химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

ей используют для этого триметилсилилирование в различных экспериментальных условиях, как, например, нагревание в течение 1 мин при 80°С 31*

484 Глава 9

Разные стероиды 485

со смесью БСА и пиридина (5:1) [27] или нагревание при 100°С с ТМСИМ в течение 60 мин [24] или в течение 15 мин [6]. Результаты этих методов иногда сбивают с толку и трудно воспроизводимы [46]. Это обусловлено значительным различием в реакционной способности оксигрупп. В большинстве случаев авторы различных методик ставили целью получение единичных пиков, а степень силилирования обычно была неясна. Недавно этот вопрос был тщательно исследован Морганом и Пулом [36]. Они нашли, что реакционная способность оксигрупп по отношению с ТМСИМ меняется в ряду 2, 3, 22, 25 > 20» 14. Исключительно трудной для силилирования является третичная 14-а-оксигруппа (необходимо нагревание в течение ночи при 140°С с ТМСИМ или использование катализаторов типа ацетата калия); в жестких условиях следует принимать также во внимание енольное силилирование 6-кетогруппы. Экдизоны, не имеющие оксигруппы в положении 20 (сс-экдизон), легко силилируются при комнатной температуре в течение 30 мин с помощью ТМСИМ [42], тогда как для дериватизации 20-окси-группы, например в экдистероне, требуется нагревание при 100°С в течение 4 ч. Силилированные экдизоны обычно разделяют на метилсиликоновых неподвижных фазах (обычно OV101).

Низкая концентрация анализируемых веществ привела к необходимости повысить чувствительность определения. Для того чтобы можно было использовать детектор электронного захвата [35, 42], получали гептафторбутирильные производные. Позднее Пул и Морган [40, 41], а также Борет и О'Коннор [6] обнаружили, что даже без последней дериватизации триметилсилило-вые производные можно обнаружить с помощью детектора электронного захвата в количествах до 5 пг. Детальное исследование этого явления показало, что высокая способность к электронному захвату экдизонов обусловлена наличием Д7-6-кето- и 14сс-оксигрупп. При силилировании последней происходит дальнейшее увеличение чувствительности [40].

В некоторых случаях газохроматографические исследования были дополнены комбинированными методами — газовой хроматографией и масс-спектрометрией, а также масс-фрагментогра-фией [15а, 24, 36].

Важным методом разделения и очистки экдизонов является жидкостная хроматография на колонках с силикагелем, оксидом алюминия, флорисилом [25], полиамидом [15], амберлитом XAD-2 [20], сефадексом G-25 [21] и др. Экдизоны были среди первых стероидов, разделенных ВЭЖХ [17]. С тех пор она стала стандартным методом анализа природных экстрактов, содержащих экдизоны, поскольку в отличие от газовой хроматографии ВЭЖХ не требует дериватизации, а высокая актив

ность экдизонов в УФ-области позволяет определять их при 254 нм с чувствительностью, сравнимой с чувствительностью пламенно-ионизационного детектора, но, очевидно, более низкой, чем чувствительность детектора электронного захвата.

Разделение проводили на адсорбционных колонках с корасилом II системами растворителей хлороформ—95 %-ный этанол [8, 32, 37] на колонках с обращенными фазами, заполненных фенил-корасилом марки бондапак (смесь воды и этанола [8]), а также на колонках с пермафазой ODS или зорбаксом ODS (водный раствор метанола) [38].

Как и во многих других областях, адсорбционная и распределительная хроматография здесь также хорошо дополняют друг друга, что иллюстрируется рис. 9.1, взятым из работы Гилгана [8]. На этом рисунке показано, что после разделения на колонке с обращенной фазой при градиентном элюировании пять экдизонов дают 4 пика и лишь ино-костерон и макистерон разделяются плохо. Последние два соединения, различающиеся только 24-СНз-груп-пой, были легко разделены тем же исследователем на колонке с корасилом II с помощью смеси хлороформа и 95%-ного этанола в соотношении 8: 1 (которая в свою очередь не разделяет экдистерон и ино-костерон).

1 — экдистерон; 2 — ннокосте-рон; 3 — макистерон А; 4 — а-экдизон; 5 — понастерон А.

Следует упомянуть, что в процессе исследования экдизонов ВЭЖХ в исходных экстрактах Ога-ва и сотр. [38] разделили А- и В-изомеры инокостерона на колонке с пермафазой ODS при линейном

градиентном элюировании сначала чистой водой и кончая 2%-ным раствором метанола. Те же исследователи повысили селективность обнаружения экдизонов в экстрактах сканированием

486 Глава 9

хроматограммы не только необработанного экстракта, но и после его обработки борогидридом натрия. В результате обработки происходит восстановление 6-кетогруппы, и поэтому экдизоны элиминируются из хроматограммы. Скули и Наканиши [46] сообщали о полупрепаративном разделении различных экдизонов на колонке с порагелем PN градиентным элюированием водными растворами метанола.

В заключение следует упомянуть две работы, в которых сообщается об использовании в исследовании экдизонов радиоиммунного метода [6] и аффинной хроматографии [48].

9.2. СОЛАСОДИН И РОДСТВЕННЫЕ АЛКАЛОИДЫ

Соласодин является азотсодержащим

страница 181
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
стул самба цена
металлическая урна, со съемной крышкой-кольцом;

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(01.05.2017)