химический каталог




Основы учения об антибиотиках

Автор Н.С.Егоров

ьше, находим, что концентрация спор в исследуемой суспензии равна

500 мли/мл ; 12 Я; 42 млн/мл.

Соблюдение указанных основных правил постановки опыта при определении биологической активности антибиотиков методом диффузии в агар позволяет получить вполне сравнимые результаты.

Среди диффузионных методов определения биологической активности наиболее широкое применение нашли три метода, рассматриваемые ниже.

Метод с использованием металлических цилиндриков. На поверхность питательного агара в чашках Петрн или в специальных кюветах расставляют металлические цилиндрики (с внешним диаметром 8 мм, внутренним диаметром 6 мм и высотой 10 мм) из алюминия или нержавеющей стали. Как правило, питательный агар используют двухслойный: 1-й слой агара наливают из расчета 15 мл на одну чашку Петри (диаметр 9 см); 2-й слой агара, содержащий определенной плотности суспензию тест-организма, разливают иа, застывшую поверхность первого слоя агара по 5 мл

159

• ф • *

'?}<•••. - • • Яр- ш

Рис. 25. Определение ? антибиотической активности препаратов в кюветах с использованием лунок в толще агара

на чашку. На застывшую поверхность второго слоя агара по спе-1 ц'иальному трафарету расставляют предварительно простерилизо-1 ванные металлические цилиндрики (5—6 цилиндриков на чашку)']

В одни цилиндрики вносят испытуемый раствор антибиотика, другие — стандартный раствор того же антибиотика с известным числом мкг или единиц активности в 1 мл раствора. Обычно циЗ линдрики с испытуемым и стандартным растворами чередуют,! Затем чашки или кюветы помещают в термостат при температуре^ оптимальной для роста тест-органнзма на 20—24 ч, после чег измеряют диаметры зон задержки роста тест-микроба (рис. 23)Ц Расчет количества антибиотика в 1 мл раствора ведут или пО стандартной кривой, полученной на полулогарифмической сетке! или по таблицам Дмитриевой (1958).

Метод с применением лунок в толще агара. В толще агаровой пластинки делают лунки диаметром 8 мм, используя пробочно сверло соответствующего диаметра или специально сделанное приспособление, состоящее из резиновой груши, в которую встав-j ляют заостренную с одного конца металлическую трубочку с| внешним диаметром 8 мм (рис. 24). Блочки, надрезанные про*-бочным сверлом на всю глубину агаровой пластинки, удаляют с j помощью стерильного скальпеля или специального крючка. В одни лунки вносят раствор испытуемого антибиотика, а в другие—,| стандартный раствор антибиотика (рис. 25).

Метод лунок имеет некоторые преимущества по сравнению С| первым методом (нет необходимости в очистке и стерилизация! цилиндриков). При использовании цилиндриков, сделанных язи алюминия, иногда может происходить взаимодействие кислых| антибиотиков с металлом, что приводит к частичной или полной!

160 инактивации препарата. При работе с лунками это полностью исключено.

При работе с цилиндриками возможно (особенно у начинающих исследователей) подтекание раствора антибиотика из-под неправильно поставленных цилиндриков, что приводит к образованию расплывчатых зон неправильной формы. Метод лунок не дает подобных эффектов.

Метод использования дисков фильтровальной бумаги. На поверхность питательного агара, засеянного тест-организмом, помещают диски фильтровальной бумаги, пропитанные испытуемым раствором антибиотика. В качестве стандарта используют диски, смоченные раствором антибиотика известной концентрации, или специально приготовленные диски, содержащие уже известное количество антибиотиков. Дальнейшие операции проводят так же, как и при работе с применением лунок в толще агара.

В некоторых случаях при использовании бумажных дисков получаются зоны неправильной формы. Это связано с тем, что в данном случае диск фильтровальной бумаги оказывается хромато-граммой изучаемого антибиотика и препарат концентрируется в одном участке диска.

161

Турбидиметрические методы. Широкое распространение в практике количественного определения антибиотиков нашли турбидиметрические методы, в основу которых положена логарифмическая зависимость степени угнетения роста тест-организма от концентрации антибиотика. Метод основан на измерении концентрации клеток тест-микроба, образующих определенную оптиче6—742 скую плотность среды (мутность) в результате роста в присутст-3 вин небольших количеств антибиотика. В присутствии небольших количеств антибиотика не происходит полного подавления роста! тест-микроба, а лишь задержка темпа их роста, что и сказывается! на оптической плотности бульона.

Турбидиметрические методы определения антибиотиков обыч-1 но неприемлемы для плотно окрашенных растворов. Но, учитывая! высокую чувствительность этих методов, применяются довольно! большие разведения исследуемых жидкостей, что приводит к] значительному снижению концентрации пигментных веществ, мешающих проведению анализа; в ряде случаев можно использовать! турбидиметрический метод и для окрашенных растворов. Оптическую плотность жидкостей определяют с помощью фотоэлектро-J калориметра (ФЭК) или обычного турбид

страница 60
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165

Скачать книгу "Основы учения об антибиотиках" (6.31Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
http://taxiru.ru/shashki-dlya-taxi-all/
ноутбуки Паккард Белл
решетка вр-н
проекционные экраны на прокат

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(24.09.2017)