химический каталог




Основы учения об антибиотиках

Автор Н.С.Егоров

ое вещество подавляет развитие как фага, так и бактерии. Последнее легко проверить, если в качестве тест-организма взять только бактерию.

Противовирусным действием обладает ряд антибиотических веществ (эрлихин, луридин, фумагиллин, гелиомицин, вирусин и др.).

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПРОТИВОРАКОВОГО ДЕЙСТВИЯ АНТИБИОТИКОВ

Не всегда антираковое действие препарата совпадает с антибактериальным или антигрибным действием. Поэтому для определения противораковой активности культуральных жидкостей или очищенных препаратов в качестве тест-объектов используют нёпо-средственнб раковые клетки. С этой целью применяют методы, основанные на использовании экспериментальных животных, куль-Туры тканей или свободноплавающих в отдельных полостях организма опухолевых клеток (асцитные клетки), но окончательная

149 оценка антнопухолевого действия испытуемого, вещества проводвд]

ся в опытах на животных. ? ;

. Методы с использованием экспериментальных животных. В ка| честве тест-объекта используются клетки асцнтного рака Эрлнха мышей (клетки находятся в впде взвеси в асцитнческой жидкост^ животных). Взвесь асцптных раковых клеток смешивается с рае иым объемом изучаемого антибиотического препарата и смесь по| мещается в рефрижератор при 4°С на четыре часа, после чего et| прививают мышам (подкожно).

Для контрольных животных вместо исследуемого препарата ис| пользуется физиологический раствор. Через 10 дней мышей уби вают и определяют наличие опухолей и их размеры. Если изучае| мый препарат убивает асцптные раковые клетки, то они, естест<1 венно, не дадут образования опухолей.

Тест-объектом могут служить не только клетки асцитного, рака; Эрлиха, но и других опухолей, полученных экспериментальны* путем у мышей и крыс. Использование клеток различных опухолеЦ связано с необходимостью более шпрокого изучения противоопухр левого действия исследуемых препаратов, для более точного onpej деления значения изучаемой культуральной жидкости или антцбио| тика в отношении их действия на раковые клетки.

Прежде чем использовать опухоль в качестве тест-материала! необходимо из опухолевых тканей получить тонкую взвесь. СэтрС целью применяется следующий метод.

В стерильных условиях вылущивают опухоль, тщательно .очиJ щают от некротических участков и несколько раз промывают, сте| рильным физиологическим раствором. После этого отобранные чашки Петри кусочки опухоли измельчают ножницами до полу*| чения гомогенной кашицы и разводят примерно в 2 раза стериль-1 ным физиологическим раствором. После тщательного размешнва-1 ния взвесь фильтруют через 2 слоя стерильной марли. Затем опрен| деляют количество опухолевых частиц, содержащихся в 1 мм3 взвеси (подсчет проводят в камере Горяева). Если при подсчете оказы-j вается, что количество частиц в 1 мм3 незначительно, то получен-! ную взвесь концентрируют методом центрифугирования. Надоса-j дочную жидкость отсасывают, а опухолевые клетки, осевшие на| дно пробирки, разводят нужным объемом стерильного физиологии ческого раствора.

В дальнейшем постановка опыта со взвесью опухолевых кле-Ш ток, приготовленной из опухоли животных, такая же, как и с клет-г ками асцнтного рака Эрлнха. Различие лишь в некотором удли-1 нении срока наблюдения (до 12 дней). В опыте с клетками аоцнт-| иого рака Эрлнха наблюдение ведут в течение 10 дней.

Чашечный метод. Разработан чашечный метод определения дей-1 етвия изучаемых антибиотических препаратов на раковые кдетки.1

Тест-объектом служат клетки асцитного рака, которые смешна ваются с теплой агаровой средой (пептон, глюкоза, плазма крови)! и разливаются в чашки Петри. На застывшую агаровую пластин-'] •ту, содержащую клетки асцитного рака, накладывают агаровые

150 блочки с выросшей культурой микроорганизма или диски фильтровальной бумаги, предварительно смоченные культуральной жидкостью или раствором очищенного препарата. Чашки помещают в холодильник на несколько часов для диффузии изучаемых веществ в толщу агара, содержащего асцитные раковые клетки (2-107 клеток в 1 мл). После этого чашки помещают в термостат при 37°С на несколько часов и затем, вынув их из термостата, освобождают от агаровых блочков или дисков фильтровальной бумаги. Поверхность агаровых пластинок заливают 0,05%-ным раствором метиле-нового синего. Чашки покрывают стеклянными пластинками ненова помещают в термостат на несколько часов. При отсутствии действия антибиотика на раковые клетки асцитного рака вся поверхность агаровой пластинки будет бесцветной. Если же изучаемые препараты убивают клетки асцитного рака, то на месте агаровых блочков или дисков фильтровальной бумаги появятся голубые зоны. Свойство обесцвечивать метиленовый синий, т. е. превращать его в лейкосоединение, связано с выделением живыми асцитными клетками ферментов дегидраз. Убитые клетки не выделяют дегид-разы и метиловый синий не обесцвечивается.

Следует отметить, что дегидразная активность раковых клеток может обнаруживаться не только с помощью метиленового синего, но и с помощью ряда других веществ, например 2,6-дихлорфе-нолинд

страница 55
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165

Скачать книгу "Основы учения об антибиотиках" (6.31Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
прокат лазерных проекторов
Фирма Ренессанс: лестницы на второй этаж модульные - цена ниже, качество выше!
кресло 593
Супермаркет техники KNSneva.ru предлагает игровой неттоп купить - офис в Санкт-Петербурге, ул. Рузовская, д.11, КНС Нева.

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(09.12.2016)