химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

раску для двух упомянутых выше соединений (^манс = 540 нм, е =34 000) с необычайно высокой избирательностью. Эстрон, эстрадиол и т. п., не содержащие 17-этиниль-ной группы, не дают такой окраски, что указывает на необходимость наличия в молекуле стероида одновременно фенольного кольца А и 17-этинил-17-оксигруппы. В первоначальном варианте методики окраска проявлялась в процессе экстракции эстрогенов и самого реагента из их раствора в петролейном эфире. В современном варианте этого метода By [847, 848] и Грэхем [317] предложили определять этинилэстрадиол [847] и местранол [317, 848] в противозачаточных таблетках после отделения эстрогенов от гестогенных компонентов и мешающих наполнителей методом распределительной хроматографии на колонке; окраска появлялась при экстракции непосредственно из элюатов.

Несмотря на удовлетворительные чувствительность и селективность реакции с участием реагентов, содержащих разбавленную этанолом или метанолом серную кислоту, и на простоту методики, в биомедицине гораздо чаще применяются более длительные двухстадийные реакции, обладающие еще большей чувствительностью и селективностью, с участием реагентов, содержащих серную кислоту, воду и добавки. Одно время эти реакции лежали в основе стандартных методик фармацевтического анализа. На первой стадии этих методик, основанных на классической методике Кобера [470], эстроген нагревают примерно с 65 %-ной (по объему) серной кислотой, содержащей немного фенола, до образования желтого продукта (ЯмаКс»450 — 500 нм). На второй стадии смесь разбавляют водой до 40— 50 %-ной концентрации серной кислоты и снова нагревают. При этом окраска переходит в розовую (>.Макс»505 — 555 нм). Для разных эстрогенов молярный коэффициент поглощения составляет от 40 000 до 50 000.

Со времени выхода статьи Кобера появилось большое число публикаций по оптимизации условий этой реакции, применению таких методик в различных областях анализа стероидов и механизму реакций. Монографии Какача и Вейделека [437, 438] и Бартоша и Пезе [60] можно рекомендовать в качестве литера42 Глава 2

Половые гормоны и родственные соединения 43

турных источников. В настоящей книге приведены ссылки только на те статьи, в которых описаны наиболее существенные видоизменения первоначальной методики и приведены способы, до сих пор остающиеся стандартными.

Вместо самого фенола на первой стадии реакции были опробованы и его производные. Из них в настоящее время повсеместно применяется гидрохинон, а методики Болда [63], Брауна [106, 107] и Нокке [594], в которых рекомендуется этот реагент, считаются стандартными. Состав реагента Брауна зависит от определяемого эстрогена. Он содержит 2 г гидрохинона на 100 мл разбавленной серной кислоты, 66 %-ной (по объему) для эстрона, 60 % -ной для р-эстрадиола и 76 % -ной для эст-риола. Определяемый эстроген обрабатывают 3 мл соответствующего реагента при 100 °С в течение 20 мин, охлаждают, разбавляют водой (0,5 мл в случае эстрона, 0,2 мл в случае Р-эстрадиола и 1 мл для эстриола) и нагревают еще 10 мин. По уравнению Аллена [28], вычисляют исправленную оптическую плотность [см. уравнение (2.8)]. Длины волн соответственно равны 480, 513 и 546 нм.

По существу такая же методика предложена Нокке [594], только концентрации и время реакции несколько изменены. Помимо очень широкого применения в биомедицине эти методы использовались для определения эстрогенов в лекарственных препаратах [224, 461, 570, 719].

Другим важным вариантом метода Кобера является методика Хенни [327], предложившего реагент, состоящий из серной кислоты, воды, фенола и сульфата железа (III). Присутствие иона железа(III) в реакционной смеси повышает скорость развития окраски, стабилизирует окраску и, следовательно, улучшает достоверность метода. Кроме чисто фармацевтического применения [95, 739] путем изменения условий реакции можно решать чрезвычайно сложные задачи. К последним относятся селективное определение os-эстрадиола в присутствии больших количеств р-эстрадиола [327, 328], селективное определение эквилина [783в] и др.

Важная область применения описанного выше варианта реакции Кобера — это анализ конъюгатов эстрогенов и приготовленных из них лекарственных препаратов. По методу, рекомендуемому фармакопеей XX США [783в], привлечение экстракции и хроматографии и использование обоих реагентов Кобера позволяют определять натриевые соли сульфата эстрона и сульфата эквилина и общее содержание связанных эстрогенов. Грэхем [316], Карол и др. [131] и Кариньян и Лодж [129] опубликовали новые варианты этой методики, для того чтобы упростить процесс и повысить достоверность. Разработанные ими методики, более, пожалуй, пригодные в лабораторных условиях, подробно здесь не обсуждаются, поскольку недавно опубликовано несколько простых газохроматографических и ВЭЖХ-ме-тодов, позволяющих избирательно определять все компоненты (см. разд. 2.2.11 и 2.2.12).

Большинство работников клинических лабораторий, определяющих эстрогены в моче и т. п. колориметрическим методом, пользуются ре

страница 13
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
macbook pro 15 купить
txs1.ef10 модуль подключения шины
детская кровать 140 см длина
гироскутеры фирмы gowheel купить в москве

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(22.11.2017)