химический каталог




Аминокислоты, пептиды и белки

Автор Т.Дэвени, Я.Гергей

татов:

а) Легкое искривление преципитационной полосы между лунками

наблюдается в том случае, если иммунная сыворотка, заполняющая какую-либо лунку, содержит антитела (анти-А) к антигену (А),

заполняющему одну из двух других лунок (фиг. 24,/).

б) Полосы преципитации переходят одна в другую, если в двух

верхних лунках содержатся одинаковые белковые антигены (А),

а диффундирующая из нижней лунки антисыворотка содержит специфические (анти-А) антитела. Эта картина демонстрирует идентичность антигенов (фиг. 24,2).

в) Частичное слияние полос преципитации (образование шпоры) происходит в том случае, если образцы, заполняющие две верхние лунки, состоят из двух антигенных компонентов, один из которых является общим (Аху и Ау), а иммунная сыворотка содержит антитела, специфичные к обоим антигенным компонентам (анти-Ах и анти-Ау). Это картина антигенной общности (фиг. 2А,3). Форма и длина шпоры, образующейся в месте частичного слияния полос преципитации, зависят от степени антигенной общности исследуемых образцов. При тесной близости антигенов, т. е. если они имеют много идентичных детерминант, образуется короткая и прилегающая к сливающимся полосам шпора. Если сравниваемые антигены имеют мало идентичных дегерминантных групп, то образуется длинная шпора, круто отходящая от сливающихся полос преципитации.

г) Полосы преципитации пересекаются, если обе верхние лунки

заполнены растворами разных антигенов (антигенами А и Б),

а в третьей лунке находится иммунная сыворотка, содержащая антитела к обоим антигенам (анти-А и анти-Б). Это картина

различия антигенов (фиг. 24, 4).

д) Если верхние лунки содержат две разные смеси антигенов

(А -{-- Б и Б + В), а иммунная сыворотка, заполняющая третью

лунку, содержит антитела к каждому антигенному компоненту этих

смесей (анти-А, анти-Б и анти-В), образуется несколько полос преципитации; при этом можно наблюдать картину как идентичности, так и различия антигенов (фиг. 24,5).

е) Закономерности, о которых сообщается в пунктах примечаний а—д, справедливы лишь для равновесных систем с примерно равными концентрациями антигенов в разных лунках. При значительных различиях этих концентраций, т. е. в неуравновешенных

Фиг. 25. Схемы расположения луиок в агаровом геле.

системах, происходит асимметричное слияние полос преципитации; преципитат образуется дальше от лунки, содержащей более концентрированный раствор антигена, и ближе к лунке, наполненной менее концентрированным раствором антигена. При слишком больших различиях в концентрациях антигенов могут вообще образоваться двойные полосы преципитации или ложные шпоры. В отличие от истинных шпор, указывающих на частичное антигенное сходство, ложные шпоры не становятся более заметными в ходе инкубации, а, наоборот, постепенно теряют четкость и в конце концов исчезают.

3. Число полос преципитации, появляющихся в агаре при использовании этого метода, соответствует минимальному числу отдельных систем антиген — антитело, принимающих участие в реакции.

4. Расположение и кривизна полос преципитации зависят также от молекулярных весов реагирующих белков. Если молекулярный вес антигена меньше молекулярного веса антител, то полоса преципитации изгибается в сторону лунки, заполненной иммунной сывороткой. Если же молекулярный вес антигена больше молекулярного веса антител, то полоса преципитации сдвигается и изгибается в сторону лунки, заполненной антигеном.

5. При работе с низкоконцентрированными растворами антигена случается, что однократного заполнения лунки недостаточно для появления полосы преципитации, но повторно внести раствор антигена можно только после того, как лунка полностью опустошится. Следует помнить, что повторное заполнение может стать причиной образования двойной полосы преципитации.

6. В зависимости от количества анализируемых образцов число и схема расположения лунок в агаровой пластинке могут варьировать. На фиг. 25 представлено несколько часто используемых схем

расположения лунок. Лунки в агаровом геле можно сделать так, как описано выше (стр. 131), или с помощью специального приспособления.

7. Предварительный анализ исследуемых образцов можно легко

и быстро провести в слое агара на стеклянной пластинке, разместив

лунки на расстоянии 3—5 мм одна от другой в два параллельных

ряда. Благодаря небольшому расстоянию между лунками, заполненными антигеном и иммунной сывороткой, полосы преципитации

должны появляться весьма быстро. Подобным образом можно также проводить предварительное титрование растворов антигена или

иммунной сыворотки, заполнив ряды лунок реагентами в соответствующих разведениях.

Другой способ состоит в том, что в слое агара на пластинке вырезают полоску шириной 1 мм на расстоянии 3—5 мм отряда лунок; в образовавшийся желобок вносят иммунную сыворотку, а в лунки — раствор антигена.

8. Результаты реакции можно регистрировать фотографированием либо нативного препарата, либо окрашенных полос

преципитации.

А. Непосредственная фотопечать с агаровой пластинки. После об

страница 56
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148

Скачать книгу "Аминокислоты, пептиды и белки" (2.92Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
вешалка colorado купить
бухгалтерский шкаф шб-8
решетка для матраса 140
урна для мусора уличная купить

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(23.05.2017)