химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

ческого разделения на амберлите XAD-2 и сефадексе LH-20, сольволиза, щелочного гидролиза и дериватизации с целью получения пропионатов метиловых эстеров. Отличительной особенностью работы Нишикавы и др. [137] является использование капиллярной газовой хроматографии (стеклянная колонка) в сочетании с масс-спектрометрией, что позволяет достичь очень высокой селективности и чувствительности (предел обнаружения 5 пг). Щепаник и др. [182] анализировали ацетаты метиловых сложных эфиров на термостойкой неподвижной фазе поли S-179, а Беппу и др. [22а] проводили дериватизацию с образованием трифторацетатов гекса-фторпропиловых сложных эфиров. Тома и др. [187а] описали метод определения урсодезоксихолевой кислоты в желчи человека, основанный на использовании в качестве внутреннего стандарта глицинового конъюгата 5р-холен-3-овой-24 кислоты.

6.2.9. РАДИОИММУННЫЙ МЕТОД

Радиоиммунный метод в анализ желчных кислот ввели Сим-мондс и сотр. [167] и Мёрфи с сотр. [133] в 1973—1974 гг.; довольно большое число работ, опубликованных с тех пор по этому вопросу, показывает, что значение радиоиммунного ме тода в анализе желчных кислот также растет.

Некоторые публикации посвящены определению связанных холевой кислоты [8, 47, 119, 125, 127, 152, 192], хенодезоксихолевой кислоты [8, 47, 119, 152, 158], дезокснхолевой кислоты [47, 119], сульфированной [44] и несульфированной [43, 153] литохолевой кислоты и урсодезоксихолевой кислоты [122] главным образом в сыворотке крови.

Антисыворотки позволяют применять в качестве иммуноге-нов конъюгаты желчных кислот и альбумина бычьей сыворотки. Их получают сочетанием карбоксильной группы желчной кислоты или (даже чаще) карбоксильной группы глицинового конъюгата с е-аминогруппой лизина в альбумине бычьей сыворотки (АБС).

60 г

Рис 6.4. Определение конъюгатов холевой кислоты радиоиннунвын методой.

Специфичность антисыворотки, выращенной против комплекса гликохолевой кислоты с альбумином бычьей сыворотки [192].

1 — гликохолевая кислота; 2—таурохолевая кислота; 3— гликохенодезокси-холевая кислота; 4 — гликодезоксихолевая кислота; 5 — таурохенодезоксихо-левая кислота; 6 — тауродезоксихолевая кислота; 7—холевая кислота; 8 — хенодезоксихолевая кислота; 9—дезоксихолевая кислота.

Специфичность различных антисывороток обычно вполне достаточна для довольно селективного определения конъюгатов основных желчных кислот в сыворотке человека. Следует, однако, учитывать, что антисыворотки не позволяют различать глициновые и тауриновые конъюгаты.

На рис. 6.4 приведены данные, показывающие высокую селективность антисыворотки против комплекса гликохолевая кислота—АБС. Из рисунка ясно, что особенно высока селективность относительно свободных желчных кислот; вполне удовлетворительна селективность и относительно связанных диокси-желчных кислот [192].

В качестве индикаторов используют исключительно меченные тритием (обычно в положениях И и 12) желчные кислоты.

Достаточно высокая селективность антисывороток обычно исключает необходимость предварительного разделения желчных кислот с помощью ТС или колоночной хроматографии.

416 Глава 6

Желчные кислоты 417

Почти во всех упомянутых выше статьях образцы сыворотки вводят в инкубируемую смесь либо сразу, либо после разбавления. Матерн и др. [125] выделяли желчные кислоты из образца сыворотки с помощью ионообменной колонки с XAD-2 и затем исследовали элюат радиоиммунным методом.

Связанные с антителами и свободные желчные кислоты обычно разделяют путем добавления сульфата аммония [8, 47, 152, 153, 158] или полиоксиэтиленгликоля [43, 44, 122, 127] с последующим центрифугированием; свободные радиоактивные кислоты в супернатанте определяют затем с помощью жидкостного сцинтилляционного счетчика. Описано также применение иммобилизованных антител (связанных с активированной CNBr сефарозой 4-В) [192].

Поскольку содержание желчных кислот в сыворотке довольно велико и радиоиммунные методы достаточно чувствительны, для выполнения анализа обычно хватает 0,1 мл сыворотки; градуировочные графики, как правило, охватывают область от 10 до 100 пМ.

6.2.10. ДРУГИЕ МЕТОДЫ

Карбоксильную группу желчных кислот можно легко оттитровать щелочными титрантами, например водным раствором гидроксида натрия в водно-спиртовой среде в присутствии индикатора фенолфталеина [187]. Крисафио и Чаттен [45] описали способ неводного титрования с помощью раствора меток-сида натрия в смеси бензола и метанола; титрование проводят в смеси бензол — метанол (10:1) или хлороформ — диметил-формамид (25 : 1) в присутствии индикатора тимолового синего.

Три кетогруппы дегидрохолевой кислоты можно определить с помощью различных вариантов метода, основанного на реакции образования оксима и титровании избытка гидроксил-амина. Так, Гёрёг и Томшани [74] применили в качестве реагента салициловокислый гидроксиламин, а титрование его изг бытка проводили с помощью раствора соляной кислоты в смеси пропиленгликоля и хлороформа в среде хлороформа и метанола (2 : 1); индикатором служила смесь дим

страница 153
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
курсы 3д моделированию
лечение пяточной шпоры ударно-волновой терапией в свао
курсы парикмахеров стилистов
sabaton 9 декабря

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(07.12.2016)