химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

изации или проявления. Как было показано Ярком и сотр. [415] и Уортманом и сотр. [841], оптимальная концентрация даже сравнительно слабо поглощающих

УФ-излучение эстрогенов составляет около 100 нг при измерении при 280 нм;

г) возможность использования спектров отражения пятен

[24, 742а]. Это ставит тонкослойную спектроденситометрию

в один ряд с газовой хроматографией (с пламенно-ионизационным детектированием) и высокоэффективной жидкостной

хроматографией. Большим достоинством этого метода является

высокая скорость сканирования, вследствие чего на одном денситометре можно успеть количественно оценить хроматограммы, получаемые одновременно несколькими сотрудниками.

Благодаря перечисленным выше достоинствам денситометрия хроматограмм все шире применяется в анализе стероидов,

80 Глава 2

Половые гормоны и родственные соединения 81

главным образом в фармацевтике, и до некоторой степени в биологии. В будущем можно ожидать расширения области применения этого метода, в основном в сочетании со сканированием в УФ-области без дериватизации.

Правда, сейчас в основе большинства используемых на практике методов лежат химические реакции. В одной группе методов после разделения стероидов предусматривается опрыскивание подходящими реагентами; при этом образуются флуоресцирующие или окрашенные производные. Например, Амин и др. [31] испытывали устойчивость энантата дегидроэпиандро-стерона, измеряя отражение при 550 нм, после опрыскивания пластинки 5 %-ной серной кислотой в метаноле и нагревания при 120°С в течение 10 мин. Путем опрыскивания реагентом, состоящим из серной кислоты и метанола, можно определить этинилэстрадиол в противозачаточных таблетках [32] либо по отражению при 530 нм, либо по флуоресценции (возбуждение при 365 нм, испускание при 560 нм). Возбуждение светом с той же длиной волны вызывает флуоресценцию гестогенного компонента пилюль (D-норгестрел)" при 485 нм. Аналогичным образом проводят одновременное определение спиронолактона и канренона [798]. Альберс и Лисбоа [24] обнаружили, что вместо опрыскивания серной кислотой лучше пропитывать пластинку гидросульфатом аммония. Для деНситометрического определения оксистероидов в лекарственных формах Винтер-штейгер [835а] успешно применял реагент, состоящий из нафто-хинона, сульфокислоты и хлорной кислоты. Проведение измерения при 420 нм позволяет определить такие малые количества эстриола, как 30 нг. Для денситометрического определения различных стероидных гормонов Трубников [778а] использовал в качестве опрыскивающего реагента молибдофосфорную кислоту.

Сегура и Готто [707] предложили метод обнаружения и количественного определения некоторых органических соединений (в том числе стероидов) по флуоресценции, вызываемой нагреванием пластинок в течение нескольких часов при 120—130° в атмосфере аммиака, образующегося in situ при разложении карбоната аммония. Хотя механизм реакции не выяснен, метод Сегуры и Готто оказался очень ценным, так как воспроизводимость методик с использованием газообразного реагента выше, чем методик, в которых рекомендуются обычные опрыскивающие реагенты. Леви и Рейсфельд [499] существенно повысили чувствительность этого метода, предложив измерять непосредственно флуоресценцию пятна без сканирования. Линейный гра-дуировочный график получается в 5—250 нг интервале содержания тестостерона (возбуждение при 405 нм, испускание при 470 нм). Аналогичные результаты получены Сегурой и Наварро

[707а], использовавшими для получения высокоустойчивых флуорофоров соли цирконила.

Другой любопытный метод возбуждения флуоресценции на пластинках заключается в получении триметилсилильных производных (см. разд. 2.2.11), разделении их на пластинке, покрытой оксидом алюминия, и превращении в флуорофоры нагреванием до 170—180°С. Как показали Хук [390] и Эгг с сотр. [212] при определении тестостерона в моче и прогестерона в плазме крови, таким путем можно обнаружить около 10 нг 4-ен-З-кетостероидов.

В приведенных примерах флуоресценцию вызывают на пластинке, но разделяют не исходные стероиды, а их производные, полученные до нанесения на пластинку. К достоинствам этих и некоторых других обсуждаемых ниже методов относится то, что в них исключено возникновение ошибок, связанных с неравномерным распределением опрыскивающего реагента. Следует, однако, заметить, что один из основных источников ошибок, заключающийся в изменении толщины слоя вдоль пластинки, остается прежним.

Другие методы, включающие разделение предварительно полученных производных, основаны на классической реакции кетостероидов с 2,4-динитрофенилгидразоном [466, 776] с последующим измерением ослабления излучения при 370 нм, а также на дансилировании этинилэстрадиола и измерении флуоресценции продукта. На основе этих реакций Каммерль и Мучлер [440] разработали унифицированный тест для таблеток с низким содержанием стероидов.

Кроме того, метод дансилирования применяли для определения эстриола в лекарственных формах [184] и эстрогенов в моче [815].

Вызывает интерес метод

страница 26
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
стоимость профнастил г. тамбов
навьен бакси ферроли
тумбочки под телевизор икеа
заказ билетов на концерт москва

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(04.12.2016)