химический каталог




Аминокислоты, пептиды и белки

Автор Т.Дэвени, Я.Гергей

удно получить достоверные аналитические данные простым измерением площадей пиков, поскольку систематические ошибки измерений при этом могут превышать 10—15%. Вопрос количественных измерений в ГХ-анализе хорошо разобран Кайзером [48] (фиг. 70); ниже мы рассмотрим некоторые детали его.

Для количественной оценки хроматограмм производных аминокислот существуют следующие возможности:

1. Применение неполярных и полярных неподвижных фаз и вычисление индексов удерживания и скачка индекса удерживания при переходе от неполярной фазы к полярной [46, 52].

2. Непосредственное сочетание газовой и тонкослойной хроматографии.

3. Соединение газового хроматографа с масс-спектрометром [13, 20, 33, 75, 97].

4. Одновременное использование двух детекторов, таких, как ячейка теплопроводности и пламенно-ионизационный детектор.

Фиг. 70. Количественная оценка хроматограмм: измерение площадей пиков с помощью приближенных методов (см. текст).

При использовании первой возможности окончательная идентификация достигается только при условии анализа большого числа стандартных образцов, тогда как сочетание ГХ с масс-спектромет-рией обеспечивает самый простой и наиболее эффективный способ идентификации. В этом случае пик образца вместе с гелием (специально очищенным для этой цели) поступает через щель размером 0,1 мм (также омываемую чистым гелием) в стеклянный капилляр с внутренним диаметром около 0,005 мм, помещенный в систему высокого вакуума масс-спектрометра (например, спектрометра типа СН5, выпускаемого фирмой Atlas Mess- and Analysentechnik Gmb H, ФРГ). ГХ-сигнал, поступающий из ионного источника, регистрируется самописцем обычным образом, как это делается в ГХ-детекторах. Развертывающее устройство дает сигнал во всех случаях, когда максимум пика проходит через систему. В этот момент (время запаздывания 0,1 с) с помощью фотоумножителя быстро сканируется (за несколько десятых секунды) вся область интересующих экспериментатора масс, и масс-спектр регистрируется самописцем (самопишущий УФ-гальванометр). Даже если некоторые пики накладываются друг на друга, такой анализ дает практически всю информацию, необходимую для полного установления структуры.

Хотя этот метод довольно дорогостоящий, он не имеет себе равных по эффективности анализа.

Вторая возможность — комбинация с тонкослойной ? хроматографией — при подходящих условиях также может привести к достоверной идентификации, причем это самый дешевый из комбинированных методов.

СПЕЦИАЛЬНЫЕ ТРЕБОВАНИЯ К ПРИБОРАМ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ УСЛОВИЯ ГХ-АНАЛИЗА ПРОИЗВОДНЫХ АМИНОКИСЛОТ И ПЕПТИДОВ

РАБОЧАЯ ТЕМПЕРАТУРА

Поскольку почти все виды производных аминокислот представляют собой молекулы с выраженной полярностью, обладающие ограниченной химической устойчивостью и заметной термолабильностью, необходимо подбирать для проведения анализа оптимальную температуру.

Контроль температуры должен распространяться на все ступени процесса: важна как температура, при которой образец вводится, так и температура конструктивных элементов трубок, главным образом металлических. Следует еще раз подчеркнуть, что процесс разделения, избирательность и время удерживания существенно зависят от температуры. Природные смеси аминокислот всегда сложны. Практически невозможно выполнить полный анализ смеси при одной температуре, поскольку, какой бы образец ни фракционировался, в смеси обычно присутствуют как высоко-, так и низкомолекулярные соединения с разной степенью полярности. Из сказанного ранее следует, что метод с программированием температуры является лишь разновидностью многоколоночного метода, в котором, например, три колонки используются при трех различных температурах, а детектор присоединен к каждой колонке. В таком ступенчатом температурном методе объединяются достоинства изотермического метода и метода программирования температуры — правда, при этом предъявляются очень высокие требования к аппаратуре. Маки-суми и Сароф [60] воспользовались этим комбинированным методом для разделения метиловых эфиров трифторацетиламинокислот (ТФА-аминокислот).

Особое преимущество ГХ с программированием температуры состоит в возможности работы с относительно холодным дозатором,, Это позволяет предотвратить первичное термическое разложение? анализируемого вещества даже при его высокой концентрации или в присутствии соединения, способного с ним реагировать. Более того, ГХ с программированием температуры (ТГХ) обеспечивает оптимальную температуру разделения для любой пары веществ, чего нельзя достичь для всех компонентов на изотермической колонке. Вместе с тем ТГХ более сложна, чем изотермический анализ: длина колонки, способ пропитки и другие методические факторы не могут выбираться произвольно, а должны быть тщательно согласованы.

Существуют серьезные сомнения в отношении ценности слишком длинных колонок при ТГХ-анализе некоторых производных аминокислот [16]. Однако причиной того, что в определенных случаях разделение проходило хорошо на коротких колонках (от 0,5 до 2 м) и не удавалось на длинн

страница 123
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148

Скачать книгу "Аминокислоты, пептиды и белки" (2.92Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
ewaq011acv
стеллажи стальные
маршрутное такси в аренду
курсы монтажника

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(21.10.2017)