химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

спектры бис(триалкилсилиловых) эфиров 5в-прегнан-3а,20а-диола [649].

154 Глава 2

Увеличение летучести имеет огромное значение и в рассматриваемом методе. Вспомним, например, что в персилилирован-ной форме можно исследовать такие полярные производные, как глюкурониды эстрадиола [743] и тестостерона [420] (последние распадаются на фрагменты путем химической ионизации при действии паров пиридина). Заслуживает внимания новая точка зрения, согласно которой получение производных с большой молекулярной массой невыгодно, особенно если используется масс-спектрометр с узким интервалом масс. Производные, дающие богатые линиями спектры, используются для установления структуры исходных стероидов, но для целей количественного анализа более пригодны производные, дающие молекулярные ионы с высокой интенсивностью сигнала, или близкие к ним фрагменты, как это будет показано ниже. Например, как уже упоминалось (на с. 100), если одну из метальных групп в триметилсилилированных производных заменить грег-бутильной или изопропильной группой, фрагментация проходит гораздо менее интенсивно и получаются богатые линиями ионы (М-трег-Ви)+ или (М-изо-Рг) + [86, 247а, 272а, 449, 564а, 635, 635а, 648, 649, 706]. Это иллюстрируется рис. 2.22, взятым из статьи Куильяма и Вестмора [649]. Следует заметить, что многообещающие свойства этих новых производных еще не нашли применения в количественном анализе: в примерах из табл. 2.9 силилирование проведено при помощи триметилси-лильной группы.

Специальные проблемы дериватизации стероидов для ХМС рассмотрены в обзоре Брукса и др. [102а].

Масс-фрагментография [10а, 16а]

Масс-спектрометрия может быть использована непосредственно для количественного анализа. Снедден и Паркер [740] описали определение эстрона, эстрадиола, эстриола и прогестерона в тканях яичников человека путем введения высушенных тканей непосредственно в масс-спектрометр и измерения пиков их молекулярных ионов при разрешении 10000. Градуировоч-ный график (нижняя граница 1 нг) можно построить, вводя пробы плазмы мужчины с известным содержанием перечисленных выше женских гормонов.

Однако в большинстве случаев количественное масс-спектро-метрическое определение стероидных гормонов в биологических объектах проводят методом масс-фрагментографии (табл. 2.19).

Биологические объекты в этом специальном варианте метода ХМС обрабатываются так же, как и в других количественных методах (проводят стадии гидролиза, экстракции и хромато-графической очистки). Перед введением полученного раствора

Половые гормоны и родственные соединения 155

в газовый хроматограф стероиды обычно дериватизируют. Для анализа используют не газовую хроматограмму (общий ионный ток), а характерный и достаточно интенсивный пик иона в масс-спектре анализируемого производного. Обычно это пик молекулярного иона. Если анализ газовой хроматограммы основан на этом единственном ионе, то в качестве внутреннего стандарта для количественного определения можно использовать только соединения с таким же отношением т/е. Ими могут быть эпи-меры [537, 556] или другие изомеры [181] определяемых соединений при условии, что они хорошо разделяются на газохрома-тографической колонке.

При использовании приборов с многоканальным ионным детектором (МИД), позволяющим одновременно регистрировать по крайней мере два пика, открываются гораздо более широкие возможности для выбора внутренних стандартов. Это обычно дейтерированные (иногда третированные*) или 14С-производ-ные определяемых стероидов, так что отношение т/е для них на 2—8 единиц больше, чем у природных стероидов. В этом случае хроматографические пики определяемых стероидов и меченных изотопом внутренних стандартов разделяются плохо или не разделяются совсем, но избирательность здесь обеспечивается благодаря раздельной регистрации пиков. Иллюстрацией этому служит рис. 2.23, на котором приведены спектры гептафторбутирильного производного прогестерона, [4-14С]-проге-стерона и очищенного экстракта сыворотки с добавленным внутренним стандартом, полученные Бъёркемом и сотр. [82] при помощи МИД.

Концентрацию прогестерона в пробе рассчитывают по отношению высот пиков на развертке при т/е, равном 510 и 512, при помощи стандартной кривой. На рис. 2.24, заимствованном из той же статьи, можно видеть стандартную кривую. Небольшой фон на кривой / вызван вкладом меченого прогестерона при регистрации спектра при т/е = 510, а отклонение от линейности объясняется вкладом немеченого прогестерона в спектр, записанный при т/е = 512. Кривая 2 представляет собой скорректированный градуировочный график.

Введение метки "С и гептафторбутирилирование (в случае кортикостероидов образование МО-ТМС-производных) было также использовано Сикманом [721] в масс-фрагментографиче-ском анализе различных стероидных гормонов.

Избирательность методов с МИД можно повысить, используя в качестве внутреннего стандарта изотоп (Бъёркем вводил [4-14С]-прогестерон, содержащий 5% немеченого прогестерона),

Производное

Неподвижная фаза для ГЖХ

ТМС QF-1, S

страница 51
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
гидроскутер смарт супер биг
Магазин KNS цифровые решения предлагает смартфон в кредит онлайн купить - мы дорожим каждым клиентом!
http://www.prokatmedia.ru/sound.html
дешевые бутсы в москве

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(28.06.2017)