химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

олевая (Л)] хорошо разделяются смесью триметилпентан—этилацетат—ускус-иая кислота (10:10:2). Обычно число производных желчных кислот бывает слишком велико, чтобы разделение можно было

396 Гла>а 6

Желчные кислоты 397

осуществить в одной ТСХ-системе. В упоминавшейся выше статье и обзорах для разделения близких по структуре пар приводится несколько систем. Феер и Казик [62] нашли, что в смеси триметилпентан—этилацетат—уксусная кислота (50:40 : 10) Rf для X составляют 0,20, ХД 0,69, Д 0,78, Л 0,91, а в этой же смеси состава 65 : 35 : 5 величины Rf равны соответственно 0,02, 0,21, 0,23 и 0,67, что позволяет в результате двух хроматографирований разделить ХД и Д. В той же самой системе получены прекрасные результаты при разделении метиловых эфиров указанных кислот (Rf 0,04, 0,24, 0,30 и 0,73). Другими удачными системами для разделения желчных кислот оказались смеси триметилпентан—изопропиловый эфир—уксусная кислота—бутанол—вода (10:5:5:3:1) [87] и петролейный эфир—бутанол—уксусная кислота—этилацетат—бензол (21 : : 8: 13,5 : 6:7) [766]. Чавез [38] разделил 3-кетожелчные кислоты, а Куксис и Чайлд [106а]—их ненасыщенные производные.

Для разделения конъюгатов требуются еще более полярные системы, что усложняет эту задачу. Например, глициновые и тауриновые конъюгаты ХД и Д не удавалось разделить до тех пор, пока в 1978 г. Госвами и Фрей [72] не предложили подходящую для разделения этих трудных пар систему растворителей (табл. 6.1). Как показано в их статье, смесь, содержащая все восемь приведенных в таблице соединений, можно удовлетворительно разделить в шесть хроматографических стадий. Хорошие результаты были получены также Баттой и др. [II]. Тачстон и др. [1876] успешно применяли слой с обращенными фазами и буферный элюент для разделения тауриновых конъюгатов.

Икава и Гото [90] описали двумерную тонкослойную хроматографию желчных кислот и их конъюгатов.

Бэк [6] разделял глюкурониды желчных кислот в виде метиловых эфиров полиацетатов на силикагеле, используя в качестве элюента смесь дихлорэтана и диэтилового эфира (8:2), а Пармантье и Эйссен [145] провели разделение сульфатов.

Для обнаружения желчных кислот на ТСХ-пластинках обычно применяют серную и хлорную кислоты, хлорид сурьмы(III), молибдофосфорную кислоту, смесь анисового альдегида и серной кислоты [136]. В последние годы описано также применение смеси медь(II)—молибдат аммония—серная кислота [69—72], смеси /t-оксибензальдегида и серной кислоты [115], пирена [49, 50, 90] и 8-оксипирен-1,3,6-трисульфоната натрия [100, 118, 176].

Фракционирование желчных кислот с помощью ТСХ

Очень часто ТСХ используют не для выделения индивидуальных желчных кислот или их конъюгатов, а для разделения на фракции, т. е. для отделения желчных кислот от их конъюгатов, нейтральных стероидов и других липидов и т. п.

В качестве примера можно привести метод Госвами и Фрея [70], которые, используя пластинки с силикагелем и смесь изопропанол—этилацетат—вода—водный • раствор аммиака (20: : 25 : 6:4), отделили желчные кислоты и их конъюгаты от нейтральных липидов.

Беки и др. [21] с помощью смеси пропионовая кислота— изоамилацетат—вода—к-пропанол (3:4:1:2) отделили свободные и связанные желчные кислоты от холестерина и жирных кислот. Повторное хроматографирование на той же пластинке в системе триметилпентан—диизопропиловый эфир—уксусная кислота—изопропанол (2:1:1:1) привело к разделению свободных и связанных желчных кислот. Хуанг и Николе [86] отделили свободные желчные кислоты от связанных в системе хлороформ—метанол—вода (70: 25 :3). Двухступенчатое фракционное разделение описали Чавез и Кроун [39]. Удалось осуществить также другой тип фракционирования, например разделение глицина и таурина [71], конъюгатов глицина и таурина, а также сульфопроизводных [37].

Количественный анализ методом элюирования пятен

Метод тонкослойной хроматографии часто сочетают с количественными методами анализа; в этих случаях задача хроматографии заключается в выделении и очистке индивидуальных или группы желчных кислот для последующего определения.

398 Глава 6

Желчные кислоты 399

Из обсуждавшихся выше методик (разд. 6.2) некоторые колориметрические [22, 50, 66, 102, 117], флуориметрические [63, 64], газохроматографические [1, 42, 75, 76, 118, 138], радиометрические [22] и ферментативные [20, 70, 80, 114—116, 163] методы основаны на предварительном разделении и очистке с помощью ТСХ. Описано также применение ТСХ для микропрепаративного выделения желчных кислот с целью последующего изучения их строения [89].

Методы количественного определения in situ

Прямое определение неактивных в УФ-области желчных кислот на пластинках для ТСХ возможно только после обработки подходящим опрыскивающим реагентом. Арнфред и Педерсен [4] описали полуколичественный метод определения литохоле-вой кислоты и ее конъюгатов в желчи человека, основанный на опрыскивании молибдофосфорной кислотой и сравнении интенсивности пятна с интенсивностью пятна стандарта. Семенюк и Беер [159] применили тот же

страница 147
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
коралловый букет невесты
Компания Ренессанс лестница чердачная складная - всегда надежно, оперативно и качественно!
кресло ch 300
помещения для хранения вещей в москве

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(10.12.2016)