химический каталог




Количественный анализ стероидов

Автор Ш.Гёрёг

юдения Виндауса [296] об образовании нерастворимого молекулярного комплекса (1:1) между холестерином и дигитонином послужили основой для разработки одного из ставших классическим методов анализа стероидов.

дигитонин

R = ксилоза— (галактоза)г— (глюкоза)2—

Позже было установлено, что стерины, содержащие свободные Зр-оксигруппы и Д6-двойные связи или 5а-водород, также дают реакцию с дигитонином, тогда как другие стерины, главным образом За-оксипроизводные, не вступают в нее, и поэтому этот метод имеет важное значение для определения конфигурации 3-оксигруппы [102].

Реакцию с дигитонином можно использовать для количественного определения только стеринов (другие Зр-оксИстероиды не образуют достаточно нерастворимых соединений, которые можно было бы определять на основе этой реакции). Образование комплекса между стеринами и дигитонином можно различными способами использовать для количественного определения стеринов или их разделения при определении другими аналитическими методами. (Несмотря на то, что другие сапонины, например гитонин [61], образуют даже менее растворимые молекулярные комплексы, чем дигитонин, а также на то, что описано образование осадка с алкалоидом томатином [256], дигитонин остается единственным реагентом, до сих пор сохраняющим значение в анализе стеринов.)

Если для выполнения анализа располагать по крайней мере 10—20 мг стерина, гравиметрический метод обеспечивает получение надежных результатов. Для уменьшения потерь из-за неполноты осаждения образец, растворенный в 10 мл этанола, обрабатывают при 70°С небольшим избытком дигитонина, растворенного в смеси 12 мл этанола и 5 мл воды. Для ускорения осаждения к реакционной смеси можно добавить хлорид алюминия [36]. После стояния в течение 2 ч осадок отфильтровывают и высушивают при 105°С. Гравиметрический фактор имеет небольшую величину (0,239 для холестерина), что благоприятствует анализу. Если присутствуют также эфиры стеринов с жирными кислотами, перед выполнением анализа необходимо провести их омыление (например, нагревая в течение 3 ч при 50—60°С в присутствии 1 % гидроксида калия) [172].

Осаждение и выделение осадков стеринов находят широкое применение при их удалении из сложных смесей. В неомыляе-мых фракциях липидов растительного или животного происхождения стерины содержатся в таком большом избытке, что их необходимо удалить перед проведением анализа, чтобы можно было определять содержание минорных компонентов в фильтрате. Из многочисленных примеров следует упомянуть определение витамина D3 в жире печени трески методом колориметрии [4] или газовой хроматографии [22], где осаждение стеринов в форме дигитонидов является важной стадией предварительной подготовки пробы перед определением витамина D, поскольку последний не осаждается дигитонином. Для тех же целей можно использовать метод колоночной хроматографии на целите, модифицированном дигитонином, так как такие колонки селективно поглощают стерины [150, 210].

Комплексы стеринов с дигитонином и томатином, что очень важно, легко разлагаются при обработке кислотами, пиридином и т. п. Поскольку образующиеся при этом дигитонин и томатин не мешают применению метода Либермана—Бурхарда, то осадок можно прямо проанализировать с помощью этого метода. Такой принцип, впервые использованный Шенхаймером и Сперри [225], в последнее десятилетие нашел широкое применение. Здесь уместно процитировать только несколько публикаций [12, 85, 118, 132, 267]. Главным достоинством введения этой стадии в методику Либермана—Бурхарда является повышение ее селективности. Модифицированные методы обычно заключаются в экстракционном отделении стеринов от биологической матрицы подходящим растворителем, осаждении комплекса, отделении его центрифугированием и использовании осадка по методу Либермана—Бурхарда.

Гарно [93а] описал способ фракционирования дигитонидов стеринов с помощью тонкослойной и колоночной хроматографии на силикагеле, а Эл-Олеми и Штос [75]^ сообщили

19 Заказ 1* 182

290 Глава 4

Холестерин и родственные стерины 291

о возможности их разложения и хроматографического разделения на компоненты на сефадексе LH-20.

Используя зависимость скорости осаждения дигитонидов стеринов от таких структурных особенностей, как степень ненасыщенности, конфигурация при С-5 и С-17 и длина боковой цепи при С-17 [102, 103, 113], Попов [230] разработал методику фракционированного осаждения, пригодную для разделения различных классов стеринов, содержащихся в морских беспозвоночных, что облегчает их дальнейшее изучение комбини-рованым методом газовой хроматографии — масс-спектрометрии.

Для полноты картины следует кратко упомянуть о таких ранних методах, как, например, метод, основанный на окислении выделенного комплекса [270], количественный метод, основанный на ингибировании холестерином гемолиза красных кровяных телец, вызываемого дигитонином [166], и нефело-метрический метод определения холестерина в виде дигитонида [227]. С помощью автоанализатора «Техникой» [171] был автоматизирован турбидимет

страница 106
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189

Скачать книгу "Количественный анализ стероидов" (6.71Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
купить gowheel гироскутер
аренда авто с лицензией такси москва
[гибдд справка]
адам гонтьер россия тур 2017

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(29.07.2017)