химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

ую фракцию на слое, приготовленном из смеси 30 г кизельгура Н и 9 г сульфата аммония. После трехкратного элюирования [гексаном, бензолом и, наконец, смесью гексана, диэтилового эфира и уксусной кислоты (70:30: 1)] пятна проявляют просто нагреванием без опрыскивания и получают вопроизво-димые пятна, пригодные для последующей денситометрии.

В методе, разработанном Фельдманом и Фосслайном [83], разделение осуществляют на силикагеле смесью петролейного эфира, диэтилового эфира и уксусной кислоты (90 : 10: 1). Обнаруживающим агентом служит ' 10 %-ный раствор молибдо-фосфорной кислоты в 95 %-ном этаноле, затем хроматограмму холестерина, его эфиров и других липидов сканируют, измеряя отражение при 750 нм. Аналогичная методика описана в работе Петера и Рейнольдса [223].

296 Глава 4

Холестерин и родственные стерины 297

Денситометрию сывороточных липидов после опрыскивания хлоридом сурьмы(У) описали Нушель и Оке [149]. Кроме того, описаны денситометрические методы определения нано-граммовых количеств холестерина, например метод Тоучстона и сотр. [279], основанный на использовании раствора ацетата меди (II) в фосфорной кислоте в качестве обнаруживающего

Рис 4.1. Денситограмма пятен на тонкослойной хроматограмме смеси липидов (подробное обсуждение хроматографирования см? в тексте) [295].

5 — старт: 1 — монопальмитин; 2 — холестерин; 3—1,2-дипальмитин; 4— 1,3-дипальмитин; 5 — пальмитиновая кислота; 6 — трипальмитин; 7 — метиловый эфир гептадекановой кислоты (внутренний стандарт); 8 — пальмитат холестерина.

агента и прямого денситометрического измерения при 600 нм, а также метод Винтерштайгера и Гюбитца [297], в котором хроматограмму погружают в раствор реагента, состоящего из натриевой соли 1,2-нафтохинон-4-сульфокислоты и хлорной кислоты, и сканируют при 620 нм.

Прямое денситометрическое определение стеринов без опрыскивания возможно только в случае их УФ-активных производных, поглощающих в УФ-области. Например, Кройциг [153] описал определение эргостерина в мицелии плесневого гриба после омыления и экстракционного отделения неомыленных компонентов. Количественное определение эргостерина проводилось по поглощению при 282 нм.

Часто используют также флуориметрическую оценку хрома-тограммы. Николози и др. [199] использовали родамин 6G в качестве обнаруживающего агента и сканировали хроматограмму по флуоресценции пятен липидов после разделения на силикагеле в смеси растворителей диэтиловый эфир—уксусная кислота—петролейный эфир (20:2 :78) и хлороформ—мета-• нол—уксусная кислота—вода (65: 20 :6:4).

Млекуш и сотрудники измеряли флуоресценцию стеринов и других липидов после опрыскивания серной кислотой [183] или разделения в слое силикагель—сульфат аммония [182].

Липиды плазмы, включая свободный и этерифицированный холестерин, были разделены Вандаммом и сотр. [283] на силикагеле смесью петролейного и диэтилового эфиров (85: 15). Количественную оценку проводили с помощью пламенно-ионизационного детектора.

4.2.7. ГАЗОВАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ

Впервые о применении газовой хроматографии для разделения стеринов сообщалось в статье Ван-ден-Хойвеля и др. [285]. Это была одна из первых публикаций, посвященных применению этого метода в анализе стероидов. С тех пор по этому вопросу опубликовано несколько сотен статей, и теперь можно считать, что газовая хроматография является несомненно наиболее важным хроматографическим методом количественного анализа стеринов. Причины этого таковы:

а) стерины — сравнительно устойчивые соединения даже

при повышенных температурах, и поэтому их можно легко хроматографировать и в исходном виде, и в виде производных;

б) разрешающая способность газового хроматографа достаточна для разделения даже близких по структуре стеринов и

их эпимерных пар (за исключением некоторых «трудных»

пар);

в) большинство анализируемых образцов обычно содержит

достаточные количества стеринов, так что чувствительность

газовой хроматографии (даже при использовании только пламенно-ионизационного детектора) позволяет получить надежные результаты количественных определений;

г) перед выполнением анализа методом газовой хроматографии не требуется проводить трудоемкие операции разделения и очистки.

Прежде чем дать описание наиболее важных результатов, содержащихся в огромном числе публикаций, обратим внимание читателей на два отличных обзора в этой области, написанных Найтсом [146] и Хефтманном [104], охватывающих литературу до 1972 и 1974 гг. соответственно. Особого упоминания среди многочисленных обзорных статей, появившихся позднее, заслуживают работы Куксиса [158] и Хомберга [Ш].

Дериватизация

Дериватизация стеринов не представляет таких серьезных трудностей, как в анализе стероидов некоторых других классов. Большинство стеринов, обладающих 5-ен-Зр-оксигруппи-ровкой, достаточно устойчиво, и их можно хроматографировать

298 Глава 4

Холестерин и родственные стерины 299

без дериватизации. Образование 3,5-диенов в качестве продуктов разложения наблюдается только в слу

страница 109
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
кресло престиж гольф
как научиться ремонтировать навесные котлы
сетка рабица оцинкованная размеры
kiddy cruiserfix pro

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(22.05.2017)