химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

характерных пиков, обусловленных наличием спирокетальных остатков в молекулах сапогенинов; для определения общего содержания сапогенинов в экстрактах растений пригодна интенсивная полоса при 980 см-1. После кислотного гидролиза и экстракции петролейным эфиром экстракт очищают с помощью колоночной хроматографии (как правило, яа колонке с силикагелем [29]), поскольку количественные результаты можно получить только для очищенной смеси сапогенинов. ИК-Спектр регистрируют в 0,5—1 %-ном растворе хлороформа в 1-миллиметровой кювете.

Если цель анализа смеси диосгенина [(25К)-спиростен-5-Ол-ЗР] и сопутствующего ему (253)-эпимера (ямогенина) состоит ие только в определении общего содержания сапогенинов, но и в установлении соотношения эпимеров, сделать это можно по поглощению при 920 и 900 см-1. В спектре диосгенина более интенсивной является первая полоса, в спектре же ямогенина — вторая, поэтому соотношение эпимеров можно рассчитать из соотношения поглощений при этих волновых числах, определенных с помощью градуировочного графика.

S.2.3. ТОНКОСЛОЙНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ

Поскольку в растениях содержится большое количество сапогенинов, часто родственных по структуре, перед их обнаружением, идентификацией, а также количественным определением необходима предварительная стадия разделения с помощью тонкослойной хроматографии. Поскольку стероиды обладают умеренной полярностью (3-оксисапогенины несколько более полярны, чем соответствующие стерины), обычно их хро-матографируют на силикагеле. В литературе приведено огромное количество хроматографических данных [3, 17, 39, 57, 60]. В табл. 8.2 подробно рассматриваются некоторые характерные хроматографические системы для разделения наиболее важных сапогенинов, взятые из статьи Матсумото [39].

Наиболее трудной задачей является отделение Д5-производ-ных от их насыщенных аналогов, а также разделение эпимер-ных пар с 25R- или 25в-метильной группой. Как и в случае применения тонкослойной хроматографии для решения аналогичных задач разделения стеринов (см. разд. 4.2.6), разделение можно улучшить, используя пластинки, покрытые силикагелем

472 Глава 8

Диосгенин и родственные сапогенины 473

или оксидом алюминия и пропитанные нитратом серебра [13, 19, 52]. Характерный пример приведен в статье Розумека [51], которому удалось провести удовлетворительное разделение ти-гогенина (R,=0,56), диосгенина (0,46) и ямогенина (0,39) на силикагелевых пластинках, используя градиент нитрата серебра от 2,1 %-ного до нулевого содержания и трехкратную обработку смесью дихлорметан—ацетон (97 :3).

Заслуживает упоминания работа Окумура [42], в которой успешно использованы пластинки с покрытием из силикагеля и оксида алюминия, полученные спеканием на стекле.

Для опрыскивания хроматограмм обычно употребляют серную кислоту, хлорид сурьмы (III), смесь уксусного ангидрида и серной кислоты, иод, но есть сведения о применении таких специфических реагентов, как смесь анисового альдегида, уксусной кислоты, метанола, серной кислоты и молибденофосфор-ной кислоты [51].

После ТСХ-разделения и элюирования пятна для определения главных компонентов смеси сапогенинов применимы колориметрические методы, описанные в разд. 8.2.1. Например, Лопес Санчес и др. [36] использовали колориметрическую реакцию со смесью серной кислоты и метанола (4:1) для опреде--ления диосгенина после разделения на пластинке с силикагелем б смеси хлороформа и ацетона (4:1), проявления пятен парами иода и элюирования метанолом.

С тонкослойной хроматографией можно комбинировать и другие аналитические методы, например титриметрию [12], масс-спектрометрию [18] и метод, основанный на измерении гемолитической активности [53].

Блунден и др. [4, 5] в качестве метода анализа сапогенинов in situ разработали денситометрическое определение после проявления хлоридом сурьмы (III). Улучшенный вариант этого метода описали Брайн и Хардман [7]. Согласно их методике, хлороформный раствор смеси сапогенинов наносят на силика-гелевую пластинку с помощью автоматического устройства, хроматографируют в смеси гексана и ацетона (8:1), опрыскивают раствором, содержащим 300 г хлорида сурьмы (III) в 100 мл концентрированной соляной кислоты, сушат на воздухе 2 мин и нагревают 30 мин при 110°С. Затем хроматограмму сканируют и интегрируют в проходящем свете. Было найдено, что линейная зависимость между концентрацией диосгенина и сигналом интегратора наблюдается в интервале 4,5—6,5 мкг.

Локвуд и др. [35] также использовали хлорид сурьмы (III) в качестве опрыскивающего реагента после отделения стеринов от диосгенина на силикагеле в смеси гексана и ацетона (4: 1). Количественное определение выполняли в проходящем свете при 447 нм, внутренним стандартом служил ланостерин.

Аналогичным способом Николов и др. [41] определяли рускогенин, используя в качестве обнаруживающего реагента смесь /г-диметиламинобензальдегид—фосфорная кислота—хлорная кислота—этанол. Как показано Шаиным и Волошиной [54], прямое определение можно выполнить также флуориметриче-ским методом

страница 176
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
компрессионное белье в воронеже
материал порталов входные группы фото
Аренда домов в Западном административном округе
концерт сукачева в крокус сити 8декабря

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(22.11.2017)