химический каталог




Основы учения об антибиотиках

Автор Н.С.Егоров

ивания клеток в пробирках. Количество среды в каждой пробирке равняется 2 мл. Оптимальная концентрация опухолевых клеток составляет 3-106— 5-Ю6 в 1 мл среды. При этих условиях через 48 ч инкубации при 36,5°С в пробирках без перемешивания происходит увеличение числа клеток в 1,5—2 раза. Размножение клеток в культуре учитывается подсчетом в камере Горяева.

Если исследуемый препарат тормозит развитие и размножение клеток асцита, то это указывает на его антиопухолевое действие.

Применение этого метода позволяет производить первичный отбор противоопухолевых антибиотиков на стадии культуральной жидкости, осуществлять выделение и химическую очистку отобранных антибиотиков. Причем удается обнаружить и выделить противоопухолевые антибиотики, не обладающие подавляющим действием в отношении обычных тест-организмов, биохимического мутанта стафилококка и не действующие на дегидразную активность опухолевых клеток лимфолимы.

МЕТОДЫ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИБИОТИКОВ

Количественное определение антибиотиков в культуральных жидкостях, готовых препаратах или в разнообразных растворах осуществляют различными методами: биологическими, химическими и физико-химическими. Наиболее распространены биологические методы; они не требуют специального дорогостоящего оборудования и дают довольно точные результаты.

153

БИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ

Биологические методы количественного определения антибиа тиков нашли широкое применение на практике. Они основаны н| непосредственном биологическом действии антибиотика на исполь зуемый тест-организм, чувствительный к данному препарату, а па . этому считаются наиболее объективными.

Омелянский еще в 1906 г. указывал на преимущества биологи,

ческих методов при количественном учете разных веществ. Онпв

сал: «В лице бактерий химия приобретает новый и поистине иеис;

черпаемый источник разнообразнейших реактивов, во много ра

более точных и более специализированных, чем те, какими распо

лагала эта наука до сих пор». .

Однако биологические методы определения антибиотиков име ют и недостатки: длительность проведения анализов, зависимост точности результатов от многих внешних факторов и т. п. Точноет! биологических методов обычно составляет ±10%.

Наиболее широкое распространение среди биологических метей дов количественного определения антибиотиков получили метод последовательных разведений, диффузионный и турбидиметриче ский методы.

Метод последовательных разведений. Метод используется дл| определения количества антибиотика в культуральных жидкости растворах или в экстрактах. Для работы подготавливают питатель| ный бульон, пригодный для развития выбранного тест-организма Непременное условие — бульон должен быть прозрачным. Одно временно с этим подготавливают и культуру тест-организма. Сте| рильный питательный бульон разливают в чистые стерильные про бирки; количество бульона должно обеспечивать нужную степени разведения изучаемого антибиотика.

В тех случаях, когда антибиотик обладает высокой биологиче| ской активностью и в испытуемом растворе содержится в большом количестве, необходимо подготовить ряд пробирок с питательны^ бульоном таким образом, чтобы обеспечивалось получение отно сительно большого разведения. Например, в две пробирки внося| по 9 мл бульона в каждую. В первую пробирку вносят 1 мл испь туемого раствора антибиотика (разведение 1 : 10), тщательно пе| ремешивают и 1 мл смеси переносят во вторую пробирку (разведед нне 1 : 100). Затем 1 мл раствора разведения 1 : 100 смешивают 1, 2, 3, 4) 5, 6 и 7 мл бульона — получают разведения 1 : 200, 1 : 30 1 : 400, 1 :500, 1:600; 1 : 700 и 1 : 800. Для дальнейшего увеличе| ния разведения испытуемого антибиотика, последовательно отли| чающегося на 100, берут 0,5 мл раствора с разведением 1 : 1С смешивают с 4; 4,5;.5 и 5,5 мл бульона и получают разведени* 1 : 900; I : 1000; 1: 1100 и 1 : 1200. При желании можно данный ря разведения увеличить до необходимого значения. Иногда использу| ют и другие ряды разведений, например 1 : 10, 1 : 20, 1 :40, 1 :Г 1 : 160 и т. д. или 1 : 2, 1 :4, 1 :8, 1 :16; 1 :32 и т. д.

В полученном ряду разведений антибиотического вещества

каждую пробирку вносят определенное количество клеток тест-микроба. Затем пробирки помещают в термостат на 20—24 ч при температуре, оптимальной для роста тест-микроба. После этого в пробирках определяется наличие пли отсутствие роста тест-организма.

Допустим, что в нашем случае развитие организма начинается при разведении 1 : 1100 и далее, а во всех предыдущих разведениях, кончая 1 :1000, рост тест-микроба отсутствует. Это означает, что в испытуемом растворе содержится 1000 ед. разведения антибиотика. Или для более точного расчета берут среднее значение максимального разведения, при котором отсутствует развитие тест-организма, и минимальное разведение, при котором начинается развитие.

В данном случае это будет (1000+1100) : 2=1050 ед. разведения.

Методом последовательных разведений можно определить количество антибиотика не только в условных единицах

страница 57
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165

Скачать книгу "Основы учения об антибиотиках" (6.31Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
дешевые бутсы с носком
встраиваемые колонки в стену
арби модена 95
новогоднее представление особенный день

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(05.12.2016)