химический каталог




Аминокислоты, пептиды и белки

Автор Т.Дэвени, Я.Гергей

8).

28. Swahn В., Scand. J. Clin. Lab. Invest., 4, 98 (1952).

29. Uriel J., Scheidegger J. J., Bull. Soc. Chim. Biol., 37, 165 (1955).

Рекомендуемая литература

Bailey J. L.f Techniques in Protein Chemistry, Elsevier Publishing Company, Amsterdam, London, New York, 1967. (Имеется перевод 1-го изд.: Дж. Бейли, Методы химии белков, изд-во «Мир», М., 1965.)

Gordon Н., Electrophoresis of Proteins in Polyacrylamide and Starch Gels North Holland Publ. Co., Amsterdam, London, 1969.

Leach S. J. ed., Physical Principles and Techniques of Protein Chemistry, Part A, Academic Press, New York and London, 1969.

Smith I., Chromatographic and Electrophoretic Techniques, Heinemann, London, 1969.

Wieme R. J., Agar Gel Electrophoresis, Elsevier Publ. Co., Amsterdam, 1965. Williams C. A., Chase M. W., Methods in Immunology and Immunochemistry, Vol. II, Academic Press, New York, London, 1968.

Wunderly C, in: P. Alexander and P. J. Block, A Laboratory Manual of Analytical Methods of Protein Chemistry, Yol. 2, Pergamon Press, Oxford, I960. (Вундерли X., в кн. Аналитические методы белковой химии, ИЛ,

М., 1963, стр. 151, 167.)

Глава III

МЕТОДЫ СРЕДНЕ- И ВЫСОКОВОЛЬТНОГО

ЭЛЕКТРОФОРЕЗА

М. ШАЙГО

Электрофорез на бумаге весьма часто применяют для разделения пептидов и качественного анализа аминокислот. Принцип, по которому классифицируются аппараты для электрофореза, обычно учитывает либо используемое напряжение, либо расположение листа бумаги в пространстве.

Аппаратом для средневольтного электрофореза называют прибор, обеспечивающий градиент напряжения от 20 до 40 В/см. К достоинствам таких приборов относится сравнительно умеренное теплообразование при электрофорезе. Даже если камера изготовлена из плохо проводящего тепло плексигласа, при электрофорезе данного типа можно обойтись простым водяным охлаждением. В то же время плексиглас настолько легко обрабатывается, что одну из существенных деталей прибора, а именно, охлаждающую плиту (см. ниже), можно изготовить в любой хорошо оснащенной подсобной мастерской.

Аппараты для высоковольтного электрофореза обеспечивают градиент напряжения от 50 до 100 В/см. В них специальное охлаждение становится обязательным. В горизонтальных камерах оно осуществляется с помощью металлической охлаждающей плиты, а в вертикальных — с помощью эффективного контакта с органическими растворителями.

Однако в ряде случаев, чтобы добиться необходимого разделения в аппаратах для средневольтного электрофореза, требуется значительно увеличивать продолжительность опыта. Этот недостаток в известной мере обесценивает ту легкость, с которой эти приборы можно изготовить даже в самой простой мастерской. С увеличением продолжительности электрофореза возрастает эффект диффузии, и границы зон теряют свою четкость. В то же время высоковольтный электрофорез при градиенте напряжения 50—100 В/см позволяет примерно в 2 раза сократить продолжительность опыта, что уменьшает диффузию и увеличивает четкость зональных границ.

С помощью электрофореза на бумаге можно выделять препаративные и идентифицировать малые количества аминокислот. Кроме того, электрофорез на бумаге лежит в основе анализа сложных пептидных смесей, например ферментативных белковых гидролиза-тов, методом «отпечатков пальцев». Анализируемый этим методом препарат подвергается комбинированному электрофоретическому и хроматографическому разделению или комбинированному электрофоретическому разделению при разных значениях рН, причем как в том, так и в другом варианте разделение проводят в двух направлениях под прямым углом друг к другу.

Для упрощения переноса исследуемого материала из одной системы разделения в другую предложен прием «пришивания», который используют при электрофорезе на бумаге, анализируя пептидные карты. Участок фильтровальной бумаги, содержащий фракцию исследуемого материала, выделенную хроматографией или электрофорезом, вырезают и затем пришивают на швейной машине к новому листу фильтровальной бумаги. Этим приемом устраняется необходимость элюирования, которое обычно сопровождается нежелательными потерями материала. Фактически можно ограничиться элюи-рованием только на конечном этапе очистки.

Перенос материала с помощью пришивания, а также использование специфических химических реакций с некоторыми боковыми группами аминокислотных остатков позволили разработать особый метод электрофореза, так называемый диагональный электрофорез. С его помощью можно довольно легко выделять пептиды, имеющие в своем составе цистеин, цистин, метионин, гистидин или лизин, rj

А. АППАРАТ ДЛЯ СРЕДНЕВОЛЬТНОГО ГОРИЗОНТАЛЬНОГО ЭЛЕКТРОФОРЕЗА И ЕГО ИСПОЛЬЗОВАНИЕ

Электрофорез осуществляется при низкой температуре в небольших объемах буферного раствора на расположенной горизонтально фильтровальной бумаге при градиенте напряжения 30—40 В/см.

1. Описание аппарата. На фиг. 15 схематически изображен изготовленный в мастерской аппарат для горизонтального электрофореза с охлаждающей плитой из плексигласа размером 44 х44 см. Циркуляция охл

страница 40
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148

Скачать книгу "Аминокислоты, пептиды и белки" (2.92Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
склад для хранения вещей москва дмитровское шоссе
поддон для душа 80x120 huppe
промышленные шкафы
табличка уходя выключи свет и закрой окна

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(24.02.2017)