химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

с фосфорной кислотой в качестве опрыскивающего реагента. Градуировочный график для диосгенина линеен в интервале 0,25—3,5 мкг.

8.2.4. КОЛОНОЧНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ

И ВЫСОКОЭФФЕКТИВНАЯ КОЛОНОЧНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ

Колоночную хроматографию часто применяют в анализе различных растений на содержание сапогенинов. Цель применения этого метода обычно заключается в отделении сапогенинов от других стероидов (стеринов и др.) и нестероидных веществ, а также в разделении сапогенинов на моно- и полигид-роксилированные фракции. Колоночная хроматография не пригодна для разделения родственных по структуре производных. В качестве сорбентов обычно используют силикагель [23, 29], флорисил [30] и оксид алюминия [44].

На колонке с силикагелем производят разделение диосге-нин-ямогениновой фракции из экстрактов растений с целью их последующего определения с помощью ИК-спектроскопии [23] (см. разд. 8.2.2). В улучшенном варианте, описанном Джеффри-сом и Хардманом [29], разделение проводили на колонке, заполненной силикагелем (активность II), при элюировании смесями гексана и этилацетата (содержащие 20 % насыщающего количества воды), причем элюирование начинали со смеси 9:1, продолжали смесью 3:1 и заканчивали смесью 2:3. Первыми вымывались нелетучие масла, эфиры стеринов и спиростади474 Глава 8

Диосгенин и родственные сапогенины 475

ены-3,5, затем следовали стерины и, наконец, моно- и диоксиса-погенины.

Хиггинс [25] описал разделение сапогенинов из Agave с помощью ВЭЖХ и их количественное определение. Учитывая в качестве элюента и рефрактометрический детектор. Гюнтер и др. [27а] разделяли диосгенин, ямогенин, тигогенин, неотиго-генин, сарсасапогенин и смилагенин в форме ацетатов на колонках с зорбакс ODS и зорбакс SIL, регистрируя поглощение при 210 нм.

8.2.5. ГАЗОВАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ

Рис. 8.3. Разделение диосгенина (1) и сарсасапогенина (2) в форме эфиров бензойной кислоты ВЭЖХ на колонке (25 смХ4 мм), заполненной лихросорбом RP-8 (10 мкмоль), подвижная фаза — смесь аце-тонитрила и воды (8:2). Скорость потока 3,0 мл/мин, УФ-детектор (235 нм), температура комнатная [25].

Бремя,мин

плохие хромофорные свойства сапогенинов, их превращали в бензоаты с помощью бензоилхлорида и пиридина. Разделение выполняли на колонке с обращенной фазой лихросорбом RP-8 (рис. 8.3). Хорошее разделение достигнуто (среди других) для диосгенина и сарсасапогенина, отличающихся только конфигурацией метальной группы в положении 25 и наличием Д5-двой-ной связи.

Для определения диосгенина в различных видах Dioscorea Махато и др. [36а] применяли ВЭЖХ на колонке с ц-пораси-лом, используя смесь петролейного эфира и 2-пропанола (12:1)

Газовая хроматография — самый распространенный хрома-тографический метод количественного определения сапогенинов, поскольку они обладают удовлетворительной термической устойчивостью и летучестью.

В большинстве случаев газохроматического определения диосгенина дериватизации не требуется [8, 9, 15, 29а, 36, 37, 47, 50]. Обычно анализ проводят при температуре колонки 240—250°С на неподвижной неполярной фазе SE-30 (0,75— 2,5%) [8,9, 15,36,50].

ГХ-Методы пригодны для анализа экстрактов из различных растений, если цель анализа заключается в определении одного диосгенина и если родственные по структуре производные отсутствуют или содержатся в пренебрежимо малых количествах, поскольку в недериватизированном виде они плохо отделяются от диосгенина на неполярной неподвижной фазе.

Гекогенин [38] или гекогенин вместе с тигогенином [11, 48] можно определять как в недериватизированном виде [48], так и в форме ацетатов [11] или трифторацетатов [38] после разделения на неподвижных фазах SE-30 [48], OV-101 [11] или ХЕ-60 [38].

Если требуется разделить насыщенные и ненасыщенные (Д5) компоненты и 25R—25S пары, необходимы дериватизация 3-гидроксильной группы, а иногда и других гидроксильных групп и использование более полярных фаз, например QF-1 [10, 34] и OV-17 [34, 40]. Дериватизация необходима также при разделении 2а, 36-диоксипроизводных, так как они разлагаются при обычных условиях.

Коули и др. [10], а также Мета и Стаба [40] использовали метилсилилирование, тогда как Найт [34] провел сравнительное исследование хроматографического разделения недериватизиро-ванных, силилированных и трифторацетилированных соединений. Он показал, что наилучшие результаты при разделении были получены после трифторацетилирования [8а, 34] (15 мин прн комнатной температуре в смеси равных объемов трифтор-уксусного ангидрида и хлороформа). Это иллюстрируется рис. 8.4, на котором помимо прекрасного разделения С-25

476 Глава 8

Диосгенин и родственные сапогенины 477

эпимеров показано разделение насыщенных и ненасыщенных производных и диоксипроизводных.

45

Рис. 8.4. Газовая хроматограмма неочищенного диосгенина после трифторацети-лирования на стеклянной колонке (180 смхЗ мм), заполненной 3 % QF-1 на хро-мосорбе Q (100—120 меш), программированный подъем температуры колонки в интервале 200—230°С со скоростью 2°С/мин через 20 мин пос

страница 177
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
курсы и трудоустройство холодильщика в москве
флорбольные клюшки купить
кухонные тележки
центробежные вентиляторы улитка 220 в на воздуховод 100

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(24.04.2017)