химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

ом Циммермана, см. разд. 2.2.2), используется в качестве стандартного метода оценки содержания метаболитов кортикостероидов (формаль-дегидогенных или 17-кетогенных стероидов) в моче. Для ознакомления с этим вопросом можно обратиться к монографии Джейла [156].

В качестве окислителя чаще всего применяют висмутат натрия [220]. Для устранения мешающего влияния других кетогрупп их (а также 20-кетогруппы) можно восстановить борогидридом натрия с последующим окислением образовавшихся вицинальных диолов висмутатом натрия [10] или йодной кислотой [90] до 17-кетонов. В настоящее время публикации по этому вопросу появляются редко. Однако заслуживающим внимания исключением является недавно вышедшая статья Сен-сиола и сотр. [265]. Авторы сообщают об определении метаболитов кислотного характера в моче человека (20-кето-21-карбо-новые кислоты). Эти метаболиты разделяют на смоле XAD-2 и жидкостной экстракцией, восстанавливают (20-кетогруппы) борогидридом натрия, а затем окисляют йодной кислотой. Как показано на схеме (3.5), 17-кетогруппа (которую можно определить методом Циммермана) селективно образуется из 17-ок-сипроизводных.

Кортикостероиды 219

кислота и различные реагенты на ее основе, описанные в разд. 2.2.2 в основном как реагенты для определения эстрогенов (серная кислота, разбавленная различными растворителями, реагенты типа реагента Кобера), успешно используются также и в анализе кортикостероидов. В качестве исчерпывающего литературного источника по этому вопросу рекомендуем

Л., нм

Рис. 3.1. Спектры поглощения кортикостероидов в концентрированной соляной кислоте после нагревания при 80 °С в течение 30 мин [283].

1— 17,21-диокси-4-прегнен-3,20-дион; 2 — 11а,17,21-триокси-4-прегнен-3,20-дион; 3 — 11В,17,21-триокси-4-прегнен-3,20-дион (гидрокортизон); 4 — 17,21-ди-окси-4-прегнен-3,11,20-трион (кортизон).

монографию Какача и Вейделека [163]. Здесь же упомянем лишь редко используемый хромогенный реагент — соляную кислоту. Рис. 3.1, взятый из статей Шабо и Мицеи [283], иллюстрирует удивительную специфичность этого реагента. Из четырех стероидов, отличающихся только заместителями при С-11, 118-оксипроизводное (гидрокортизон) обладает специфической полосой поглощения при 465 нм (еда 10000); производные, не имеющие 11-заместителя или содержащие lla-окси- или 11-кетогруппу, не поглощают свет при этой длине волны. В спектрах 17-дезоксипроизводных характерная полоса 116-оксигруппы смещена к 365 нм, а у Д'-производных (например, у преднизолона) она появляется при 540 нм.

Риу-Лакоста и Виль [244], нагревая кортикостероиды с реагентом, содержащим уксусную кислоту, серную кислоту и дифениламин (или N-метилдифениламин), получили продукты, спектры которых отличаются необычно длинноволновым максимумом. Положение полосы поглощения (600—650 нм) и скорость реакции зависят от характера заместителя, особенно при С-11.

Для анализа кортикостероидов также применяется 2,4-ди-нитрофенилгидразин с последующей обработкой полученных

220 Глава 3

Кортикостероиды 221

производных гидроксидом натрия. Эта реакция характеризуется чрезвычайно высокой чувствительностью, (молярный коэффициент поглощения при определении преднизона равен 51600 при 480 нм[318]).

Наконец, следует упомянуть о необычайно избирательном методе Гёрёга и Туба [120], предназначенном для определения 21-хлор- или 21-бром- и активных 21-сульфонилоксикортикосте-роидов. Если эти стероиды нагреть с пиридином, а получившееся производное 21-пиридиния перевести в щелочной среде в желтый енолят [см. реакцию (3.6)], то молярный коэффициент поглощения при 415 нм достигает 21 000.

флуоресценция наблюдается у 17В-карбоксипроизводного. Заслуживает внимания и тот факт, что введение альдегидной группы в^ положение 18 почти полностью гасит флуоресценцию, а Д'-двойная связь полностью подавляет ее. Чувствительность этих методов определения гидрокортизона и кортикостерона составляет порядка 10—100 нг/мл реагента. Флуоресценция развивается полностью за 5—10 мин, и ее интенсивность обычно не меняется по крайней мере в течение 1 ч. Поскольку в литературе имеются сообщения об изменении интенсивности неспецифической флуоресценции во времени, было предпринято несколько попыток улучшить селективность метода выбором соответствующего инкубационного периода [270], но ни одна из них, по-видимому, не привела к решению проблемы, вследствие чего приходится прибегать к жидкостной экстракции или хроматографической очистке.

Таблица 3.2. Интенсивность флуоресценции кортикостероидов относительно гидрокортизона *

Стероид

Интенсивность флуоресценции

ГЛЛ. флуориметрия

Интенсивность флуоресценции, вызываемой кислотами, у кортикостероидов обычно меньше, чем у эстрогенов, тем не менее этот метод повсеместно используется для их определения в биологических образцах (но не в фармацевтическом анализе). Обзоры литературных данных, полученных в этой области за ранние годы, сделаны Голдцихером [107], Джейлом [156а] и Зильбером [270].

Обычно в качестве флуорогенных реагентов используют

страница 81
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
Dakon Daline PTE 30
сниму небольшой сервис в сао
часы cover co61.02
как называется реклама товара своей сети

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(08.12.2016)