химический каталог




Аминокислоты, пептиды и белки

Автор Т.Дэвени, Я.Гергей

) фракции, а затем выделяют совершенно гомогенную белковую фракцию (фиг. 43). В комплект входят колонки размером 3,2x105 и 3,2x65 см. С помощью перистальтического насоса можно устанавливать скорость протекания раствора от самой малой до 80 мл/ч.

Рекомендуемая литература

Determan #., Gel Chromatography, Springer Verlag, Berlin, Heidelberg, New-York, 1968. (Г. Детермаи, Гель-хроматография, изд-во «Мир», М., 1970.>

Leach S. /., Physical Principles and Techniques of Protein Chemistry, Academic Press, New York, London, 1969.

Williams C. A., Chase M. Methods in Immunology and Immunochemistry,. Vol. II, Academic Press, New York, London, 1968.

ТОНКОСЛОЙНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ

(Д. А. МЕДЬЕШИ)

Смеси можно хроматографировать не только на колонках пористого геля, но и в однородном тонком слое адсорбента. Тонкослойная хроматография получила широкое распространение в современной лабораторной практике начиная с 1956—1958 гг. после того, как Сталь [16] описал простую стандартную методику приготовления тонкого слоя адсорбента.

В тонком слое адсорбента, главным образом силикагеля или окиси алюминия, можно проводить микроанализ смеси липофильных веществ так же просто, как и хроматографией на бумаге. Область применения этого метода быстро расширялась, и в настоящее время с его помощью проводят анализ гидрофильных соединений, которые можно фракционировать и на бумаге, но тонкослойная хроматография на порядок .чувствительнее и проходит значительно быстрее.

Для приготовления слоя готовят густую водную суспензию адсорбента и наносят ее на пластинку из стекла, пластмассы или алюминиевой фольги. В продаже имеется специальный прибор для нанесения слоев адсорбента строго воспроизводимой толщины (фирмы Desaga и Camag). В прибор любой конструкции входит лоток, заполняемый гелем, один край которого (наносящий край) установлен на соответствующем расстоянии от стеклянной пластинки. Изменяя это расстояние, можно наносить слои адсорбента различной толщины. При движении пластинки относительно лотка (в приборе фирмы Desaga) или лотка относительно пластинки (в приборе фирмы Camag) тщательно отшлифованная поверхность стекла покрывается ровным слоем влажного адсорбента (фиг. 44). Существует два типа данных приборов — с ручным и механическим управлением передвижения пластинки. В приборе венгерской фирмы Labor стеклянная пластинка скользит под давлением водопроводной воды.

После нанесения слоя адсорбента пластинки высушивают на воздухе и далее обрабатывают согласно выбранной методике (например, прогревают при 60—120° С, «активируют» и т. д.). Прогретые пластинки можно хранить в эксикаторе.

Исследуемый препарат наносят на пластинку микропипеткой в одну точку или по линии. Линия получается при нанесении ряда

Фиг. 'И. 11| иГ-ор Для lumrci кия с.-.ия ? IUC и ve.'. я плачи г hi: Д:.51 ТОНКОСЛОЙНОЙ хроматографии,

точек млн*с помощью имеющегося в продаже специального шприца, В довольно широких пределах количество наносимого материала не влияет на миграцию разделяемых веществ. Однако» если на пластинку нанести слишком много материала» возможна деформация пятен,. Пределы разрешения и оптимальное количество наносимого препа--рата в каждом конкретном случае варьируют в зависимости от свойств адсорбента и фракционируемой смеси.

Обычно проводят восходящую тонкослойную хроматографию» используя для этого стеклянные хроматографические камеры с крышками» обеспечивающими герметичность, Растворитель наливают на

Л Б

Фиг. 45. Хроматографическая камера и ее насыщение парами растворитг-ли.

А. Камера с жилкой фазой, налитой на" дно. Б, Камера, стенки которой выстланы фильтровальной Пумагой. «моченной жидкой фазой, дли создания равномерно насыщенной па' рамп растиорнтоля а'^хи'.ферм. I — пластинка i'. нанесенным слоем адсорбента; 2 — пары растворителя; 3—смоченная р а с*г по ригелем фильтровальная бумага; 4 — многокомпонентный растворитель.

дно такой камеры и погружают в него нижний край хроматографй-ческой пластинки (фиг. 45). При тонкослойной хроматографии приходится учитывать особенность, не встречающуюся при хроматографии на колонке, — испарение растворителя с поверхности слоя, в результате которого увеличивается время миграции данного вещества. Из растворителя, имеющего сложный состав, в первую очередь испаряются наиболее летучие компоненты, что ведет к из\ У

I J

Фиг. 46. Схема горизонтальной хроматографнческой камеры Бреннера и

Нидервизера (BN-камера).

/--покровная пластинка; 2—фитиль из фильтровальной бумаги, подающий растворитель на слой адсорбента; 3— пластинка, используемая в качестве подложки для слоя адсорбента; 4 — резервуар для растворителя; 5 — поддерживающий камеру корковый

круг; 6 — пружинный зажим,

менению исходного соотношения компонентов смеси. Интенсивность испарения снижается в направлении от краев к центру пластинки, поэтому происходит искривление фронта растворителя, и в результате величина Kf на краях хроматограммы будет больше, чем в центре. Испарение растворителя при тонкослойной хроматографии

страница 95
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148

Скачать книгу "Аминокислоты, пептиды и белки" (2.92Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
курсы макияжа для себя в москве недорого
операция по выравниванию носовой перегородки цена
что такое мобаил
учебные курсы на парикмахнра

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(09.12.2016)