химический каталог




Аминокислоты, пептиды и белки

Автор Т.Дэвени, Я.Гергей

ого анализа эта последняя область применения ГХ не представляет особого интереса.

ПРИНЦИП МЕТОДА

Для ГХ-анализа, разумеется, прежде всего необходим газовый хроматограф. Ниже дано описание этого прибора, подробное настолько, насколько это необходимо с точки зрения анализа производных аминокислот. Принцип работы прибора иллюстрирует фиг. 65. Прибор состоит из источника газа-носителя и различных измерительных и контрольных приборов, с помощью которых поддерживается постоянный поток газа. Газ-носитель, прежде чем попасть в колонку, проходит через дозатор, куда вводится 0,05—5,0 мг анализируемого вещества; здесь вещество испаряется и переносится газом-носителем в колонку (или капилляр). В колонке происходит разделение по принципу различного удельного давления паров компонентов и их различной растворимости в разделяющей жидкости. Различные скорости миграции компонентов обусловлены так296 Глава XIV

. , а

же различными коэффициентами распределения между газовой и жидкой фазами. В силу всех этих причин время миграции компо^ ненгов через колонку различно. Длина набивной колонки чащ| всего равна 2 или даже 10 м, а длина капилляров — 5—100 м. *

В конце разделяющей колонки газ-носитель вместе с разделенные ми компонентами, которые все уже находятся в газовой фазе, попадает в детектор. Этот прибор дает измеряемый электрический сигнал^ зависящий от концентрации вещества и регистрируемый самопишущим милливольтметром. В результате получают график изменения концентрации компонентов со временем (т. е. хроматограмму), на котором пики располагаются над базовой линией, соответствующей нулевой концентрации. Положение пиков можно охарактеризовать полным временем удерживания вещества, т. е. промежутком времени от момента нанесения образца до появления пики на самописце. Из этих данных можно вычислить действительное время удерживания и, исходя из параллельных сравнительных измерений, индекс удерживания, который характерен для данного изучаемого вещества.

Площадь под пиками отражает количество вещества, и это по^ зволяет вычислить количественный состав смеси. Используя разные разделяющие жидкости и различную температуру и сравнивая" время удерживания исследуемых и уже известных веществ, добавляемых к образцу, можно проводить качественный анализ. Если,, например, в образце предполагается наличие производного Ала, то на хроматограмме должен появляться соответствующий пик в опре^ деленном предполагаемом месте. Производное Ала, добавленное к^ образцу, должно давать пик, который будет накладываться на пик изучаемого вещества. С помощью определенных реакций, при которых происходят превращения производного Ала, соответствующий^ пик на хроматограмме может быть удален или смещен. Некоторые другие приемы, которые здесь не обсуждаются, также помогают! идентифицировать компоненты.

МЕТОДИКА

ВВОД ОБРАЗЦА

С помощью микродозатора аминокислотный раствор вводят s реактор, где под влиянием различных реагентов аминокислоты превращаются в летучие вещества. Если имеются уже готовые летучие производные, их прямо вводят в прибор. В любом варианте! вносимый образец должен испариться в токе газа-носителя в процес^ се, протекающем в нагреваемой камере, куда вводят 5—50 мг образу ца в сухом виде или в виде концентрированного раствора (фиг. 66). \

При изотермическом ГХ-анализе переход в газообразное состоя-| ние должен происходить очень быстро, за доли секунды. В то же! время смесь не должна подвергаться изменениям, т. е, соотношение?

веществ должно оставаться постоянным. Изменение соотношения веществ происходит в том случае, если вспомогательный материал, например растворитель, и легко летучая фракция образца испаряются очень быстро, а потом начинается испарение менее летучих фракций. Когда используют методику ГХ с программированием температуры, образец наносят другим способом.

При ГХ-анализе производных аминокислот мы уже столкнулись с определенными трудностями. Если дозатор горячий, летучие образцы испаряются мгновенно без повреждения. Но если дозатор имеет слишком высокую температуру, то могут происходить химические превращения термолабильных веществ. Следовательно, успешное проведение анализа зависит от правильного выбора температуры.

Фиг. 66. Устройство для ввода проб (дозатор).

/ — шприц (например, гамильтоиовский шприц иа 10 мкл); 2 —объем, занимаемый образцом; 3— игла; 4— термоустойчивая резиновая прокладка; 5 — вход для га-за-иосителя; 6 — испарительная камера со сменными элементами; 7 — нагревательный элемент испарительной камеры; в—колонка.

РАЗДЕЛЕНИЕ

Испарившись в потоке газа-носителя, образец находится в условиях, близких к условиям вакуумной перегонки. Сильным разведением в инертном газе достигается его эффективная защита от дальнейшего повреждения. Выбор газа-носителя определяется используемым детектором (см. ниже), а также и другими факторами, которые следует принимать во внимание. Газ-носитель переносит испарившийся образец в ячейку прибора, где происходит разделение, зависящее от различных физических и хими

страница 121
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148

Скачать книгу "Аминокислоты, пептиды и белки" (2.92Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
ноутбук в аренду москва
купить кровать 160х200 недорого со склада
купить баскетбольный мяч в ростове на дону
акустический комплект для домашнего кинотеатра 7

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(20.10.2017)