химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

ящим адсорбентом для решения большого числа задач. Результаты можно значительно улучшить, если для разделения стеринов с разной степенью ненасыщенности и различным положением двойных связей применять силикагель, обработанный нитратом серебра (обычно 5—15%) [11, 51, 58, 122, 147, 189, 231]. В основе этого метода лежит образование я-комплексов между ионами серебра (I) и двойными связями. При разделении стеринов подходящим носителем для нитрата серебра служит также оксид алюминия [136].

Для разделения эпимерных пар стеринов более эффективна хроматография с использованием других адсорбентов, особенно оксида магния [136] или смеси его с силикагелем (аназил В) [23, 147]. Это иллюстрируется табл. 4.2, составленной на основании данных Найтса [147]. В этой таблице наряду с данными, свидетельствующими о плохом разделении отдельно на силикагеле и оксиде алюминия, приведены данные, иллюстрирующие хорошее разделение ненасыщенных стеринов на силикагеле, содержащем нитрат серебра. Здесь же можно видеть, что на аназиле В можно удовлетворительно разделить такие «трудные пары» стеринов, как кампестерин и 5-эргостенол, различающихся только конфигурацией 24-метильных групп.

Другой способ улучшения разделения заключается в применении распределительных хроматографических систем, содер294 Глава 4

Таблица 4.2. Разделение ацетатов стеринов методом тонкослойной хроматографии" [147]

Исходный стерин Силикагель 20 % AgNOa на силикагеле Окснд алюминия Аназил В (SiO,+MgO)

Холестерин 1,00 1,00 1,00 1,00

Холестанол 1,02 1,26 1,02 —

Кампестерин 1,04 1,06 1,03 1,21

5-Эргостеиол 1,00 1,06 1,01 1,12

Ситостерин 1,10 1,06 1,03 1,17

7-Дегидрохолестерин 0,80 0,10 0,71 0,78

Брассикастерин 1,10 0,56 0,91 1,03

Стигм а стерин 1,10 0,81 0,88 0,90

Эргостерин 0,84 0,05 0,58 0,61

а Система растворителей: 1 %-ный раствор диэтилового эфира в петролейном эфире. Величины отнесены к ацетату холестерина.

жащих силикагель или кизельгур, пропитанных парафином или низшими углеводородами, в сочетании с различными подвижными фазами [57, 58, 62]. В последние годы эти системы, по-видимому, несколько утратили свое значение. Следует заметить, что подобного рода разделения протекают значительно легче, если в качестве адсорбента использовать силанизированный силикагель [289].

Что касается проведения химических реакций перед хрома-тографическим разделением стеринов, то, по-видимому, следует считать, что этерификация 3-оксигруппы с образованием ацетатов, бензоатов и т. д. приводит к улучшению разделения. Бромирование [41, 58] или эпоксидирование [13] двойных связей в ядрах стероидов позволяет разделить насыщенные и ненасыщенные стерины.

Для проявления пятен стеринов на хроматограммах предложено большое число реагентов. Наиболее часто используются растворы серной кислоты и хлорида сурьмы(Ш), но в монографиях [170, 194, 195] рекомендуются и детально обсуждаются также другие реагенты: пары иода, сульфохром, фосфорная кислота, /г-толуолсульфокислота, хлорсульфоновая кислота, реагент Либермана—Бурхарда, хлорная кислота—нафтохинон, анисовый альдегид—серная кислота, хлорид сурьмы (V), хлорид цинка, хлорид железа(Ш)—серная кислота, флуоресцеин и т. д. В соответствии с последними достижениями имеет смысл упомянуть, что воспроизводимость окраски, возникающей в присутствии хлорида железа (III), можно улучшить включая его в слой силикагеля и опрыскивая хроматограмму серной кисХолестерин и родственные стерины 295

лотой [253]. Есть сообщения об использовании смеси оксида ва-надия(У) с серной кислотой [175], различных красителей типа малахитового зеленого [274], альцианового синего и толуиди-нового синего [282].

Количественный анализ

Очень часто тонкослойная хроматография применяется для количественного разделения и очистки стеринов, которые затем элюируют и анализируют подходящим методом, например с помощью колориметрии [8, 69, 152, 155, 157, 177, 209] или газовой хроматографии [146]. По этому вопросу опубликовано много статей, большая часть которых цитируется в монографиях, упомянутых в начале настоящей главы.

Часто, главным образом при анализе липидов, денситомет-рическую оценку содержания стеринов проводят непосредственно в пятнах на тонкослойной хроматограмме. В некоторых случаях достаточно полуколичественного визуального сравнения пятен образца и стандарта [37]. Типичным примером количественного денситометрического метода является методика Вик-лунда и Элиассона [295]. Холестерин и его эфиры отделяют от других липидов методом тонкослойной хроматографии на силикагеле G, а пластинку обрабатывают смесью диэтилового эфира и уксусной кислоты (99:1), затем смесью гексана, диэтилового эфира и уксусной кислоты (85:15:1). Пятна опрыскивают 70 %-ной серной кислотой, насыщенной бихроматом калия, нагревая при 180°С в течение 25 мин. Денситограмма полученной таким образом хроматограммы приведена на рис. 4.1. Содержание индивидуальных липидов находят по площадям соответствующих пиков.

Кастеллани и сотр. [47] разделяли хроматографически ли-пидн

страница 108
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
Кликни на компьютерную фирму KNS. Промокод на скидку "Галактика" - XU2492HSU-B1 с доставкой по Москве.
билеты на киркорова в связано
блендер bamix отзывы
нож стейковый zwilling pro 120 мм (38409-121)

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(27.02.2017)