химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

378]

Танемори и др. 1977

[759]

Шелдон и Коп- 1977

пенгер [712]

Паркер и др. [612] 1977

Пу и др. [647] 1978

Иттрих [403а] 1978

Джавад и др. 1979

[416]

Тресгер и Тамм 1979

[707]

Нумазава и др. 1979

[599а]

Намбара и др. 1980

[581в] 1981

Канлуан и др.

[440а]

Стероид

Прогестерон

Андрост-5-ен-ЗВ,

17р-диол

5а-Андростан-ЗВ, 178-диол

20р-Оксипрегн-4-ен-3-он

Тестостерон

Андрост-4-ен-3,17-дион Конъюгаты тестостерона и дигидротестостерона Эстрадиол, тестостерон, прогестерон

Эстриол

Глюкуронид тестостерона

Эстриол-16- и 17-глюку ронид

Сульфат эстрона ЛЕВО-норгестрел

ДДУ—декстран, нанесенный на древесный уголь.

144 Глава 2

Помимо хроматографических разделений, проводимых в некоторых случаях для улучшения избирательности метода, с той же целью иногда проводят химические реакции. Например, Хэмпл и сотр. [337, 338] определяли анаболические стероиды в плазме или моче, обрабатывая экстракт смесью уксусного ангидрида с пиридином для переведения тестостерона и дигид-ротестостерона в 17-ацетильные производные, что исключает их перекрестное взаимодействие с используемой антисывороткой. Чаще конъюгаты переводят в исходные стероиды до РИА. Поскольку для прямого определения глюкуронидов [452, 495, 844] существуют достаточно специфичные антисыворотки, вырабатываемые в организме иммунизированных животных против комплекса конъюгат—белок, то сульфаты обычно анализируют так же, как свободные стероиды, после их сольволиза [43, 151, 548, 647, 713]. Если пробу проэкстрагировать до и после реакции, то свободный и конъюгированный стероиды можно определить одновременно. Если для определения глюкуронида нет специфической антисыворотки, то можно применить описанный выше принцип (ферментативный анализ с использованием глюкуронидазы), как это, например, было сделано Деном и сотр. [182] при радиоиммунном определении свободного и связанного эстетрола в плазме или Карлстромом и сотр. [130] при определении общего содержания эстрона в сыворотке крови человека. Стоит упомянуть, что различная растворимость свободных стероидов и их сульфатов, а также способность последних к сольволизу используются для последующего разделения нейтральной фракции путем обработки ее смесью хлорсульфо-новой кислоты с пиридином; образующиеся сульфаты отделяются от оксистероидов [483].

Чувствительность РИА стероидов зависит от многих факторов (сродства антитела к определяемому стероиду, неспецифического связывания, создающего фон, температуры инкубационного периода, природы и специфичности радиоактивной метки). Рассмотрение теоретических аспектов этих проблем вышло бы далеко за рамки настоящей книги. Что касается практического аспекта, то можно утверждать, что в большинстве достаточно хороших аналитических методов для определения требуется лишь несколько десятых миллилитра пробы или даже меньше. Открываемый минимум при таком объеме составляет от 1 до 50 пг, а градуировочный график обычно линеен в области 10—1000 пг.

Воспроизводимость радиоиммунных методов обычно удовлетворяет требованиям серийного клинического анализа: относительное стандартное отклонение составляет от 5 до 15 %. Что касается правильности, то во многих цитируемых здесь статьях сообщается о хорошем совпадении результатов РИА и других

Половые гормоны и родственные соединения 145

методов (главным образом методов конкурирующего связывания белка, двойного изотопного разбавления, флуориметрии и газовой хроматографии). Эти вопросы подробно разбираются Холлом [334] и Чеканом [142].

При публикации современных методик стало общепринятым приводить результаты обработки данных с помощью вычислительной техники. Автоматизация всей методики, включающей длительный инкубационный период и центрифугирование, не простая задача, чем объясняется очень ограниченное число сведений, имеющихся в литературе по этому вопросу. Хэммонд, Вико и др. [335, 812] приспособили клинический автоматический анализатор системы «Олли 3000» для автоматизации операции добавления антисыворотки, индикатора и древесного угля, обработанного декстраном, после инкубационного периода и для отбора соответствующей аликвотной части из надосадочной жидкости для измерения радиоактивности. Система позволяет подготовить для измерения 96 проб за 3 ч.

2.2.14. ФЕРМЕНТАТИВНЫЕ МЕТОДЫ

Ферментативные реакции широко используются в анализе половых гормонов. Значительная часть сложных аналитических методов определения их в биологических объектах включает по крайней мере одну стадию с участием ферментов—ферментативный гидролиз конъюгатов под действием полученных из сока улитки Helix pomatia или чистых р-глюкуронидазы и арил-сульфатазы. Более подробно эти вопросы обсуждаются в разд. 2.3.3. Помимо этих общеупотребительных реакций, цель которых подготовить пробу для определения свободных стероидов, известно большое число методов, в которых в результате ферментативной реакции получаются хромофоры или флу-орофоры, служащие для конечного аналитического измерения.

Колориметрические

и флуориме

страница 47
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
компьютернве курсы для пенсионероа юзао
1с курсы в кунцево
Установка замков-блокираторов капота Construct
рамка для двойного номера на авто

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(09.12.2016)