химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

индивидуальные компоненты таких групп стероидов, как, например, производные андростана [451], эстрана [754], оксимов и лактамов [729] и т. п. Для решения более сложных задач часто рекомендуют другие хроматографические системы. Например, Сиу [386, 387] разделял эстрогены на слое полиамида, Тиншерт и Трагер [772] описали разделение андро-стерона, эпиандростерона и дегидроэпиандростерона на целлюлозе, пропитанной 1,2-пропандиолом; трудно разделяемые пары конских эстрогенов типа а- и Р-дигидроэквилинов и т. п. были разделены Кариньяном и др. [126, 128] методом распределительной хроматографии на пластинах с носителями (силика-гель — гидроксид натрия или кизельгур — гидроксид натрия), пропитанными формамидом (в качестве неподвижной фазы); в качестве подвижной фазы предложены смеси хлороформ— трихлорэтилен (4:1) и ксилол—диэтиламин (200:1).

Стероиды, адсорбирующиеся на поверхности полярного адсорбента, например силикагеля, чувствительны к кислороду воздуха. Это приводит к осложнениям, особенно при разделении и последующем определении следов эстрогенов. В таких случаях используют слои, пропитанные аскорбиновой кислотой. Поскольку многие' методы проявления непригодны в присутствии аскорбиновой кислоты, положение пятен определяют при

76 Глава 2

Половые гормоны и родственные соединения 77

помощи радиоактивных добавок [572] или путем опрыскивания пластинки реагентом, разрушающим аскорбиновую кислоту, например серной кислотой или периодатом натрия [276].

Метод ТСХ, обычно используемый для разделения родственных веществ, с успехом применяется и для разделения трудно разделяемых пар стероидов. Например, Эгерт [211] предложил методику многократного элюирования.

Используя обычные ТСХ системы [оксид алюминия или си-ликагель и смеси петролейный эфир—диэтиловый эфир (6:4), толуол—этилацетат (9:1), бензол—этанол (98:2) и т. n.J и проводя последовательно от 2 до 10 элюирований, можно успешно разделять пары изомеров, например 5а- и 5я-прегнан-3,20-дионы, 5<х-прегнан-3а,20а-диол и его 208-изомер и т. д.' Для тех же целей ряд авторов, в том числе Лисбоа и Гофман [504а] и Кавина с сотр. [140], рекомендовали использовать восходящую и двумерную хроматографию соответственно.

Особого упоминания заслуживает работа Хары [339], поскольку в ней обсуждается взаимосвязь между подвижностями веществ при хроматографировании методами ВЭЖХ и ТСХ; при решении конкретных задач эта корреляция помогает подобрать систему для хроматографирования методом ВЭЖХ путем ее предварительного исследования методом ТСХ. Изучение поведения разных стероидов на силикагелевых пластинках и колонках с разными бинарными смесями растворителей позволило вывести следующую зависимость между значением RF (в ТСХ) и коэффициентом емкости к' (в ВЭЖХ):

const ? xRF= k,1 (2.15>

Найдено, что при данных условиях константа приближается к 1,5.

Для проявления пятен стероидов на пластинках в ТСХ предложено большое число различных проявителей. Наиболее употребительны серная кислота (разбавленная до той или иной степени водой или спиртами, иногда в сочетании с альдегидами, например, ванилином), фосфорная кислота, соляная кислота, хлорид сурьмы(III) и пары иода. Сведения о чувствительности и избирательности этих реагентов можно найти в приведенных выше монографиях. Для решения специальных задач иногда рекомендуются другие реагенты, например хлорид цинка в метаноле [527], гистохимические реагенты [787], молибдрванадо-фосфорная кислота [705], хлорид олова (II)—монохлоруксусная кислота—хлороформ [473], молибдофосфорная кислота (в тесте на беременность, основанном на обнаружении прегнандиола в моче [248]), хлорамин Т—серная кислота [55а] и т. д.

Количественный анализ методом элюирования пятна

Стероиды, элюированные из ТСХ-пластинок, можно количественно определить методами колориметрии, флуориметрии, газовой хроматографии, масс-спектрометрии, радиохимии и др. Многие из методов, обсуждаемых в соответствующих разделах этой главы, включают разделение или стадию (часто, стадии) очистки методом ТСХ в процессе подготовки пробы для последующего количественного анализа.

Хотя количественная тонкослойная хроматография требует особого мастерства и опыта и является довольно трудоемким и длительным процессом, она повышает селективность последующего количественного метода определения столь значительно, что стадия ТСХ в настоящее время составляет неотъемлемую часть некоторых сложных методик анализа стероидов.

Основные проблемы заключаются в следующем: а) определение положения пятен для последующего вымывания; б) сведение к минимуму потерь, связанных с необратимой адсорбцией или разрушением в процессе хроматографирования или элюирования; в) оценка полноты выделения на заключительных стадиях.

Первое систематическое изучение возможности применения ТСХ для количественного анализа стероидных гормонов было проведено Мэтьюсом и др. [531] уже в 1962 г. С тех пор в этой области проводятся и публикуются серьезные исследования как теоретического, так и практического характера, обзор к

страница 24
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
концерт группы наутилус
информационный стенд для спорт площадки
16 апреля конуерт наив
электропривод srf230a-s2

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(19.10.2017)