химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

хроматографическую подвижность. Производные, содержащие цис- 1,2-диольную группу в концевом сахарном остатке, в смеси хлороформ—метанол—уксусная кислота (90:10:1) мигрируют медленнее, чем производные, содержащие 1,3-диольную группу в стероидном ядре (76,14р-диол, 14р,-1бР-диол). Меггес и др. [99, 100] изучали влияние борной кислоты и ее производных (а также других реагентов на диолы) на подвижность карденолидов при разделении методом бумажной хроматографии. Целецки и Ланг [148а] установили, что фе-нилборная кислота образует устойчивые циклические эфиры с 1,3-диольными группами карденолидов, что облегчает их очистку и разделение методом ТСХ.

440 Глава 7

Сердечные гликозиды 441

Фабер [44], а также Картниг и Кобосил [82] для разделения гликозидов применяли ТСХ высокого разрешения. Окумура [118а] распространил метод хроматографии на тонких слоях, полученных спеканием, на сердечные гликозиды и другие сте--роиды. Блох [12а] описал успешное использование силикагеле-вых пластинок с обращенной Си-фазой.

Для опрыскивания тонкослойных и бумажных хроматограмм сердечных гликозидов и агликонов предложено большое число реагентов [48, 115]. Для детектирования (и определения in situ) разделенных компонентов (см. ниже) используют описанные в разд. 7.2.2 и 7.2.3 колориметрические и флуорометрические реакции.

Если опрыскивающий реагент необходим только для визуального наблюдения пятен, чаще всего применяют растворы ?серной [134, 145] и хлорной [78] кислот, особенно в сочетании с анисовым альдегидом и ванилином [94, 140, 178]. Широко применяют и другие кислые реагенты, например пары соляной тсислоты [44, 46], трихлоруксусную кислоту с различными добавками [82, 158], смесь аскорбиновая кислота—соляная кислота—пероксид водорода [74, 133] и смесь фосфорная кислота—хлорид цинка—пероксид водорода [158]. Ароматические нитропроизводные, например пикраты [85] и 3,5-динитробензо-аты [164], используют главным образом в количественном анализе, однако в комбинации с иодом [12] их применяют и как опрыскивающие реагенты. Сведения относительно селективности и чувствительности этих реагентов можно найти в оригинальных работах.

Комбинируя различные опрыскивающие реагенты и другие микрохимические реакции, можно идентифицировать неизвестные производные, не смывая их с пластинок. Обсуждение таких ^методов [47, 115] выходит за пределы нашей книги.

Из новейших работ в этой области можно привести применение часто используемой радио-ТСХ методики [59] для выделения и идентификации нового метаболита дигитоксина.

Количественный анализ с элюированием пятен

Тонкослойная хроматография играет в количественном определении карденолидов не меньшую роль, чем в качественном анализе. Цель большого числа работ, посвященных этому во-лросу, заключается в разработке надежных методов определения индивидуальных производных в биологических образцах н растительных экстрактах.

Ряд методов основан на элюировании пятен с последующим колориметрическим определением. В качестве адсорбента обычно используют силикагель. Описано также применение кизельгура, пропитанного формамидом [126]. Пятна чаще всего элюируют смесью хлороформ—метанол (1 : 1). Для этих целей применяли основные колориметрические методики, описанные В разд. 7.2.2: ксантгидрольный и диксантилмочевинный методы [12, 61, 62, 126, 149] (последний [149] после разделения методом бумажной хроматографии), пикратный метод [27, 58, 69, 85], метод с 3,5-динитробензойной кислотой [55], тетранитродифе-нильный метод [127] и метод с хлоридом сурьмы (III) [43]. Раз- -работаны также флуориметрический метод [72] и метод радиоактивных индикаторов (рубидий-86) [145] (см. разд. 7.2.9) в сочетании с предварительным разделением ТСХ и элюированием пятен.

Методы количественного определения in situ

В последние годы получили широкое распространение разнообразные варианты методов анализа in situ. Бенчер и др. [6], а также Картниг и Кобосил [82] показали возможность количественного определения без опрыскивания хроматограмм с помощью спектрофотометрирования в отраженном свете при 225 нм. Этот метод в сочетании с ТСХ высокого разрешения [82] позволяет определить очень малые количества вещества — до 30 нг агликонов или 50 нг тетрагликозидов. Перед сканированием хроматограммы формамид, используемый для пропитки слоя силикагеля, удаляют нагреванием при 120°С в течение 30 мин. Относительное стандартное отклонение при определении 150 нг дигитоксигенина составляет ±2,37 %.

Недостатком описанного прямого метода является необходимость использования довольно дорогого спектрофотометра для сканирования хроматограмм, что препятствует применению метода в большинстве лабораторий. Более доступны для таких лабораторий разнообразные денситометрические и главным образом флуориметрические методы, основанные на различных химических реакциях.

Дёлкер и др. [33] описали успешное применение денситомет-рического исследования тонкослойных хроматограмм после опрыскивания такими реагентами, как ксантгидрол, тетранит-родифенил или смесь со

страница 163
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
сиреневый букет невесты фото
Компания Ренессанс: деревянные винтовые лестницы на второй этаж в частном доме фото цены- быстро, качественно, недорого!
кресло ch 799
KNSneva.ru - гипермаркет электроники предлагает SuperMicro SYS-6017R-NTF - от товаров до интеграции в Санкт-Петербурге!

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(11.12.2016)