химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

а натрия, обрабатывали при 40°С 10 мл фосфорной кислоты и разбавляли до 25 мл бутанолом. Как видно из рис. 6.1, для холевой кислоты характерен селективный максимум поглощения при 260 нм.

Современный вариант использования классической реакции желчных кислот с концентрированной серной кислотой описан Мачиочи и Фиотеком [117]. При определении дегидрохолевой кислоты в лекарственных препаратах после разделения методом ТСХ пятно элюировали метанолом, выпаривали растворитель, нагревая 30 мин при 100°С с концентрированной серной кислотой, и измеряли поглощение при 381 нм.

392 Глава 6

Желчные кислоты 393

394 Глава 6

Желчные кислоты 395

в процессе ферментативного окисления желчных кислот, рассматриваются в разд. 6.2.7.

6.2.3. КОЛОНОЧНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ

Колоночная хроматография перед проведением количественного анализа служит для разделения и очистки желчных кислот, содержащихся в сложных биологических образцах. Разрешающая способность колоночной хроматографии не позволяет выделять индивидуальные желчные кислоты, но все же она является важным методом отделения группы желчных кислот в целом или по крайней мере их главных фракций.

Ионообменная хроматография может быть успешно использована для отделения желчных кислот и их конъюгатов от нейтральных стероидов и других липидов, что обусловлено кислотным характером желчных кислот. Зандберг и др. [157] положили этот принцип в основу метода определения желчных кислот в плазме. Они поглощали желчные кислоты и их конъюгаты из разбавленной и слабощелочной (рН 11) плазмы на анионите амберлист XN-1006 (ОН-форма). Описано также применение амберлиста А-15 [2] и А-26 [39]. Макино и Сьёвалл [121] с помощью амберлита XAD-2 извлекали желчные кислоты и их конъюгаты из сильнощелочной плазмы (рН 13). После промывания водой до нейтральной реакции их можно элюиро-вать с колонки этанолом или другим растворителем. Ряд исследователей [2, 6, 13, 61, 85, 96, 120, 140, 160, 191] использовали этот способ для выделения желчных кислот и их конъюгатов из плазмы, сыворотки, желчи, мочи и т. д., а затем проводили определение методами газовой хроматографии, ГХ—МС или высокоэффективной жидкостной хроматографии. Бэрне и Читранукрох [9] предложили использовать амберлит XAD-7.

Гель-хроматография на сефадексе LH-20 [6, 35, 101, 120]' пригодна для разделения сульфированных и несульфированных производных желчных кислот, тогда как эффективное разделе-, ние неконъюгированных производных, производных глицина и таурина, а также сульфированных и полисульфированных производных достигается применением диэтиламинооксипропил-сефадекса LH-20 [2]. Для выделения дезоксихолевой кислоты использовали также сефадекс G-25 [36].

Хроматография на оксиде алюминия находит применение главным образом для очистки желчных кислот после превращения их в метиловые эфиры [120, 139, 157]. В работах Энерота и Сьёвалла [57], Куксиса [105] и Прохазки [151] обсуждались некоторые ранее предложенные варианты колоночной хроматографии для разделения желчных кислот, в том числе разделение на оксиде алюминия, кремнекислоте, целите и т. д.

Колоночная хроматография (в сочетании с тонкослойной хроматографией) часто применяется для решения задач, связанных с выделением и очисткой желчных кислот. Часто случается так, что полная схема количественного анализа включает 3— 4 предварительные хроматографические стадии.

6.24. ТОНКОСЛОЙНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ

Одно из наиболее важных достижений тонкослойной хроматографии состоит в том, что этот метод позволяет решать (или по крайней мере играет существенную роль) практически все задачи, возникающие при анализе таких сложных стероидов, как желчные кислоты и их конъюгаты. В этой области наиболее важными являются обзоры Нейера [136], Энерота [55], Хоф-манна [83] и Хефтманна [81].

С помощью тонкослойной хроматографии можно решить следующие основные задачи:

а) выделение и идентификация индивидуальных желчных

кислот и их конъюгатов;

б) отделение желчных кислот от нейтральных стероидов

и других липидов, отделение желчных кислот от их конъюгатов;

в) выделение и очистка желчных кислот с целью последующего определения (метод элюирования пятен);

г) разделение и прямое количественное определение желчных кислот на пластинках.

Разделение желчных кислот и их конъюгатов

При изучении желчных кислот методом ТСХ в качестве сорбента наиболее часто используется силикагель G. Так как желчные кислоты относятся к наиболее полярным производным стероидов, для их хроматографирования можно применять более полярные системы растворителей, чем для хроматографирования стероидов других классов. Большинство исследователей предпочитают применять смеси, содержащие уксусную кислоту. Из многочисленных работ, посвященных изучению оптимального состава растворителя, следует упомянуть работу Энерота [54], в которой изучена возможность разделения около 40 желчных кислот в 17 системах растворителей. Наиболее биологически важные желчные кислоты [холевая (X), дезоксихолевая (Д), хенодезоксихолевая (ХД) и литох

страница 146
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
сварная сетка для заборов оцинковка белгород
стол a1357d
projector-3
чиж в клубе

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(06.12.2016)