химический каталог




Аминокислоты, пептиды и белки

Автор Т.Дэвени, Я.Гергей

ческих параметров, обсуждаемых ниже.

СВОЙСТВА РАЗДЕЛЯЮЩЕЙ ЖИДКОСТИ

В выбранных условиях работы прибора жидкая фаза определяет порядок выхода различных производных аминокислот с разделяющей колонки и относительные расстояния между ними (см. табл. 13, стр. 306).

298 Глава XIV

41

ТВЁРДАЯ ФАЗА

Твердая фаза (носитель) обычно представляет собой гладкую или шероховатую поверхность из чистого металла. Ею может служит! также поверхность трубки, модифицированная каким-либо неор* ганическим соединением, на которой в виде пленки сконденсирован^ жидкая фаза. В последнем случае говорят о разделяющем капил? ляре, а методику в целом называют капиллярной ГХ [44] (фиг. 67);

2 1

Фиг. 67. Набивная колонка и открытый капилляр.

/ — трубка (из стали 6X1 или 4X1, стекла или других материалов); 2 —плотная набивка частицами носителя (Н) размером 0,20—0,25 или 0,10—0,12 мм (площадь поверхности 0,3—3 мг/г); носитель импрегнируется жидкой фазой (ЖФ) (0,5—20% по весу); 3 — одна нз последних фракций, проходящая через колонку; 4 — капиллярная трубка, сделанная из стали, стекла или других материалов, с внешним диаметром 2 мм и внутренним диаметром 0,10—0,25 мм; 5 — пленка жидкой фазы толщиной Ю-3—Ю-2 мм на внутренней

поверхности капилляра.

В качестве твердого носителя можно использовать также какой-либо неорганический пористый материал, например диатомовую землю [47], которую для ГХ аминокислот необходимо тщательно дезактивировать. Очень хорош в качестве твердой фазы, например, хромосорбС При анализе аминокислот с большим успехом применяют твердые органические соединения (например, хромо-сорб Т), на которых получаются абсолютно симметричные пики даже для сильно полярных веществ.

ТЕМПЕРАТУРА

Рабочая температура или температурный градиент (т.е. скорость повышения температуры в град/мин в методике с программированием температуры) также влияют на процесс разделения (фиг. 68). Наряду с некоторыми недостатками метод с программированием температуры имеет много достоинств; он позволяет получить наилучшие результаты на данной разделяющей колонке, если сравнивать его с другими методами.

Эффективность разделения зависит также от ряда других факторов: потока газа-носителя, длины колонки, перепада давления

игх

5 ТГХ

U34 5

ИГХ — изотермическая газовая хроматография; температура постоянная. ТГХ—газовая хроматография с программированием температуры; температура увеличивается от Т0 до Т- В обоих случаях смесь делится иа 6 пиков.

и, что не менее важно, качества набивки колонки, которую можно охарактеризовать эффективностью колонки, выражаемой числом теоретических тарелок на метр длины колонки.

ДЕТЕКТИРОВАНИЕ, РЕГИСТРАЦИЯ, ИЗМЕРЕНИЕ, ИДЕНТИФИКАЦИЯ *

Из многочисленных детекторов, существующих в настоящее время, для количественного анализа аминокислот пригодны только детектор по теплопроводности, газовый денситометр и пламенно-ионизационный детектор. В детекторе теплопроводности для обеспечения достаточной чувствительности в качестве газа-носителя необходим гелий или водород, в газовом денситометре — азот или гелий, а в пламенно-ионизационном детекторе — высокоочищен-ный азот.

Поскольку для ГХ-анализа вообще и анализа аминокислот в частности характерно стремление к получению наилучшего разделения при минимальных затратах веществ, обычно предпочитают пользоваться наиболее чувствительным из всех детекторов — пламенно-ионизационным (фиг. 69).

Принцип метода. К границе слабого пламени, питаемого током высокоочищенного водорода (получаемого электролизом), со скоростью 2—3 л/ч подводят ток газа-носителя. Если газ-носитс содержит органические соединения, то в радикальной реакции сгорания будут образовываться промежуточные сильно ненасыще! ные полимерные вещества, которые легко ионизируются, a Tai полимерный углерод. В электрическом поле, создаваемом межд] горелкой (отрицательный полюс) и измерительным электродом!

Фиг. 69. Схематическое изображение пламенно-ионизационного детектора.

/ — место присоединения измерительного прибора;' 2 — выступы для охлаждения электрода; 3 — стержневой стальной электрод; 4— изоляция (тефлон); 5 — выход использованного газа; 6—пламя; 7 — горелка с регулируемым пламенем; 8 — форсунка; 9 — подсоединение ионизирующего напряжения; 10 — экраны; // — выход с разделяющей колонки.

легко ионизируемые частицы отдают электроны и в результате образуется ионный ток (приблизительно 10~12—10~6 А). После соответствующих преобразований электронный компенсационный самописец регистрирует ионный ток в милливольтах (от 0,01 мВ до 1 В) как функцию времени удерживания.

Поправки, необходимые для количественной оценки, специфичны для каждого вещества и могут быть найдены с достаточной точностью путем калибровки или расчета, причем решающим фактором в этих расчетах является содержание углерода в исследуемом соединении [48].

Определяя количество вещества, следует помнить, что не зная качественного состава образца (если отсутствуют измерения или расчеты специфических поправок), тр

страница 122
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148

Скачать книгу "Аминокислоты, пептиды и белки" (2.92Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
tokio hotek купить билеты
чехлы на паспорт
купить гладильный комод в москве
заказать изделия из металла

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(08.12.2016)