химический каталог




Основы учения об антибиотиках

Автор Н.С.Егоров

разведения, но и в весовых или стандартных единицах. Для этой цели титрование (разведение) должно проводиться стандартным раствором данного антибиотика, имеющего известную активность, выраженную в мкг/мг или в ед/мг препарата.

Например, необходимо определить концентрацию стрептомицина, содержащуюся в культуральной жидкости Str. griseus. Делают ряд разведений культуральной жидкости, освобожденной от мицелия, а параллельно таким же способом делают разведение стандартного раствора стрептомицина, содержащего, например, 10 мкг/мл.

Разведение испытуемой жидкости и разведение стандартного раствора антибиотика необходимо проводить в бульоне с фосфатным буфером при рН 7,8—8,0.

Пример расчета приведен в табл. 38.

Таблица 33

Примечание. Знак *

Определение концентрации стрептомицина методом последовательных разведений .

Номер пробирки

Объект

исследования 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 и 12

Разведение . . . 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:256 1:512 1:1024 1:2048 1:4096

Стандарт

(10 мкг/мл) . . + + + + + +

Испытуемый мате- + +

отсутствие роста тесг-мнкроба; знак e-f-» — наличие роста.

В данном случае (табл. 38) 10 мкг/мл стрептомицина подави ляют развитие тест-культуры в наибольшем разведении, соответ*

154

155

ствующем 5-й пробирке. Следовательно, 5 мкг/мл вызвали бы по давление роста микроба только в 4-й пробирке, но не в 5-й, 20, мкг/мл задержат рост в 6-й пробирке, 40 мкг/мл—в 7-80 мкг/мл —в 8-й; 160 мкг/мл — в 9-й; 320 мкг/мл — в 10-й,про| бирке и т. д.

. Сравнивая эти величины, устанавливают, что испытуемый рас| твор, задерживающий развитие тест-организма в 10-й пробирку (разведение 1 : 1024), содержит 320 мкг/мл стрептомицина.

Расчет антибиотической активности испытуемого раствора при работе по методу последовательных разведений при наличии стан| дарта можно производить по следующей формуле:

X = Ри : Рс - С,

где Ри — максимальная степень разведения испытуемого раство! ра, при которой отсутствует рост тест-организма; Рс — максималь-J ная степень разведения стандартного раствора, обеспечивающа!, отсутствие роста тест-микроба; С—исходная концентрация стан| дартного раствора антибиотика; X— искомая концентрация антп<| биотика в исследуемом растворе.

,В нашем примере Ри=1024; Рс=32; С=10 мкг/мл; искомая концентрации антибиотика

X = 1024 : 32 • 10 = 320 мкг/мл.

? Метод последовательных разведений может дать сопоставимы^ результаты лишь при соблюдении определенных условий, а именно

• 1. Тщательная стерильность проведения анализов.

2. Использование постоянных сред для разведения одного ито| го.же антибиотика.

? 3. Внесение определенного количества клеток или спор тест-ор1| ганпзма.

4. Определенная длительность инкубации пробирок, засеянных тест-культурой.

Иногда под действием испытуемого антибиотика возникают ус-1 тойчивые к нему формы тест-мнкроба. Появление даже единичны*] резистентных клеток, которые могут дать затем развитие, приве-Г дет к ошибочным результатам прн определении биологической ак»| тивности препарата. .

Чтобы избежать подобного явления, для разведений использу-1 ют не бульон, а агаризованные среды, разлитые в пробирки. После, проведения процесса разведения пробирки размещают в наклонном* положении, с тем чтобы получить косячки застывшего агара. На по| верхность скошенного агара микробиологической петлей высеваю! суспензию тест-микроба. После этого пробирки помещают в термо! стат на 24 ч при температуре, оптимальной для развития тест-орч ганизма. Расчет активности ведут тем же способом, что и при раз1! ведении антибиотика (культуральной жидкости) в жидкой средеЯ Появление одиночных колоний, образовавшихся из резистентны:! форм, в расчет не принимается. . Определение антибиотической активности методом серийные разведений можно производить и на чашках Петри. В пробирки, содержащие по 9 мл расплавленного питательного агара, вносят по 1 мл определенного разведения изучаемого антибиотика или культуральной жидкости. После тщательного перемешивания содержимое пробирки выливают в чашку Петри и дают агару застыть. Затем по поверхности пластинки штрихами производят посев тест-организмов. Чашки выдерживают в термостате прн оптимальной для используемых тест-организмов температуре в течение 20—21 ч.

Преимущество этого метода по сравнению с пробирочным методом разведения состоит в том, что в данном случае каждое разведение изучаемого препарата может быть использовано для многих тест-организмов.

Диффузионные методы. Количественное определение антибиотиков диффузионными методами основано на способности антибиотических веществ диффундировать в агаровых средах и образовывать зоны, в которых не развиваются используемые тест-организмы.

Величина зоны диффузии антибиотика зависит прежде всего от химической природы антибиотического вещества и его концентрации, состава агаровой среды, ее рН, температуры и других факторов, которые необходимо учитывать при проведении анализов.

Антибиотики-полипе

страница 58
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165

Скачать книгу "Основы учения об антибиотиках" (6.31Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
Купить дом в поселке Новодарьино с 4 спальнями
подарочный сертифекат
вентилятор вк100
свисток для учителя физкультуры купить

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(16.12.2017)