вариант градиентного изменения (см. рис. 84, случай б) для разделения на силикагеле (подвижная фаза: метанол, ацетонитрил, лнхлорыетан и гексан), который выгодно отличается широкой применимостью и малой степенью расслоения подвижной фазы (некоторого расслоения все же можно ожидать, поскольку камера конструктивно напоминает сэндвич-камеру). Градиентное элюирование начинают, пользуясь полярной смесью, а заканчивают применением довольно неполярной. К относительным преимуществам метода программируемого многократного элюирования относятся следующие:

а) ширина зон веществ постоянна почти во всем интервале Кг(при постоянстве

концентраций);

б) при нанесении одного и того же количества образца в весьма

различающихся объемах получается одна и та же высота пика; поэтому

калибровку можно упростить, нанося увеличивающиеся объемы раствора

образца (при том же его количестве) и пренебрегая влиянием наносимых

объемов на ширину зон;

в) при программируемом многократном элюировании упрощаются все

требования, предъявляемые к способам нанесения; окончательно получаемые

пятна не отображают ни размер пятна на старте, ни его место на старте, ни

наносимый объем образца:

г) разрешающая способность за единицу времени для пары веществ со

средними величинами Rr, по-видимому, выше, чем при непрерывном

элюировании (при отсутствии градиента). Разделительное число при

использовании градиентного режима приближается к 30 (по сравнению с 10-20. характерными для обычного варианта ТСХ);

д) если используется градиентное изменение состава подвижной фазы, программируемое многократное элюирование позволяет перекрыть крайне широкий диапазон полярности разделяемых веществ (например, от сульфокислот до карбоновых кислот, неорганических нитратов, п-нитрофеиолоя. от амидов до яипофильной элементарной серы). Все зоны оказываются симметричными на той же самой пластинке с силихагелем (см. рис. 84). Анализ большинства из веществ этих классов обычно выполняют мстоном ВЭЖХ при разделениях на колонке с обращенной фазой. Таким образом, программируемое многократное элюирование представляется подходящим для поисковых исследований; оно не требует применения обременительных способов очистки и может быть особо рекомендовано для работы с образцами биологического происхождения.

К сожалению, нет достаточного количества экспериментальных данных для сопоставительной оценки этого многообещающего метода с другими аналогичными методами, такими как непрерывное элюирование или использование градиента потока (разделения на тонкослойной пластинке, сопровождающегося испарением), предложенного Нидервизером и Стюартом. Оказалась бы полезной и информация о виде графика разрешающей способности R. = f(zx,t).

Сопоставление методов многократного элюирования и непрерывного элюирования

Метод программ!фуемого элюирования не рассматривается

Преимущества многократного элюирования в тонкослойной

хроматографии: и) в перерывах между отработкой этапов можно оценить вид хроматограммы; быстро перемещающиеся вещества не выходят за пределы

поля (что случается при введении образца уже после начала элюирования); в) могут использоваться обычные камеры и сэндвич-камеры; не требуется применения специальных камер; г) если потребуется, последовательно могут быть использованы различные растворители.

Преимущества непрерывного элюирования; в отличие от ситуации, характерной для методов многократного элюирования, когда требуется промежуточная просушка, процесс элюирования не прерывается до завершения разделения; б) при необходимости предварительного кондиционирования слоя такая подготовка пластинки проводится лишь один раз, из-за чего работа упрощается и экономится время; в) теоретически предсказываемая максимальная разрешающая способность выше, чем в случае многократного элюирования (при тех же самых условиях); г) величина "Rr возрастает пропорционально времени и, в отличие о ситуации, характерной для многократного элюирования, отношение значений cRr остается