химический каталог




Аминокислоты, пептиды и белки

Автор Т.Дэвени, Я.Гергей

. Однако во многих случаях возникает необходимость проведения большого числа анализов. Например, при исследовании структуры белка для определения полной аминокислотной последовательности белка со средним молекулярным весом требуется проделать около 3—4 тыс. анализов.

Ионообменная хроматография в тонком слое

243

Приблизительно столько же испытаний необходимо провести при селекции растений для отбора одного нового вида с повышенным содержанием белка или более высоким содержанием Лиз и Мет. В клинической практике также имеется область, где анализ аминокислот используется в массовых обследованиях для выявления нарушений аминокислотного метаболизма у новорожденных. Во многих странах такое обследование уже введено в обязательном порядке, правда, с применением микробиологических методов, поскольку исследование огромного числа образцов другими методами аминокислотного анализа реально ие выполнимо.

Ясно, что в таких исследованиях метод колоночной хроматографии неприменим, тогда как тонкослойная хроматография — очень простая, быстрая и удобная процедура, при которой разделяемые вещества обнаруживаются достаточно легко; она ие требует дорогостоящей аппаратуры и применима для массовых испытаний. Правда, ее разрешающая способность значительно уступает колоночной ионообменной хроматографии. Несмотря на это, относительно молодая методика быстро распространяется во всех областях химии, и это не случайно.

Для разделения, например, смеси из 16 аминокислот хроматографию в тонком слое, как и хроматографию на бумаге, необходимо проводить в двух направлениях. Это снижает ценность метода, так как двумерные хроматограммы довольно трудно оценивать, особенно когда в пробе имеется больше 16 аминокислот. К тому же при хроматографии в двух направлениях для каждой пробы необходима отдельная пластинка, а это создает дополнительные сложности, связанные с рабочим местом, обработкой хроматограмм и -т. д.

Высокая разрешающая способность ионообменной хроматографии и простота тонкослойной хроматографии породили стремление объединить эти два метода и разработать технологию тонкослойной хроматографии в фиксированном слое ионообменника.

Вначале казалось, что осуществить это довольно легко. В тонкослойной хроматографии применяются различные сорбенты (силика-гель, окись алюминия, полиамид, различные производные целлюлозы и т. д.) н различные связывающие агенты (гипс, крахмал, декстраи, поливиниловый спирт и т. д.). Предполагали, что эти агенты и условия, при которых они применяются, вполне подходящи и для фиксирования смол.

К сожалению, первые эксперименты показали, что дело обстоит не так просто, и для того чтобы проводить хроматографию в слое ионообмецника, необходимо разрешить следующие проблемы:

1. Слой должен быть крепким. Его механическая прочность должна быть подобна прочности слоев силикагеля, т. е. он должен быть таким, чтобы его можно было брать руками/писать на нем мягким грифелем и хранить сложенным в стопку,

9* v

2. Ионообменная хроматография возможна только в водных растворах: следовательно, слой должен быть влагопрочным.

3. Связывающее вещество не должно уменьшать набухания фиксированного ионообменника (определяемого емкостью) и его разрешающей способности.

4. Слой должен сохранять прочность в органических растворителях, потому что выявление фракционируемых компонентов (например, в реакции с нингидрином) обычно ведут с их использованием (ацетон, бутанол и т. д.).

Нам удалось разработать способ приготовления слоя ионообменной смолы со связывающим веществом, отвечающего всем необходимым требованиям, и найти условия для хроматографии в нем. Наш способ был принят заводом Chinoin-Nagyteteny (Венгрия) и фирмой Machery-Nagel (ФРГ).

В настоящее время в продажу поступили пластинки «Фиксион» венгерского производства и «Ионэкс» немецкого производства.

ТИПЫ ПЛАСТИНОК «ФИКСИОН»

Для приготовления фиксированного слоя ионообменника в качестве подложки можно использовать стеклянную или пластмассовую пластинку. Слой на стеклянной подложке более удобен, чем слой, фиксированный на пластмассе, так как стекло обладает жесткостью, а пластмассовая пластинка слишком эластична и поэтому может изгибаться под тяжестью нанесенного ионообменника. В связи с этим пластмассовую подложку приходится дополнительно закреплять, и, кроме того, при ее использовании возникают нежелательные электростатические «пристеночные эффекты». - Тем не менее слои, фиксированные на пластмассе,, обладают рядом достоинств, немаловажных для экспериментатора. Размеры стеклянных пластинок стандартны (20 х 20 или 10 х 20 см),, тогда как пластмассовую пластинку, покрытую слоем, можно раз-, резать ножницами на части любого размера. Это особенно важно, когда экспериментатор подбирает подходящий буферный раствор для нового метода.

? В принципе для приготовления тонкого слоя годится любой тип смолы. Одна из пластинок — «Фиксион 50 х 8» — имеет слой сильного катионообменника, фиксированный на пластмассовой пленке. Цифры в названии пластинки указывают на тип смол

страница 100
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148

Скачать книгу "Аминокислоты, пептиды и белки" (2.92Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
светящиеся стеновые панели на кухне
часы настенные hermle купить
KVR03730422110kh
Многоцелевые ножницы

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(04.12.2016)