в плазме и моче по широко известной методике Мэттиньи [199]. Аналогичное действие оказывают спиронолактоны и их метаболиты [204].

Если целью анализа является не только определение общего содержания кортикостероидов, но также индивидуальных концентраций гидрокортизона и кортикостерона, часто применяют экстракцию смесью воды и тетрахлорида углерода. Например, по последнему варианту этого метода, предложенному Пейнтером и др. [227], остаток после выпаривания дихлормета-нового экстракта растворяют в водном этаноле, промывают гексаном и экстрагируют тетрахлоридом углерода. Кортикосте-рон можно определить непосредственно в органической фазе, а гидрокортизон нужно сначала экстрагировать из водной фазы дихлорметаном. Путем добавления к пробе меченного тритием кортикостерона и меченного 14С гидрокортизона с последующим измерением на сцинтилляционном счетчике были внесены поправки на взаимное загрязнение экстрактов из-за неполной экстракции. В этом методе неспецифическая флуоресценция была учтена путем использования в качестве холостого раствора аликвотной части дихлорметанового экстракта, проведенного через все стадии определения, после гашения флуоресценции кортикостероидов путем превращения их в 3-оксимы.

Как видно из табл. 3.2, альдостерон при действии реагента серная кислота—этанол флуоресцирует очень слабо. Чтобы сделать возможным определение этого кортикостероида, Вигхэм-[311] окислил его 19-альдегидную группу в карбоксильную реагентом Бенедикта [сульфат меди (II)—цитрат натрия—карбонат натрия]. В этой форме альдостерон проявляет флуоресценцию, позволяющую проводить его определение в моче. Флуоресцентную реакцию проводят в две стадии; желтый продукт, полученный при нагревании пробы с 85?/о-ной (по объему) серной кислотой, переводят в красный продукт (возбуждение при 586 нм, излучение при 610 нм) путем добавления метанольного раствора хлорида железа (III), что значительно улучшает избирательность метода.

Из флуориметрических методов, не связанных с вызываемой кислотами флуоресценцией, привлекает внимание методика Токунаги и сотр. [2926]. По этой методике 20-кето-21-альдегидная группа, полученная окислением а-кетольной боковой цепи ацетатом меди (II), конденсируется с пирролом с образованием сильного флуорофора (возбуждение при 594 нм, испускание при 617 нм; линейная зависимость от концентрации наблюдается в области нанограммовых концентраций).

3.2.3. ПОЛЯРОГРАФИЯ

Проблемы и возможности полярографического анализа как природных и синтетических кортикостероидов, так и андрогенов и гестогенов очень схожи, поскольку все они содержат одни и те же полярографически активные центры, а именно 4-ен-З-ке-то- или 1,4-диен-З-кетогруппы. Поэтому общие положения, изложенные

страница 82
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
ландшафный дизайн - курсы
купить антистресс
курсы бухгалтерского учета в москве с трудоустройством
детский аттракцион автомат качалка дешево

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(08.12.2016)