химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

p>чувствительности для четырех важных стеринов и их триметилсилиловых эфиров, определенные Грюнвальдом [98]. Следует заметить, что эти величины слегка зависят от температуры колонки и скорости потока. Аналогичные результаты получены Розанским [249].

Разделение стеринов методом газовой хроматографии часто заканчивается идентификацией или количественным определением с помощью масс-спектрометрии. Эти методы будут обсуждаться в разд. 4.2.10.

4.2.8. ВЫСОКОЭФФЕКТИВНАЯ ЖИДКОСТНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ

Как показано в предыдущем разделе, газовая хроматогра; фия пригодна для решения почти всех задач, возникающих при разделении и количественном анализе сложных смесей стеринов. В силу этого, а также по ряду некоторых других обсу304 Глава 4

Холестерин и родственные стерины 305

ждаемых ниже причин для стеринов высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) является менее важным методом, чем для стероидов других классов.

Главный недостаток ВЭЖХ применительно к анализу стеринов обусловлен тем, что большинство стеринов обладает только изолированной двойной связью (связями) и, следовательно, плохо поглощают УФ-излучение, т. е. их можно обнаружить с достаточно хорошей чувствительностью лишь при длинах волн менее 210 нм, что весьма сложно при хромато-графировании образцов биологического происхождения. Эта трудность устраняется при разделении стеринов в форме бензоатов. В таком случае обнаружение с достаточно высокой чувствительностью можно выполнить при 230 нм [87, 214], но при этом ухудшается разрешение [241]. Егрен и сотр. [209а] описали послеколоночный ферментный реактор для превращения холестерина и ,его производных в спектрофотометрически высокоактивные 4-ен-З-кетопроизводные. Описано также применение рефрактометрического детектора [241] и детектора с движущейся лентой [46, 300], однако они слишком чувствительны, что не очень удобно при решении многих практически важных задач.

Хотя возможности высокоэффективной жидкостной хроматографии используются не так полно, как возможности газовой хроматографии, на основании фундаментальной статьи Риса и др. [241], шмводивших разделение на колонке с обращенной фазой ц-бондапак Cie смесью метанол—хлороформ—вода (71:16:13), можно заключить, что большинство важных стеринов (холестерин, ситостерин, кампестерин, брассикастерин и др.) можно разделить и в свободном виде, и в форме ацетатов. Хорошо разделяются и некоторые «трудные пары», например 5а/р-холестанолы, тогда как другие разделить нельзя, и в целом следует заключить, что применение ВЭЖХ с точки зрения разделения не является шагом вперед по сравнению с газовой хроматографией.

Тем не менее есть один момент, когда ВЭЖХ имеет определенные преимущества по сравнению с газовой хроматографией. При изучении сложных смесей стеринов разделенные с помощью ВЭЖХ чистые компоненты гораздо легче затем иденти-- фицировать или изучать их структуру спектроскопическими методами [241]. В качестве примера можно привести работу Гюнтера и др. [120], успешно разделивших и выделивших холестерин, из 500-кратного избытка растительных стеринов, и работу Ределя и Капиллона [240], разделивших трудную эпи-мерную пару 25R- и 255-26-оксихолестеринов.

Интересно, что холестерин был одним из первых веществ, проанализированных непосредственно комбинированным методом ВЭЖХ и масс-спектрометрии [258].

В качестве замечательного примера применения ВЭЖХ в анализе липидов [3] можно привести работу Картера и сотр. [46], использовавших колонку с силикагелем для отделения холестерина и его эфиров от других сывороточных липидов, и работу Кэррола и Руделя [45а], применивших для тех же целей колонку с обращенной фазой зорбакс ODS.

Колин и др. [54] сообщили об успешном использовании ВЭЖХ для разделения стеринов растительного происхождения. Их работа заслуживает особого упоминания, поскольку представляет собой первый случай использования колонки с пиро-графитом в анализе стеринов (элюент хлороформ—метанол в соотношении 3:2). Дункан и др. [68] определяли свободный и общий сывороточный холестерин методом ВЭЖХ на колонке с неподвижной фазой ц-бондапак Cie при элюировании смесью 2-пропанол—ацетонитрил—вода (6:3:1). Содержание свободного и общего холестерина находили по площади пика холестерина до и после омыления.

ВЭЖХ оказалась пригодной для изучения промежуточных продуктов биосинтеза холестерина. Хорошее разделение наблюдали на колонках с силикагелем [101а, 276] или ц-бонда-паком С[8 при элюировании безводным ацетонитрилом [101] или смесью ацетонитрил—вода (88: 12) [101а].

Методом ВЭЖХ с необращенными фазами можно определить 7-дегидрохолестерин в коже крысы [301]. Таллова и Хакл [272а] определяли холестенон в экстрактах надпочечников крыс, используя систему с обращенными фазами.

Представляет интерес применение ВЭЖХ в анализе продуктов автоокисления холестерина [9, 281], поскольку недостаточная устойчивость образующихся гидропероксидов и эпоксидов не позволяет использовать газовую хроматографию.

4.2.9. ФЕРМЕНТАТИВНЫЕ МЕТОДЫ

Общие положения

В 1973 г. Фл

страница 112
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
акции на кровати аскона с подъемным механизмом
siemens fdcio222 цена
Стол журнальный Олимп Сатурн - М03
004.100000.027

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(17.01.2017)