химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

рованная растворителем; 2 — стеклянная посуда, силилированная паровой фазой; 3 — несилилированная посуда.

ванием, а в надосадочной жидкости, содержащей связанный с антителом стероид, можно измерить радиоактивность на жидкостном сцинтилляционном счетчике, если меткой служил тритий, и на счетчике гамма-излучения, если в качестве радиоактивного индикатора был использован стероид, меченный 1251. Обычно отношение декстрана к древесному углю составляет 1: 10. Происхождение древесного угля не имеет значения (было испытано 8 разных сортов [363]). Если покрытый декстраном древесный уголь достаточно быстро смешать с раствором при низкой температуре, то ни один из этих факторов существенно не повлияет на равновесие между стероидом, связанным с антителом, и свободным- стероидом.

Следует заметить, что иногда для связывания свободного стероида применяются другие адсорбенты, например амберлит или флорисил при определении тестостерона в сыворотке [832] н древесный уголь, покрытый флорисилом, при определении эстрадиола, прогестерона и тестостерона в плазме [403].

140 Глава 2

Для разделения свободного и связанного стероидов разработаны и другие методы; некоторые из них иногда используются и сейчас, но ни один из этих методов не может сравниться с методом, основанным на применении древесного угля, покрытого декстраном.

Другой принцип положен в основу метода, в котором белки, в том числе связанные со стероидом, осаждаются неорганическими солями. В этом случае в надосадочной жидкости, в которой измеряется радиоактивность, содержатся свободные стероиды. Например, Меткалф [548] определял сульфат дегидро-эпиандростерона после гидролиза, экстракции выделившегося дегидроэпиандростерона хлороформом и выпаривания растворителя, стандартным методом РИА, используя имеющуюся в продаже антисыворотку и дегидроэпиандростерон, меченый тритием. Белок осаждается при добавлении сульфата аммония, а в надосадочной жидкости измеряют свободный стероид сцин-тилляционным методом. При определении тестостерона в плазме [38] и прогестерона [690] для осаждения комплекса стероид—антитело успешно применяли полиэтиленгликоль.

Для осаждения комплекса стероид—антитело есть и другой прием — метод двойных антител. Например, при определении тестостерона и 5а-дигидротестостерона использовали кроличьи антитела. Эти антитела (содержащие связанную с ними фракцию стероидов) осаждали вторым антителом, выделенным из организма коз, иммунизированных глобулином кроликов [507].

Особого внимания заслуживают твердофазные методы РИА, поскольку роль их в ближайшем будущем, вероятно, возрастет. В этих методах антитело связывают полимерами или даже стенками пробирки, используемой в анализе, и в надосадочной жидкости можно сразу измерять радиоактивность. В качестве примера можно упомянуть метод Лейтинена и Адлеркройца [495], предложенный для определения эстриол-16а-глюкуро-нида в моче и плазме беременных. В этом методе антисыворотку получали из организма овец, иммунизируя их комплексом эстриол-16а-глюкуронид—тироглобулин (полученным ко-валентным связыванием карбоксильной группы глюкуроновой кислоты с тироглобулином). Соответствующая фракция полученной таким способом антисыворотки была иммобилизована на CNBr-активированной сефарозе. Образовавшуюся суспензию выдерживали до установления равновесия с пробами разбавленной мочи или плазмы, содержащими тритированный стероид, и после центрифугирования в надосадочной жидкости измеряли активность несвязанной фракции.

В табл. 2.17 приведены некоторые практические примеры применения метода РИА для определения половых гормонов в жидкостях организма.

Метод разделения связанной и несвязанной фракций ДДУ ДДУ

Метод двойных антител

Сульфат аммония

ДДУ ДДУ ДДУ ДДУ ДДУ

ДДУ

ДДУ

ДДУ

ДДУ

ДДУ

ДДУ

Сульфат аммония Сульфат аммония

Метка 2. Я ST Х ХХХХХ ХХХХХХГХ

»р| га м « и «о » » « w « « " » « еч »

Хроматография Целит

Фильтровальная бумага

ТСХ

Объект Сыворотка Моча Сыворотка Моча

Сыворотка

Моча

Плазма

Плазма

Плазма

Моча

Сыворотка Моча

Плазма |

Периферийная

кровь

Кровь

Моча

Моча

Стероид Эстрадиол, тестостерон,

прогестерон

Прегнандиол

Прогестерон

Прегнандиол

Энантат норэтистерона ! Глюкурониды эстрогена 2-Оксиэстрон Тестостерон Тестостерон

2-Оксиэстрон и т. п.

Ацетат медроксипроге-стерона

Анаболические стероиды

Норэтистерон

Тестостерон

17-Оксипрогестерон

Эстриол

16а-Оксипрегненолон

Год 0) O) O) О O>0)0)0)0 0)0(7)0)00)0)09

Автор Хэммонд и др. [335]

Иошизава и др. [858]

Скотт и др. [704]

Манита и КамбеСаксена и др. [689] Райт и др. [844] Болл и др. [57] Рао и др. [655] Коркер и Девид-сон [167] Чаторадж и др. П51]

Шриманкер и др. [716]

Хэмпл и др. [337, 338]

Бедолла-Товар и ДР. [67]

Тан и др. [769]

Панг и др. [610]

Коллнер и Лантто [4391

Шибусава и др. [713]

Автор Год

Матьё и др. [528] 1977

Пирк [638] 1977

Хопкинсон и др. 1977

[

страница 46
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
сайдинг дёшево купить
подарки купить
курсы маникюра индевидуальная занятие цена
курсы кадрового делопроизводства ювао

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(04.12.2016)