химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

прогестерон

Мюллер-Муло и др. [144а] 1980 Эфиры жирных кислот витамина D3 Рыбий жир Лихросорб SI-60 Гексан с 0,05 % 2-пропанола или 0,18 % диоксана и 0,65 % диизо-пропилового эфира Предварительное ТСХ разделение

Автор Год Разделяемые соединения Образец Колонка Элюент Замечания

Набхольц и Херфорт [1446] 1980 Витамин D Диэтические продукты Сферисорб SI-5 Гексан—2-пропанол (99: 1) —

Джонс [99а] 1980 Витамины D2 и D3 и их метаболиты Стандарты Зорбакс SIL Гексан—2-пропанол—метанол (87: 10: 3); гексан—этанол—хлороформ (8 : 1 : 1)

Окано и др. .[151а] 1981 25-(OH)-D2, 25-(OH)-D3 Плазма крови Зорбакс SIL Гексан—2-пропанол (94,5:5,5) Предварительное ВЭЖХ разделение на нуклеосиле Cie

Дабек и др. [36а] 1981 25-(OH)-D2, 25-(OH)-D3 Плазма крови Диоксид кремния (3 мкм) Гексан—2-пропанол (1000 : 24) Предварительное разделение на сеп-паке Cie

Джонген и др. [100а] 1981 Метаболиты Плазма и сыворотка крови Нуклеосил 10NO2 Гексан-»-гексан— 2-пропанол—вода (800 : 200 : 7) Метод конкурирующего связывания белка

366 Глава 5

Витамины D и родственные соединения 367

° 2 4 6 8 Ю И Время, мин

1,2 — смолообразные примеси (предположительно превитамин D3 и (изотахк-стернн)3); 3 — п-диметиламинобензальдегид (внутренний стандарт); 4^(та-хистерин)8; 5 — витамин Da.

Как уже упоминалось в разд. 5.1, в процессе получения витаминов D между витаминами D и их превитаминами устанавливается равновесие. Для расчета активности витамина D необходимо принимать во внимание превитамины. Поскольку их поглощение в УФ-области значительно ниже поглощения вита0 2 4 6 8 Ю ? 12 14 15 /8 20 Время, мин

Рис. 5.6. Разделение синтетической смеси жирорастворимых витаминов ВЭЖХ в тех же условиях, что и на рис. 5.5 [199].

1 — пальмитат витамина А; 2 — ацетат витамина Е; 3 — ацетат витамина А; 4 —витамин Е; 5 — витамин D3.

минов D (см. табл. 5.1), площади пиков превитаминов, прежде чем суммировать их с площадью пика витамина D, нужно умножить на соответствующий фактор [42а, 43а, 85, 140а, 205а, 216а]. Фактор пересчета находят из сравнения площадей пиков стандартного раствора витамина D до и после нагревания до 80—90°С для установления равновесия.

Икекава и Коизуми [95] осуществили разделение восьми гидроксилированных метаболитов витамина D3 (рис. 5.7). (Детали этого метода см. в разд. 5.3.5.) Здесь упомянем только об очень интересной находке, сделанной этими авторами. Они показали, что эпимерную пару 24R,25-(OH)2-D3 и 24S,25-(OH)2-D3, которую как видно из рис. 5.7, в этих условиях разделить нельзя, можно разделить после силилирования гидроксильных групп с помощью ТМСИМ в гексане при 50°С в течение 20 мин.

На основании данных табл. 5.8 можно заключить, что ВЭЖХ является не только простым методом разделения и количественного определения витаминов D: довольно часто она применяется в комплексных аналитических методах. В дополнение к примерам, приведенным в табл. 5.8, упомянем еще два метода. При анализе сухого молока для фракционирования и очистки применяли патроны сеппак (Sep-Pak) и ВЭЖХ

368 Глава 5

Витамины D и родственные соединения 369

колонку с диоксидом кремния, а анализ выполняли на колонке

с обращенной фазой, снабженной предохранительной колонкой [346]. При определении витаминов D в маргарине [147а] использовали последовательно две абсорбционные колонки и одну колонку с обращенной фазой. С другой стороны, ВЭЖХ часто применяют для очистки или разделения с целью последующего анализа методом конкурирующего связывания белка, позволяющим проводить одновременное определение гидроксилиро-ванных метаболитов [За, 57, 70, 92а, 101а, б, 121а, 132а, 159а, 176а, 2006].

5.2.10. МЕТОД КОНКУРИРУЮЩЕГО СВЯЗЫВАНИЯ БЕЛКА И ДРУГИЕ РАДИОИЗОТОПНЫЕ МЕТОДЫ

В простейших случаях применения радиохимических методов меченые витамины D и родственные соединения используют для проверки полноты экстракции или хроматографического разделения. Некоторые примеры использования меченых производных при разделении с помощью колоночной хроматографии были представлены в табл. 5.3. Другие примеры можно найти в статьях Гильбертсона и Стрида [70], а также Айсмана и др. [57], в которых описано определение 25-оксивитаминов D2 и D3 в сыворотке и плазме крови человека соответственно. В обоих случаях анализ проводили методом ВЭЖХ после экстракции и хроматографической очистки на колонках с кремнекислотой и сефадексом соответственно. Перед экстракцией к пробе добавляли меченные тритием 25-оксивитамины и полноту извлечения определяли с помощью жидкостного сцинтиллятора. Экстракцию и предварительную хроматографическую очистку во всех случаях, обсуждаемых в следующей части этого раздела, посвященного определению витаминов D и их гидроксилирован-ных производных в крови методом конкурирующего связывания белка, проводят практически одинаково.

Для установления механизма реакций и путей метаболизма в этой области, как и в некоторых других областях органической химии, также применяются меченные изотопами соединения.

страница 134
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
купить бутсы с носоком за 3000
центр здоровье в москве
Кликните на ссылку, получите скидку по промокоду "Галактика" в KNS - копировальный аппарат - федеральный супермаркет компьютерной техники.
письменный стол тандем

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(05.12.2016)