химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

льзованы для их количественного определения еще на ранних стадиях развития полярографического анализа [60, 63, 64, 156, 157]. Низкая чувствительность методов классической полярографии не позволяет проводить анализ низкодозированных лекарственных препаратов. Для этих целей Кадиш и Шпилер [80] использовали метод дифференциальной импульсной полярографии. В качестве рабочего электрода служил капающий ртутный электрод, в качестве электрода сравнения — каломельный, а в качестве вспомогательного—платиновый проволочный электрод. На фоне 0,01 М гидроксида или иодида тетрабутиламмония в изопропаноле дигоксин и дигитоксин образуют пики при —2,285 и —2,325 В соответственно. Метод позволяет проводить определение указанных соединений в интервале концентраций 2,5 • 10-6—5 ? Ю-4 М.

Вследствие ограниченной применимости газовой хроматографии для определения сердечных гликозидов метод ГЖ—МС не играет здесь такой же важной роли, как в анализе стероидов других классов. Можно упомянуть о количественном масс-спектрометрическом методе (прямой ввод пробы), разработанном Гринвудом и др. [56]. Эти исследователи определяли соотношение дигоксина и его метаболита, дигидродигоксина, в биологических образцах после экстракции хлороформом.

Метод с применением изотопа рубидий-86 [11, 54, 83, 91] (использованного также Сторстейном [145] после ТСХ-разделе-ния) основан на ингибировании сердечными гликозидами поглощения рубидия красными кровяными тельцами. Образец, анализируемый на содержание сердечных гликозидов или их метаболитов, инкубируют с суспензией красных кровяных телец и рубидия-86. Концентрацию сердечных гликозидов (порядка нескольких нг/мл) можно вычислить по радиоактивности раствора с помощью градуировочного графика.

Миллер и др. [105] описали применение метода ЭПР для определения сывороточного дигитоксина, основанного на том же принципе, что и РИА. Основное его отличие состоит в том, что вместо лабильной радиоактивной дигитоксиновой метки используется устойчивое «спин-меченое» производное дигитоксина. Последнее получают окислением концевого сахара дигитоксина периодатом и последующей конденсацией образующегося альдегида с 4-амино-2,2,6,6-тетраметилпиперидиноксидом. В результате получают ЭПР-активное N-оксидное производное гликозида. Определение дигитоксина основано на измерении сигнала ЭПР при добавлении анализируемого образца к раствору антитела, насыщенного смесью антидигитоксина и спин-меченого дигитоксина.

Дигитоксин и родственные соединения связываются с активным центром Na+-K+-ATO-a3H, ингибируя ее активность. На этой основе созданы очень чувствительные и весьма специфические аналитические методы [96, 98]. Конкуренцию между меченным тритием уабаином и дигоксином (и т. п.) за активный центр фермента можно использовать для определения последнего в биологических жидкостях [16, 95]. Этот метод был рассмотрен Брукером и Джеллифом [17].

7.3. ПРОБЛЕМЫ АНАЛИЗА СЕРДЕЧНЫХ ГЛИКОЗИДОВ

7.3.1. КОНТРОЛЬ ЧИСТОТЫ ВЫДЕЛЕННЫХ СЕРДЕЧНЫХ ГЛИКОЗИДОВ

В различных фармакопеях для анализа сердечных гликозидов в массе фабричного продукта рекомендуются почти исключительно колориметрические методы. Наибольшее распространение получил щелочно-пикратный метод, рекомендуемый среди прочих для определения десланозида С британской фармако456 Глава 7

Сердечные гликозиды 457

пеей [14] и японской фармакопеей IX [153] и для обнаружения дигитоксина и ланатозида С японской фармакопеей IX [153] и фармакопеей XX США [158]. Из-за низкой селективности этого метода надежные результаты можно получить лишь в том случае, если колориметрическому определению предшествует хро-матографическое разделение. Например, дигитоксин определяют после хроматографирования на колонке с кремнеземом, пропитанным формамидом. Дигитоксин элюируют с колонки смесью бензол: хлороформ (3: 1). Аликвотную порцию элюата, содержащую около 0,2 мг дигитоксина, упаривают досуха, остаток растворяют в 5 мл этанола и добавляют 3 мл реагента, содержащего 0,2 % пикриновой кислоты и 0,5 % гидроксида натрия. Реакцию проводят при температуре 25±3°С вдали от интенсивных источников света. Затем через 8 мин измеряют поглощение при длине волны 495 нм относительно раствора реагента [158].

Описаны также колориметрические методики с применением л-динитробензола [158] и фосфорной кислоты [123]. Фармакопея II ГДР [4] рекомендует диксантил-мочевинный метод определения общего содержания гликозида и дигоксина или дигитоксина в массе фабричного дигоксина и дигитоксина соответственно. Для нахождения общего содержания гликозида упаривают досуха аликвотную порцию раствора, содержащую 0,05 мг образца. Остаток растворяют в 10 мл свежеприготовленного 0,01 %-ного раствора диксантилмочевины в смеси уксусной и концентрированной соляной кислот (100 : 1). Реакцию проводят в течении 20 мин при 60°С, затем смесь охлаждают и измеряют поглощение при 530 нм относительно раствора реагента. Для определения содержания дигоксина или дигитоксина повторяют те же операции, но после ТСХ-разделения образца и элюирования осно

страница 168
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
Эван Warmos М 24
шевроле авео после багажника остались вмятины
Jacques Lemans La Passion 1-1796G
клапан противопожарный диаметром 800 цена

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(08.12.2016)