химический каталог




Аминокислоты, пептиды и белки

Автор Т.Дэвени, Я.Гергей

ься к различным приборам, с помощью которых проводится последующий структурный анализ вещества. Детекторы должны быть исключительно стабильны, очень чувствительны и доступны для очистки. Последнее требование, как правило, не обязательно в обычном ГХ-ана-лизе, однако нужно следить за тем, чтобы оно выполнялось при анализе производных аминокислот.

4. Электронные приборы, самописцы и измерительные блоки должны удовлетворять критериям количественного ГХ-анализа. Но в действительности даже приборы самых последних выпусков могут иметь нелинейные характеристики. Особенность приборов, снабженных электронозахватными детекторами, заключается в том, что их характеристика нелинейна по природе.

Довольно трудно рекомендовать какой-либо прибор специального типа из имеющихся в продаже, который был бы наиболее подходящим для решения определенной задачи. К тому же самодельные приборы, используемые в специальных исследованиях аминокислотного анализа, иногда проявляют себя лучше, чем некоторые приборы, выпускаемые промышленностью.

КОЛИЧЕСТВЕННАЯ ОЦЕНКА ГАЗОВЫХ ХРОМАЮ ГРАММ

Несмотря на то что некоторые вопросы количественного определения уже затрагивались, здесь будет рассмотрен ряд других аспектов этой проблемы в связи с тем, что цель аминокислотного анализа всегда состоит в определении молярного аминокислотного состава пептида. Если не учитывать определенных условий и ограничений, в ГХ особенно велика вероятность получения неверных количественных результатов. II*

При количественной оценке газовых хроматограмм должны соблюдаться следующие условия, суммированные ниже. Образец следует испарять полностью и все компоненты пропускать через дозатор, трубки, колонку и детектор всегда одним и тем же способом, иначе нужно прибегать к анализу с помощью так называемых внутренних стандартов. В первом случае все компоненты определяют в виде пиков, поддающихся количественной оценке, а во втором каждый пик идентифицируют и рассчитывают отдельно.

Перед фракционированием проводят полную химическую обработку образца, а при хранении следят за тем, чтобы он не подвергался воздействию света, воды или воздуха (во избежание потерь при испарении или разложении).

Дозатор должен быть узким, чистым и достаточно нагретым. Минимальное количество образца вносят в специально подобранную колонку или капилляр и обеспечивают строго постоянный поток газа. Следует знать также, какие вещества разделяли в предыдущих экспериментах на данной колонке.

Хорошо известно, что оценка газовых хроматограмм производится путем измерения площадей индивидуальных пиков. Действительно, точно измеренная площадь пика дает величину, из которой может быть рассчитан конечный результат анализа. Однако с достаточной быстротой и точностью площадь пика можно измерить только с помощью электронных интеграторов. Применявшийся иногда способ планиметрического измерения площади вручную оказался на практике непригодным из-за слишком больших ошибок. Согласно другому методу, делают копию хроматограммы и после соответствующей обработки вырезают и взвешивают пики. Если отсутствует электронный интегратор с автоматической коррекцией нуля, перед тем как вырезать пики, необходимо провести базовую линию. После ее проведения полностью разрешенные пики отделяют друг от друга разделяющими линиями, а затем измеряют их площади.

Как показала практика, хорошие результаты можно получить, применяя следующие приближенные методы расчета:

I) Л = А • шг0>5 ; 2) A=k-k-t\ 3) А = h »

где А — площадь пика; h — высота пика; ш0,ь — ширина пика на уровне половины высоты; k — коэффициент; / — полное время удерживания; w15— ширина пика на уровне 15% высоты и йу85 — ширина пика на уровне 85% высоты.

Последний, третий метод особенно удобен для измерения пиков, которые имеют заметные «хвосты» (фиг. 70).

Когда площади пиков измерены, их нужно умножить на индивидуальные поправочные коэффициенты, специфичные для каждого вещества; в противном случае ошибка количественного анализа может значительно превышать 15%. Поправочный коэффициент зависит не только от природы исследуемого вещества, но и от параметров прибора, в первую очередь от детектора. Поправочные коэффициенты, опубликованные в литературе, довольно неточные, к тому же они могут зависеть от количества определяемого вещества. Для пламенно-ионизационного детектора можно рассчитать приближенные поправочные коэффициенты [1, 48].

Поскольку при аминокислотном анализе желательно иметь значения количеств компонентов в молях, а данные ГХ-аналйза дают весовые проценты, необходим соответствующий пересчет. Воспроизводимость данных количественной ГХ составляет в лучшем случае ±1%; при тщательно подобранных условиях работы прибора воспроизводимость может быть улучшена до ±0,2%. Общая точность аналитических данных часто составляет ±10%, так как сюда входят ошибки, обусловленные предварительными препаративными стадиями работы. Для повышения ценности аналитических данных при вычислении простых погрешностей рекомендуется использовать методы математической

страница 126
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148

Скачать книгу "Аминокислоты, пептиды и белки" (2.92Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
Газовые котлы Vaillant ecoTEC plus VU INT IV 346/5-5 H
участок в раково на новой риге
курсы парикмахера в уссурийске где и сколько стоит
привод воздушной заслонки siemens gbb 131.1e в новосибирске

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(08.12.2016)