химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

ляная кислота—аскорбиновая кислота—пероксид водорода. Последний реагент применяли также Сабатка и др. [133].

В наиболее распространенном флуориметрическом методе в качестве флуорогенного реагента использовали пары соляной кислоты [44—46, 49, 50, 67, 160]. Пластинку, высушенную при 100—110°С, помещали в темный бокс, содержащий пары соляной кислоты, приблизительно на 1 ч. При последующем облучении УФ-светом (кварцевая галогенная лампа) в течение 12— 13 мин происходило образование флуорофора. Интенсивность

442 Глава 7

Сердечные гликозиды 443

с высокой разрешающей способностью, обеспечивающих разделение близких по структуре производных, большой интерес вызвало использование газовой хроматографии. После первой чаа надежные количественные результаты можно получить в интервале от 2 до 20 нг гликозидов, что позволяет определять их в сыворотке крови [45, 46].

Использовали и другие реагенты, например смесь соляной кислоты, аскорбиновой кислоты и пероксида водорода [33] и смесь хлорида железа (III), серной кислоты и уксусной кислоты [34].

Для разделения и количественного определения сердечных гликозидов и их генинов Окумура и др. [119] применяли метод стержневой тонкослойной хроматографии с прямым пламенно-ионизационным детектированием. На рис. 7.2 показаны две типичные хроматограммы.

7.2.6. ГАЗОВАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ

Поскольку решение многих проблем анализа сердечных гликозидов требовало привлечения весьма чувствительных методов

1 — TMC-эфир дигоксигенина; 2 — TMC-эфир монодигитоксозида дигоксигенина; 3 — TMC-эфир бисдигнтоксозида дигоксигенина; 4 —ТМС-зфир дигоксина.

стично успешной попытки Джеллиффа и Бланкенхорна [73] возможности метода были тщательно изучены Вильсоном и др. [173, 174]. Было найдено, что после силилирования смесью гек-саметилдисилазана, триметилхлорсилана и пиридина (10:1: 10) при комнатной температуре в течение 30 мин различные агли-коны дигиталиса и гликозиды можно хроматографировать на неполярных силиконовых неподвижных фазах. Так, например, на рис. 7.3 показано разделение четырех членов С-серий хроматографией с программируемой температурой.

444 Глава 7

Сердечные гликозиды 445

Буфадиенолиды жаб и родственные производные были проанализированы газохроматографически в виде ТМС-эфиров Кубо и др. [90], а также Тогаки и Ито [150].

Из-за трудностей, возникающих в процессе хроматографирования при повышенных температурах, гликозиды перед сили-лированием и количественным определением гидролизуют разбавленной соляной кислотой. Полученные при этом агликоны удалось более или менее успешно (ТМС-эфиры дигоксигенина и дигитоксигенина разделяются, а гитоксигенин элюируется вместе с дигоксигенином) разделить, например на SE-30 при 250°С.

Были предприняты некоторые дальнейшие попытки улучшить возможности метода газовой хроматографии при определении карденолидов. Тан [151] установил, что при обычных условиях стерически сильно затрудненные третичные 148-оксигруппы де-риватизировать нельзя. Наличие такой оксигруппы неблагоприятно влияет на термическую устойчивость карденолидов и их разделение. При этом было найдено, что с обеих точек зрения перспективно предварительное дегидрирование смесью тионил-хлорид—пиридин.

Т'..,с-эфир дигитпксигенино

Другая возможность заключается в защите 14-оксигруппы путем катализируемого основаниями образования 14,21-эпоксида и последующего ацетилирования уксусным ангидридом с обра-' зованием устойчивого метилового эфира 3,21-диацетокси-14,21-эпоксидигитоксигениновой кислоты, как было описано Мейлин-ком и др. [101].

Иной путь решения указанных выше проблем дает косвенное газохроматографическое определение гликозидов дигиталиса, основанное на отщеплении остатка Сахаров и хроматографирований силилированных Сахаров [1].

Из-за низкого содержания сердечных гликозидов в биологических жидкостях при анализе последних необходимо использовать детекторы, более чувствительные, чем пламенно-ионизационные. Уотсон и др. [166, 167] показали, что с помощью детектора электронного захвата можно определить даже малые количества дигоксина — до 25 пг, если предварительно перевести образец в гептафторбутирильное (ГФБ) производное. Время удерживания ГФБ-производного дигоксигенина на 3 % OV-1 на газохроме Q при 240°С и скорости подачи гелия 50 мл/мин составляет 9 мин, а время удерживания ГФБ-производного дигитоксигенина (внутренний стандарт) 11,3 мин. Эта система оказалась также удобной для разделения дигидродигоксина и дигоксина. Следует отметить, что сахарный остаток отщепляется в процессе получения ГФБ-производного и из всех гликозидных производных образуется ГФБ-агликон. Следовательно, если задачей анализа является определение индивидуальных количеств гликозидов, их следует до газохроматографического измерения разделить с помощью тонкослойной хроматографии.

В связи с указанными трудностями газовая хроматография редко используется для серийных клинических и других анализов [40].

7.2.7. ВЫСОКОЭФФЕКТИВНАЯ ЖИДКОСТНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ

Ввиду довольно скромных достижен

страница 164
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
проектор аренда
Компания Ренессанс деревянные лестницы из дуба - цена ниже, качество выше!
кресло 848
временная помещение для хранение вещей в москве

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(10.12.2016)