ачениям Rr)

Номер Номер системы

системы

2 3 4 5 6 7

1 0.903 0.917 0.898 0.902 0.917 0.925

2 0.866 0.875 0.876 0.912 0,921

3 0.900 0,899 0.928 0,929

4 0.763 0.871 0.915

5 0.878 0.916

6 0.927

Корреляционные коэффициенты для Rr, характеризующих пары

хроматограф»!ческнх систем z

1 0,007 0.256 0.027 0.000 0.277 -0,288

2 0,804 0,396 0.352 0.387 -0.462

3 0.502 0.465 0.449 -0.434

4 0.902 0.583 -0.226

5 0.596 -0.177

6 -0.525

22»

Абсолютной правильности в хро.матографическом анализе и в количественной оценке не удается достигнуть из-за существования хроматографического принципа неопределенности [267], что не учитывается многими исследователями. Согласно этому принципу;

никакой хромат ографнческий анализ не может гарантировать количественного определения конкретного химического соединения и гарантировать наличия в пробе только этого соединения. По результатам двух недавно проведенных статистических исследований вероятности перекрывания пиков в хроматограммах, получаемых при разделении более или менее неизвестных многокомпонентных образцов, можно прийти к выводу, что случаи слившихся пиков оказываются обескураживающе более частыми, чем можно было предполагать. Дэвис и Гиддиигс [125] подсчитали; хроматог рамма разделения сложной смеси должна характеризоваться отсутствием пиков на участке, занимающем (примерно) 95% от общей протяженности хроматограммы. для обеспечения 90%-й вероятности, что с пиком конкретного вещества не сливаются пики других компонентов образца. Число потенциально перекрывающихся зон почти линейно возрастает со снижением концентрации анализируемого вещества (рис. 79) [87]. Чаще всего довольно простые образцы подвергаются количественному анализу с помощью тонкослойной хроматографии. В такой ситуации вероятность перекрывания пиков оказывается сниженной (поскольку увеличивается пропорция "свободного места" на хроматограмме). Однако все еще остается возможным "загрязнение" интересующего пика.

Модель, предложенная М.Мартином [283], основана на предположении, что все зоны имеют равную ширину (что наблюдается при использовании градиентных методов), и дает результаты, поясняемые рис. 80.

О W2 10* 10е 10e10K10'2

10 1510 15 3D ШЛО Число компонентов В смеси

Рис. 79. Вероятность перекрывания пятен или пиков при анализе следовых количеств органических веществ.

Показаны три зоны

вероятности. Нвпример, при

концентрации в 10 ррЬ одна

и та же степень удерживания

может быть от 100 до 10000

веществ. Данные

заимствованы из публикации

Гиддингса [87]. На осп

абсцисс число веществ с

совпадающей степенью

удерживания; |воэрастающая вероятность; 2 - нереальный теоретический максимум.

231

Если неизвестная (по составу) смесь разделяется в хроматог рафичесхой системе, для которой разделительное число SN=50. а количество обнаруженных разделенных зон р = 10, сколь много веществ (в среднем) может такая смесь содержать? Или, иначе говоря, сколь много пиков не обнаруживается (из-за перекрытия зон)? Ответ оказывается следующим: с вероятностью в 21% можно утверждать, что смесь содержит 12 компонентов: с вероятностью в 2% можно утверждать, что в состав смеси входят 18 компонентов. При разделительном числе, равном всего 20, картина такая: вероятность, что 10 разделенным пиков соответствуюет 12 компонентам, падает до 1%; вероятность присутствия 18 компонентов возрастает до 6%, а вероятность наличия 35 компонентов все еще остается на уровне Преодолеть затруднения можно, обеспечив более высокую разрешающую способность (например, за счет применения тонкослойной хроматографии под высоким давлением) и работой со специфичными детекторами, но никогда не -стоит слепо доверяться интеграторам. Не представляется возможным обнаружение 5% примеси в преобладающем пике даже при степени хроматографнческого разделения для этих двух соединений, равной 0.5.

Непрерывное элюироваиис

Общие сведения. Как было показано выше, разделение ряда обнаруживаемых вещест