химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

]. В этом растворителе, являющемся хорошим экстрагентом для сульфатов стероидов, последние подвергаются сольволитическому разложению (при 45°С в течение'15 ч [650]), ускоряемому при введении в раствор следовых количеств минеральных кислот. Например, в методе радиоиммунного определения дегидроэпиандростерона и прегне-нолона, предложенном Асо и сотр. [43], разбавленную плазму, из которой предварительно удалены свободные стероиды экстракцией эфиром, смешивают с насыщенным раствором хлорида натрия и дважды экстрагируют этилацетатом порциями по

172 Глава 2

Половые гормоны и родственные соединения 173

6 мл. При добавлении к экстракту 1 капли концентрированной соляной кислоты сольволиз при комнатной температуре проходит за 1 ч.

Сочетание ферментативных и сольволитических методов разложения с хроматографическими разделениями позволяет решать сложные задачи. В качестве примера приведем метод газохроматографического определения Кюльпмана и Бройера [488], которые предварительно разделяли нейтральные стероиды, содержащиеся в моче, в виде глюкуронидов и сульфатов на колонке, заполненной амберлитом XAD-2, а затем первые подвергали ферментативному гидролизу (при помощи глю-куронидазы), а вторые разлагали сольволитически в этилацетате.

Спектроскопические методы количественного анализа

В анализе биологических объектов методы, основанные на поглощении в УФ- и ИК-областях, а также на флуоресценции, не играют заметной роли. До сих пор находят применение колориметрия и флуориметрия (хотя их значение существенно уменьшилось в связи с возрастанием роли хроматографических и радиоаналитических методов), так как эти методы не требуют дорогого оборудования, могут быть использованы даже в плохо оснащенных лабораториях и из всех инструментальных методов их легче всего автоматизировать. Поэтому большинство методов колориметрического и флуориметрического определения стероидных гормонов в биологических объектах (главным образом в моче), о которых сообщалось в печати, являются автоматическими или по крайней мере полуавтоматическими. В последних вручную проводятся операции ферментативного, гидролитического или сольволитического расщепления и экстракция.

В основном эти методы используются в двух областях — для определения 17-кетостероидов и эстрогенов в моче.

Для колориметрического определения 17-кетостероидов в моче применяются водные [214, 240—242, 481, 823] и неводные [214, 565, 566, 650, 861] варианты метода Циммермана с использованием 1,3-динитробензола.

Общее содержание эстрогенов и эстриола обычно определяют колориметрически или даже чаще флуориметрически методом Кобера или Иттриха—Кобера в различных вариантах. В ряде методик конъюгаты эстрогенов предварительно гидро-лизугот (обычно гидролиз катализируется кислотами), ново многих случаях сразу действуют сильнокислотными реагентами, как, например, в методике полуавтоматического флуориметрического определения общего содержания эстрогенов в моче беременных, предложенной Фраем и сотр. [267]. Авторы подобрали оптимальный состав реагента (см. разд. 2.2.2) таким образом, чтобы максимальная флуоресценция приходилась на эстриол- 16а-глюкуронид, являющийся основным эстрогенным компонентом мочи беременных. При полной автоматизации методики можно проанализировать от 20 [336] до 30 [267] проб в 1 ч.

При сочетании колориметрических или флуориметрических измерений с ферментативными реакциями чувствительность и избирательность этих методов определения половых гормонов в биологических объектах повышаются (см. табл. 2.18).

Хроматографические методы количественного анализа

Из всех хроматографических методов анализа стероидных гормонов в биологических объектах наиболее широко несомненно используется газовая хроматография, и ее значение не уменьшилось при введении высокоэффективной жидкостной хроматографии. Это находит отражение в большом числе недавно опубликованных статей (см. с. 106—107).

Основное преимущество газохроматографических методов по сравнению со спектроскопическими состоит в более высокой чувствительности. Так, например, при помощи детектора электронного захвата можно определять пикограммовые количества стероидов не только в моче, но и в сыворотке. Другим важным преимуществом этих методов является возможность определения не только отдельных стероидов или суммарного содержания группы стероидов, но также одновременного определения родственных стероидов и (особенно с использованием капиллярных колонок) установления профиля концентраций стероидов в разных биологических объектах (см. табл. 2.10).

Поэтому газовая хроматография в настоящее время является незаменимым средством при биохимических исследованиях стероидов и в серийных клинических анализах. Следует, однако, заметить, что, несмотря на большую разрешающую способность газохроматографических колонок, в целом газохрома-тографическому анализу биологических образцов предшествует по меньшей мере столь же длительная подготовительная работа, как и в спектроскопических методах, т. е. расщепление конъюгатов, экстра

страница 58
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
склеродермия новые очаги
http://dveripandora.ru/catalog/mezhkomnatnye-dveri/color_dub-belosnezhnyy/
концерт людовико эйнауди в москве
оборудование для кинотеатра 3d

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(22.06.2017)