химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

ракта раствором карбоната натрия с рН 10,5. Если эстрадиол и эстрон проэкстрагировать из гидролизата смесью бензола и петролейного эфира (1 : 1), измерение флуоресценции последующего эфирного экстракта будет характеризовать содержание эстриола.

Методы, основанные на флуоресценции, вызванной кислотами

Появление окраски при взаимодействии стероидов с сильными кислотами обычно сопровождается флуоресценцией, и это явление начиная с тридцатых годов используется для качественного и количественного анализа. Обзор результатов раннего периода и корреляций между флуоресценцией и структурой был сделан Голдцихером [286].

Флуоресценция под действием кислот применяется в основном для определения эстрогенов. Хотя помимо реагентов, содержащих серную кислоту, успешно используются и другие реагенты (фосфорная, соляная, муравьиная кислоты и др.), с помощью которых во многих случаях удается добиться поразительно селективных определений (например, Боскотт [92] определил а-эстрадиол в присутствии большого избытка р-эстра-диола при помощи 90 %-ной муравьиной кислоты в качестве флуорогенного реагента), в настоящее время почти исключительно применяются реагенты типа реагента Кобера, содержащие серную кислоту (см. разд. 2.2.2), для определения эстрогенов в жидкостях организма и смеси серной кислоты со спиртом для фармацевтического анализа.

Разработанный Иттрихом [400, 401] вариант метода Кобера—Брауна [106, 107] с применением реагента, состоящего из серной кислоты и гидрохинона, и экстракции флуоресцирующих продуктов наиболее удобен для определения общего zo-/^ держания эстрогенов в моче. Вся методика легко поддается автоматизации, и в последние несколько лет фактически только такие методы и публикуются.

Например, Фрай и др. [267] предложили автоматический вариант метода Хёиеля и Джонса [329], в котором рекомендуется использовать в качестве флуорогенного реагента 63 %-ную (по объему) серную кислоту [содержащую 2 % (масса/объем) гидрохинона] и в качестве экстрагента (после разбавления реакционной смеси водой) 0,9 М раствор трихлоруксусной кислоты в дихлорэтане. Длины волн возбуждения и излучения составляли 520 и 550 нм соответственно. Гутт-Кусьё и др. [289а] определяли общее содержание эстрогенов в сыворотке крови беременных в непрерывном анализаторе после ферментативного гидролиза и ионообменной очистки, используя раствор нитрофенола в хлороформе для экстракции флуоресцирующих веществ. Глюкоза и, по всей вероятности, другие альдегиды, присутствующие в моче, мешают определению. Их влияние можно уменьшить разбавлением проб перед анализом или устранить полностью либо путем разделения методом ионообменной колоночной хроматографии, либо путем восстановления альдегидной группы борогидридом натрия. Эта стадия включена в большинство методик, разработанных другими исследователями, для автоматического определения эстрогенов в моче [64, 124, 330, 393, 568, 573, 745]. Различие между описанными выше и некоторыми другими не упомянутыми здесь методиками заключается главным образом в способе предварительной обработки

4 Заказ № 182

50 Глава 2

Половые гормоны и родственные соединения 51

пробы и составе экстрагента. Конечно, эти методы позволяют определить лишь общее содержание эстрогенов, но если экстрагировать эстрон и эстрадиол из водного раствора смесью гексана и бензола (1 : 1), то можно селективно определить оставшийся эстриол. Этот прием использован, например, в работах Миклоши и сотр. [554] и Мессери с сотр. [545а] при определении эстриола в сыворотке крови и моче беременных. Высокая чувствительность метода Иттриха позволяет определять до 3-10—10 г эстриола, и, следовательно, весь анализ можно выполнить всего лишь из 0,2 мл сыворотки.

Кинетика образования флуоресцирующих продуктов типа реагентов Кобера из различных эстрогенов исследована Фау-лером и др. [260г] с целью разработки непрерывного кинетического метода их определения в моче беременных.

Наиболее уязвимой стадией автоматических методов Кобера— Иттриха является разделение фаз. Чтобы исключить ее, Левер и сотр. [498], Литтл и сотр. [506], Хэммонд и сотр. [336] и Дар-хэм [201] при автоматическом определении эстрогенов в моче использовали целиком водную систему, исключив вообще органический растворитель (даже стандартный раствор эстриола вводят в реакционную смесь в виде натриевой соли в 0,1 М гид-роксиде натрия). Пробу нагревали с реагентом, состоящим из серной кислоты, гидрохинона и сульфата железа (II); при последующем разбавлении раствора водным реагентом, содержащим хлоральгидрат и трихлоруксусную кислоту, возникала флуоресценция.

Благодаря высокой чувствительности метода, основанного на флуоресценции в кислой среде, его обычно с успехом применяют для определения эстрогенов в низкодозированных лекарственных формах, в основном этинилэстрадиола и местрадиола в противозачаточных таблетках. Высокая чувствительность играет особенно важную роль при анализе отдельных таблеток, причем в большинстве случаев определение автоматизировано. Для анализа таблеток н

страница 16
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
петли valenti, италия
поселок рига рига цены
тамбов ремонт автомобиля без покраски
kingsong 14b

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(03.12.2016)