химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

кция и очень часто разделение на колонке или в тонком слое. Эти стадии и стадию дериватизации, которую приходится проводить в большинстве случаев (часто при этом требуются такие стадии, как выпаривание досуха), очень трудно автоматизировать, поэтому автоматизация сложных газохроматографических методов обычно ограничивается лишь

174 Глава 2

Половые гормоны и родственные соединения 175

заключительной стадией газохроматографического определения при помощи различных автоанализаторов. Даже в этих случаях скорость анализа не превышает 1—3 проб в 1 ч из-за довольно большой длительности анализа, которая колеблется от 20 до 60 мин в зависимости от количества определяемых компонентов.

Большое преимущество газовой хроматографии перед любым другим методом состоит в том, что ее легко комбинировать с масс-спектрометрией. Это важно не только с точки зрения возможности непосредственной идентификации пиков на хрома-тограммах сложных биологических смесей, но также и с точки зрения требований количественного анализа, поскольку масс-фрагментографию можно считать наиболее чувствительным и селективным методом анализа стероидов.

Достоинства и недостатки высокоэффективной жидкостной хроматографии в сравнении с газовой хроматографией обсуждаются в разд. 2.2.12. Можно утверждать, что в области анализа половых гормонов ВЭЖХ несомненно предпочтительнее только для тех конъюгатов, которые трудно анализировать га-зохроматографически (см. табл. 2.16). В ряде других областей, где чувствительность не столь важна (анализ стероидов в моче), преимущества и недостатки газовой хроматографии и высокоэффективной жидкостной хроматографии компенсируются, и в ближайшем будущем можно ожидать возрастания роли ВЭЖХ в этих областях.

Следует также ожидать расширения применения тонкослойной денситометрии; сейчас ее использование в анализе половых гормонов в биологических объектах, похоже, ограничивается лишь несколькими примерами [24, 212, 390, 827, 828, 830, 840, 853 (а—в)].

Радиоаналитические количественные методы

Если спектроскопические методы определения стероидных гормонов в биологических объектах не обладают высокими избирательностью и чувствительностью, но позволяют выполнять анализ сотен образцов в день, то газовая хроматография, являясь высокоизбирательным и чувствительным методом (особенно в сочетании с масс-спектрометрией), дает по крайней мере на порядок меньше анализов в день. Образовавшаяся брешь заполнена современными радиоаналитическими методами, в основном радиоиммунными, поскольку чувствительность их достаточно высока, чтобы решать сложные задачи; селективность же метода РИА также высока, если использовать достаточно специфическою антисыворотку. В то же время по числу анализируемых проб в день радиоаналитические методы сравнимы со спектроскопическими. С этой точки зрения несомненно перспективны нехроматографические поддающиеся автоматизации твердофазные методы.

Поскольку единственной областью применения РИА стероидных гормонов является определение их в биоклинических объектах, все, сказанное в разд. 2.2.13 о практическом использовании метода, и примеры, приведенные в табл. 2.17, относятся также к предмету этого раздела.

Некоторые схемы сложных аналитических методик

Как уже неоднократно отмечалось в этой главе, способ подготовки пробы для определения стероидных гормонов в биологических объектах существенно зависит от поставленной задачи. Начав со случаев, когда пробу мочи или плазмы можно анализировать без какой-либо предварительной обработки (в основном методами РИА), и продолжив рассмотрение некоторых методов газовой хроматографии, высокоэффективной жидкостной хроматографии и других методов, в которых подготовка пробы ограничивается одной стадией экстракции, можно перейти к обсуждению сложных подготовительных операций, включающих стадии экстракции в сочетании с хроматографическими стадиями, которые могут занять несколько дней.

Теперь приведем схемы четырех сложных методик с колориметрическим, флуориметрическим, газохроматографическим и масс-фрагментографическим окончаниями.

Первым опишем полуавтоматический колориметрический метод Рейдмакера и сотр. [650] для определения суммарного содержания в моче 11-дезокси-17-кетостероидов (дегидроэпиандростерона, андростерона, этиохоланолона) с использованием реакции Циммермана (см. 35—37) на стадии количественного определения (рис. 2.26).

В качестве второго примера приведем метод флуориметри-ческого определения общего содержания эстриола в плазме беременных (10—25 мкг/100 мл), описанный Миклоши и сотр. [554] (рис. 2.27). В этом случае для количественной оценки использован флуориметрический вариант метода Кобера—Итт-риха (см. с. 49).

Следующий пример (Тикканен и Адлеркройц [770]) также относится к определению эстриола, на этот раз в моче беременных, но целью анализа является определение содержания каждого из четырех основных конъюгатов. На заключительной стадии проводится газохроматографическое измерение всех конъюгатов в виде производных эстриола, метилированных п

страница 59
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
световое оборудование в аренду
Компания Ренессанс: лестницы для бассейна из нержавейки - надежно и доступно!
стул посетителей kf 1 купить
кладовки для хранения

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(09.12.2016)