химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

рометрии на ядрах ,3С для количественного анализа стеринов.

Изучение холестерина с помощью дифференциальной калориметрии впервые описали Джой и др. [130]. Д'Ачензо и др. [59] успешно использовали этот метод для определения холестерина в желчных камнях. Количество теплоты, поглощенной при 37°С в процессе обратимого фазового перехода, служит мерой количества холестерина, который можно определить в течение 10 мин без предварительной обработки образца.

4.3. ПРОБЛЕМЫ АНАЛИЗА СТЕРИНОВ

4.3.1. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ХОЛЕСТЕРИНА

В СЫВОРОТКЕ КРОВИ И ДРУГИХ БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБРАЗЦАХ

Подавляющее число статей, посвященных анализу стеринов, касается определения холестерина в биологических объектах, главным образом в сыворотке крови *.

Работы, посвященные определению холестерина в сыворотке, можно разделить на две группы:

а) Цель анализа состоит главным образом в получении надежных данных о содержании свободного и общего холестерина

316 Глава 4

Холестерин и родственные стерины 317

в сыворотке крови. Необходимость знать содержание холестерина в сыворотке для диагностики и лечения кардиосклероза и других сердечно-сосудистых заболеваний привела к быстрому увеличению числа анализов проб сыворотки в клинических лабораториях. Поскольку такие определения проводятся в клинических лабораториях ежедневно, хороший аналитический метод должен удовлетворять следующим требованиям:

давать правильные и воспроизводимые результаты и быть пригодным для определения содержания свободного и этери-фицированного холестерина;

быть быстрым и не очень трудоемким;

быть удобным для автоматизации;

обеспечивать выполнение анализа из минимального объема сыворотки.

Сказанное выше означает, что методы, требующие длительных хроматографических разделений, для серийных анализов не пригодны. В наиболее современных методах неудобна даже стадия экстракции. Комбинированный метод, сочетающий газовую хроматографию с масс-спектрометрией [26, 27, 225, 260, 265], который можно рассматривать как почти «абсолютный», в этом случае может служить лишь только контрольным методом.

Что касается собственно метода газовой хроматографии, то он был рекомендован для серийных клинических определений холестерина в различных биологических жидкостях [7, 66, 84, 124, 129, 173, 180]. Эти методы требуют экстракционного разделения, трудоемки и поэтому не получили столь широкого распространения, как колориметрические или ферментативные методы. Газовая хроматография имеет наиболее важное значение как метод установления профиля концентраций липидов сыворотки и др. (см. п. «б»).

Хотя многие варианты классических колориметрических методов, описанные в разд. 4.2, не совсем удовлетворяют приведенным выше требованиям, до начала 1970 г. преобладали именно эти методы, и их до сих пор еще применяют во многих лабораториях. Даже в самых передовых лабораториях, где приняты наиболее современные методы, в качестве контрольных часто используют модифицированные методы Либермана— Бурхарда и Златкиса и др. [308]. С этой точки зрения наиболее важным представляется вариант метода Либермана—Бурхарда, разработанный Абелем, как в оригинальном ручном виде [1, 2], так и в автоматизированном [286].

При анализе классическими колориметрическими методами сталкиваются с такими трудностями:

агрессивность реагентов;

влияние мешающих компонентов (билирубина и т. д.), которое можно устранить только с помощью длительных экстракционных разделений и проведения холостых опытов;

необходимость предварительного осаждения дигитонидов перед раздельным определением свободного и общего холестерина;

довольно большой объем сыворотки (100—500 мкл), требуемый в большинстве случаев для единичного анализа.

Эти трудности устранимы при использовании колориметрических или (что даже лучше) электрохимических вариантов ферментативного определения холестерина, детально разобранных в разд. 4.2.9. Практически все эти методы полностью автоматизированы, и для проведения анализа требуется 1—50 мкл сыворотки.

В ряде статей [18, 108, НО, 125, 169, 173, 176, 190] сравниваются результаты определения холестерина ручными и автоматизированными колориметрическими, ферментативными и газохроматографическими методами.

б) Цель анализа состоит в получении данных о содержании свободного и этерифицированного холестерина (и, возможно, других стеринов), иногда о содержании индивидуальных эфиров холестерина с различными жирными кислотами и очень часто о содержании нестероидных сывороточных липидов. Эти задачи можно решить только с помощью хроматографических методов.

В анализе липидов часто используют методы, сочетающие хроматографическое разделение на колонке или в тонком слое с последующим количественным определением (обычно колориметрическим) . Большинство примеров, приведенных в разд. 4.2.5 и 4.2.6, относится к определению холестерина в сыворотке или других липидах. Общим недостатком таких методов является их трудоемкость, обусловленная продолжительностью стадий разделения и количественного определения. Это относится к мето

страница 117
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
компьютер для начинающих курс занятий
купить котел газовый отопительный
курсы свадебного декоратора
купить скамейку для торгового центра

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(05.12.2016)