химический каталог




Аминокислоты, пептиды и белки

Автор Т.Дэвени, Я.Гергей

нанесения.

Примечания. Физиологические жидкости — сыворотка, моча и др. — содержат как моноаминодикарбоновые кислоты, так и их амиды (аспарагин и глутамин).. Их разделение требует специальных методов, обзор которых сделан Бенсоном и др. II].

При исследовании любого материала (белкового гидролизата, физиологической жидкости, синтетического материала и др.) количество анализируемого образца в среднем должно быть 0,25— 0,35 мкмоля (при длине кюветы 6,6 мм), причем нижний предел — не ниже 0,1 мкмоля, а верхний — не выше 1,0 мкмоля. Если анализатор снабжен микроспектрофотометром, то можно брать для анализа 0,05—0,075 мкмоля, а нижний и верхний пределы будут 0,001 и 0,3 мкмоля соответственно..

7. Нанесение образца. Образец можно нанести на колонку либо вручную, либо автоматически. К автоматическим устройствам

для нанесения образца обычно прикладываются подробные инструкции, поэтому мы не будем здесь рассматривать автоматический способ нанесения.

Анализируемое вещество растворяют в упомянутом выше буферном растворе для нанесения, имеющем оптимальный для связывания рН. Объем образца можно варьировать, однако нанесение слишком больших объемов занимает много времени. Оптимальным, пожалуй, является объем от 0,1 до 0,5 мл. Раствор над смолой удаляют и образец вводят соответствующей пипеткой с помощью сжатого азота. Остатки наносимого образца трижды смывают со стенок колонки стартовым раствором круговыми движениями пипетки.

8. Программирование. Программирование анализа, т. е.

выбор соответствующего аналитического метода, зависит от конкретной задачи. Если в лаборатории определенного профиля обычно

проводят однотипные исследования, например анализы гидролизатов или физиологических жидкостей, рекомендуется ограничиться использованием какого-либо одного оптимального метода. Литература по автоматическому аминокислотному анализу очень

обширна, к настоящему времени описано значительное число различных методик. Не имеет смысла перечислять все эти методики,

поэтому ниже будут приведены лишь те, которые по нашему мнению наиболее удобны (фиг. 36 и 37).

Общий анализ гидролизатов одноколоночным двухбуферным методом [2]

Высота столбика смолы в колонке Буферный раствор 1 Буферный раствор 2

Скорость протекания буферного раствора Скорость протекания нингидрина Время замены буферного раствора Общая продолжительность анализа Давление буферного раствора при 55°С

55 см А

Г или Д 100 мл/ч 50 мл/ч 90 мин 240 мин 18—25 атм

Примечания. После элюирования аргинина колонку можно регенерировать без обработки щелочью, пропуская раствор А. Щелочная обработка необходи* ма лишь после каждых 15 анализов.

Общий анализ гидролизатов белков одноколоночным трехбуферным

методом [3]

Высота столбика смолы в колонке

Буферный раствор 1 Буферный раствор 2 Буферный раствор 3

Первая смена буферного раствора Вторая смена буферного раствора

55 см А

Д Е

90 мин

На восходящей части пика

аммиака

+

1 с F lb a* J , to Apz-

s ! it

? 4 —

w \ -j)

;i й > mm 1 <\ J Щ I N i \ < I \

1 1 1 буферный растВор 1 \ 1

ьерный раствор В 1 1 1

оный раствор В

А

Бу<ре

i с

?: S

1

Асп 1 к г ч: Арг |

?Иле ". Й 1 ю X 2

э о ? ;'' г- ?????Алло-

.J : Hi' С

j: > ' , V v.

О 10 20 30 40 50 ВО 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170

Минуты Б

Фиг. 36. Количественное определение аминокислот на одной колонке. А. Двухбуферная система. Б. Трехбуфериая система.

й

Мет

А Л 13 Ban ? ft

V, И/ е

* • v ?

A г Вал И.

Л' :

?i J •. Л

V И Л

• 'А NH3 . ? Гас Мет

А ? '.Is- ; Л/с V v

us 1,0

0,9 0,8

0,7 0,6

0,5 0,4

Три

0,3

Арг

Ар

О 4 8 12 16

1 Минуты

4 8 12 16 20.24 2

Фиг. 37. Хроматограммы, полученные при быстром программированном анализе аминокислот.

Л. Определение Мет н Лнз. / — смесь, используемая для калибровки, содержащая 4-кратный избыток Мет и Лнз; 2 — кислотный гидролизат семян растений.

Б, Определение Трк. / — смесь, используемая для калибровки, не содержащая Трн; 2 —

смесь, используемая для калибровки, содержащая 1 мк моль Три.

Скорость протекания буферного раствора Скорость протекания нингидрина Продолжительн

страница 74
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148

Скачать книгу "Аминокислоты, пептиды и белки" (2.92Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
курсы обучение на холодильщика в астрахани
лечение пахово-мошоночной грыжи
КНС Нева рекомендует персональный компьютер - 10 лет надежной работы! Санкт Петербург, ул. Рузовская, д.11.
складная рамка номера на мотоцикл

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(07.12.2016)